新型冠狀病毒肺炎患者糞便與咽拭子病毒核酸檢測(cè)結(jié)果分析

陸曉東 李靜云 徐葉進(jìn) 薛亞?wèn)|

新型冠狀病毒肺炎疫情現(xiàn)已成為全球范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題[1-2]。新型冠狀病毒是人冠狀病毒新成員，是一種新型的RNA病毒[3]，可引起患者發(fā)熱、干咳、呼吸困難、乏力和其他癥狀[4-5]。現(xiàn)有的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第六版）》[6]中提到的診斷標(biāo)準(zhǔn)與出院標(biāo)準(zhǔn)均有病毒核酸檢測(cè)。本研究通過(guò)回顧性分析新型冠狀病毒肺炎患者的臨床資料，探討患者糞便與咽拭子病毒核酸檢測(cè)結(jié)果的相互關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 回顧性分析2020年1月22日至2月27日金華市中心醫(yī)院收治的新型冠狀病毒肺炎患者17例。新型冠狀病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)符合國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行第六版）》。其中男10例，女7例；年齡18～87歲，中位年齡37歲。患者均有疫區(qū)旅行史或新型冠狀病毒肺炎患者接觸史；初診發(fā)熱8例，流涕1例，咳嗽14例，無(wú)明顯臨床癥狀1例。17例患者初診胸部CT檢查顯示未見(jiàn)病變2例，肺部炎癥15例，其中磨玻璃片狀影8例。臨床分型：輕型2例，普通型14例，重型1例。各例患者臨床表現(xiàn)見(jiàn)表1。本研究經(jīng)金華市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 患者入院后每日均行糞便和咽拭子病毒核酸檢測(cè)，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)。檢測(cè)儀器：美國(guó)Life Technologies有限公司生產(chǎn)的 ABI 7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。檢測(cè)試劑：試劑一為新型冠狀病毒核酸檢測(cè)試劑盒（上海之江生物科技股份有限公司）；試劑二為新型冠狀病毒（ORF1ab/E/N基因）核酸檢測(cè)試劑盒（上海伯杰醫(yī)療科技有限公司）。使用試劑一檢測(cè)患者標(biāo)本，若檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，則用試劑二進(jìn)行復(fù)核，若兩種試劑檢測(cè)結(jié)果一致，得出檢測(cè)結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 患者糞便與咽拭子病毒核酸檢測(cè)結(jié)果 17例患者初診咽拭子病毒核酸檢測(cè)17例陽(yáng)性。患者入院后均持續(xù)進(jìn)行了糞便與咽拭子病毒核酸檢測(cè)，其中咽拭子病毒核酸檢測(cè)轉(zhuǎn)陰后糞便病毒核酸檢測(cè)持續(xù)陽(yáng)性7例（41.1%）。本組未見(jiàn)糞便病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性后，咽拭子病毒核酸檢測(cè)持續(xù)陽(yáng)性的患者。患者糞便與咽拭子病毒核酸檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1。

表1 17例患者臨床表現(xiàn)

2.2 患者咽拭子病毒核酸檢測(cè)轉(zhuǎn)陰性時(shí)間與咽拭子病毒核酸檢測(cè)轉(zhuǎn)陰性后糞便病毒核酸檢測(cè)持續(xù)陽(yáng)性時(shí)間 本組患者咽拭子病毒核酸檢測(cè)轉(zhuǎn)陰性時(shí)間平均8.4 d，咽拭子病毒核酸檢測(cè)結(jié)果轉(zhuǎn)陰性后糞便病毒核酸檢測(cè)結(jié)果持續(xù)陽(yáng)性7例，最長(zhǎng)者達(dá)24 d。患者入院后均進(jìn)行抗病毒治療，咽拭子與糞便病毒核酸檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性持續(xù)時(shí)間個(gè)體差異較大，且有患者未出現(xiàn)糞便病毒核酸檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性。患者咽拭子病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性時(shí)間與咽拭子病毒核酸檢測(cè)轉(zhuǎn)陰性后糞便病毒核酸檢測(cè)持續(xù)陽(yáng)性時(shí)間見(jiàn)圖2。

圖1 患者糞便與咽拭子病毒核酸檢測(cè)結(jié)果

3 討論

新型冠狀病毒肺炎患者臨床癥狀常見(jiàn)為發(fā)熱，部分可表現(xiàn)為鼻塞或腹瀉等臨床癥狀，極少部分可無(wú)明顯臨床癥狀。本組患者中初診咽拭子病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性17（100%）例；由于試劑檢測(cè)的局限性，避免出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性的標(biāo)本，均采用兩種試劑盒進(jìn)行復(fù)核，只有兩種試劑盒檢測(cè)均陽(yáng)性的標(biāo)本才判為陽(yáng)性。初診胸部CT檢查未見(jiàn)病變2例，肺部炎癥15例，其中磨玻璃片狀影8例。結(jié)果表明臨床資料、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查，任何一項(xiàng)資料均對(duì)篩查新型冠狀病毒肺炎有一定的幫助，該結(jié)論與《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第六版）》相符。同時(shí)提示，基層一線篩查人員可以綜合多手段真正起到“早發(fā)現(xiàn)、早預(yù)防”的作用。

新型冠狀病毒序列包括直接接觸血管緊張素轉(zhuǎn)換酶 2（angiotensin-converting enzyme 2，ACE2）的受體結(jié)合基序（receptor-binding motif，RBM），與重癥急性呼吸綜合征冠狀病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus，SARS-Cov）的序列相似，強(qiáng)烈提示新型冠狀病毒以ACE2為受體[7]。研究發(fā)現(xiàn)，新型冠狀病毒S蛋白與ACE2的親和力是SARS-Cov的10～20倍。研究者認(rèn)為，可能正是新型冠狀病毒S蛋白與ACE2的高親和力讓新型冠狀病毒在人與人之間傳播變得容易。SARS-Cov除累及肺部外，腸道也是受累及的器官[8]，推測(cè)新型冠狀病毒可能具有類似的特性。本組17例患者均進(jìn)行了糞便病毒核酸檢測(cè)，陽(yáng)性7例。經(jīng)對(duì)癥治療后17例患者體溫已恢復(fù)3 d以上，呼吸道癥狀明顯好轉(zhuǎn)，CT檢查顯示肺部炎癥已完全吸收，連續(xù)兩次咽拭子病毒核酸檢測(cè)陰性，滿足了出院標(biāo)準(zhǔn)，但這7例患者咽拭子轉(zhuǎn)陰后糞便仍持續(xù)陽(yáng)性，且最長(zhǎng)可達(dá)到24 d。其無(wú)胃腸道不適應(yīng)現(xiàn)象，接受抗病毒治療的時(shí)間與類型對(duì)糞便中病毒持續(xù)的時(shí)間也沒(méi)有總體影響。糞便病毒核酸檢測(cè)持續(xù)陽(yáng)性的時(shí)間明顯長(zhǎng)于咽拭子病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性持續(xù)的時(shí)間，這與Zheng等[9]觀點(diǎn)相同。同時(shí)本組患者未發(fā)現(xiàn)糞便病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰性而咽拭子持續(xù)陽(yáng)性的病例，可說(shuō)明新型冠狀病毒在消化道的清除時(shí)間要晚于在呼吸道的清除時(shí)間。由于實(shí)驗(yàn)室病毒核酸檢測(cè)方法學(xué)的局限性，當(dāng)糞便中存在病毒的核酸片段時(shí)，病毒核酸檢測(cè)也能呈陽(yáng)性，不能確保檢測(cè)的就是活的病毒。但如果糞便中檢測(cè)到活的病毒，那么糞便排泄在新型冠狀病毒傳播中的作用不容忽視。《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第六版）》出院標(biāo)準(zhǔn)即體溫已恢復(fù)3 d以上，呼吸道癥狀明顯好轉(zhuǎn)，CT檢查顯示肺部炎癥已完全吸收，連續(xù)兩次呼吸道標(biāo)本核酸檢測(cè)陰性。但是糞便病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性的患者出院標(biāo)準(zhǔn)是否僅僅局限于這一標(biāo)準(zhǔn)還需全面而仔細(xì)的評(píng)估。筆者認(rèn)為這些患者出院后進(jìn)行居家隔離和定期復(fù)檢病毒核酸必不可少，而且需直到糞便病毒核酸檢測(cè)陰性后才能解除隔離。同時(shí)，與咽拭子相比，糞便標(biāo)本采集或可減少醫(yī)務(wù)人員感染，特別是在防護(hù)設(shè)備不足的情況下。

圖2 患者咽拭子病毒核酸檢測(cè)轉(zhuǎn)陰性時(shí)間與咽拭子病毒核酸檢測(cè)轉(zhuǎn)陰性后糞便病毒核酸檢測(cè)持續(xù)陽(yáng)性時(shí)間

綜上所述，新型冠狀病毒肺炎患者糞便與咽拭子病毒核酸檢測(cè)可提高診斷準(zhǔn)確性，降低假陰性率，也能更好地指導(dǎo)臨床治療和評(píng)價(jià)治療效果。當(dāng)然，在預(yù)防和控制新型冠狀病毒流行中，糞便標(biāo)本大規(guī)模病毒核酸檢測(cè)的可行性也還需要更加全面的研究與發(fā)現(xiàn)再評(píng)估，新型冠狀病毒是否可經(jīng)糞-口傳播值得探討。