女性間質(zhì)性膀胱炎患者尿頻、膀胱疼痛與膀胱組織血管生成的關(guān)系

孫堯榮 陳輝 顏輝輝 林麗

間質(zhì)性膀胱炎（interstitial cystitis，IC）是一種慢性非細(xì)菌性膀胱炎性病變，以女性多見，主要臨床表現(xiàn)有尿頻、尿急、夜尿增多、膀胱和盆腔區(qū)疼痛等[1]。目前關(guān)于IC的病因及診斷標(biāo)準(zhǔn)尚不明確，也無有效的治療方法[2]。許多IC患者因無法得到及時(shí)、有效的治療，出現(xiàn)各種并發(fā)癥，嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量[3]。近年來，膀胱組織血管生成機(jī)制是IC病因的研究熱點(diǎn)，血管生成可能在IC的發(fā)展中起著重要的作用。本研究采用O'Leary-Sant問卷IC癥狀指數(shù)（interstitial cystitis symptoms index，ICSI）、IC 問題指數(shù)（interstitial cystitis problem index，ICPI）及視覺模擬評分法（visual analogue scale，VAS）評估女性IC患者尿頻、膀胱疼痛等癥狀，同時(shí)檢測膀胱組織血管生成相關(guān)因子[血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、CD31]表達(dá)，分析兩者的相關(guān)性，以期尋找IC的潛在治療目標(biāo)。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2016年1月至2018年6月在臺(tái)州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院就診且確診為IC（依據(jù)美國國立糖尿病、消化病及腎病協(xié)會(huì)制定的IC診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]）的女性患者 45 例為 IC 組，年齡 30～74（56.7±11.3）歲；另選取同期在本院就診、年齡匹配且無IC的正常女性45例為對照組，年齡 28～77（53.3±13.9）歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）資料不完整；（2）患有結(jié)石、尿路感染、膀胱癌、結(jié)核性膀胱炎及消化科或婦科相關(guān)疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審查通過，所有研究對象知情同意。

1.2 方法

1.2.1 IC癥狀、問題及疼痛量表評估 （1）O'Leary-Sant問卷：該問卷分為ICSI、ICPI兩部分，ICSI主要評估患者癥狀的嚴(yán)重程度，ICPI主要評估癥狀對患者的困擾程度，兩者均從夜尿、尿頻、尿急、膀胱疼痛等4個(gè)方面進(jìn)行評估，總分35分[5]。得分越高表示越嚴(yán)重。（2）VAS：主要評估患者疼痛程度，用0～10分表示，0分表示不痛，10分表示最痛[6]。

1.2.2 膀胱組織血管生成相關(guān)因子表達(dá)檢測 采用免疫組化SP法。在尿道膀胱鏡下取膀胱壁活檢標(biāo)本，4%多聚甲醛固定24 h，石蠟包埋，3 μm切片，梯度乙醇脫水，3% H2O2室溫孵育10 min，抗原修復(fù)，3%山羊血清封閉，滴加一抗（VEGF或CD31抗體），4℃孵育過夜，PBS沖洗，滴加二抗，室溫孵育2 h，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，脫水，封片。在奧林巴斯CKX31倒置顯微鏡下觀察并拍攝照片，細(xì)胞中有黃色、棕色或棕黃色顆粒及條索判定為陽性表達(dá)[7]。每個(gè)切片選取5個(gè)代表性視野，采用Image J 6.0軟件檢測陽性區(qū)域面積占該視野總面積的比例，即陽性表達(dá)占比。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料符合正態(tài)分布的用±s表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的用M（P25，P75）表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。ICSI、ICPI及VAS評分與膀胱組織中血管生成相關(guān)因子陽性表達(dá)占比的相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組對象ICSI、ICPI及VAS評分比較 IC組ICSI、ICPI及VAS評分均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表 1。

表1 兩組對象ICSI、ICPI及VAS評分比較（分）

2.2 兩組對象膀胱組織中血管生成相關(guān)因子陽性表達(dá)占比比較 IC組膀胱組織中VEGF、CD31陽性表達(dá)占比明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表2和圖1。

表2 兩組對象膀胱組織中血管生成相關(guān)因子陽性表達(dá)占比比較（%）

圖1 兩組對象膀胱組織中血管生成相關(guān)因子陽性表達(dá)（VEGF為血管內(nèi)皮生長因子，IC為間質(zhì)性膀胱炎；免疫組化SP法，×200）

2.3 ICSI、ICPI及VAS評分與膀胱組織中血管生成相關(guān)因子陽性表達(dá)占比的相關(guān)性 ICSI、ICPI及VAS評分與膀胱組織中VEGF、CD31陽性表達(dá)占比均呈正相關(guān)（均P＜0.05），見表 3。

表3 ICSI、ICPI及VAS評分與膀胱組織中血管生成相關(guān)因子陽性表達(dá)占比的相關(guān)性（r值）

3 討論

IC的臨床癥狀主要有夜尿、尿頻、尿急、膀胱疼痛等，而O'Leary-Sant問卷恰好針對這4個(gè)方面進(jìn)行評價(jià)[8]，目前主要用于IC癥狀及問題的評估。O'Leary等[9]認(rèn)為ICPI或ICSI評分＞6分診斷IC的靈敏度高達(dá)0.900，特異性高達(dá) 0.950。Kushner等[10]也認(rèn)為 O′Leary-Sant問卷在IC診斷中具有較好的靈敏度和特異度。此外，有學(xué)者認(rèn)為VAS可用于IC患者的疼痛評價(jià)[11]。不少研究發(fā)現(xiàn)，IC患者在患病期間VAS評分較高[7，12]。因此，本研究采用O′Leary-Sant問卷、VAS評估女性IC患者尿頻、膀胱疼痛等癥狀的嚴(yán)重程度。

血管生成是指在已有的微血管基礎(chǔ)上，形成以毛細(xì)血管為主的新血管系統(tǒng)的過程[13]。血管生成會(huì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展，炎癥會(huì)刺激神經(jīng)，導(dǎo)致IC患者產(chǎn)生疼痛[14]。葉雄俊等[15]研究發(fā)現(xiàn)，IC患者膀胱血管小球的形成與血管生成相關(guān)因子表達(dá)關(guān)系密切。張述蓉[16]對IC小鼠膀胱組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)有血管擴(kuò)張、炎細(xì)胞浸潤、點(diǎn)狀出血和上皮細(xì)胞壞死脫落等現(xiàn)象。目前，臨床上也采用電凝來阻斷IC患者膀胱壁上密集粗大的血管和血管網(wǎng)交叉點(diǎn)，同時(shí)電凝膀胱黏膜絲樣出血點(diǎn)。以上結(jié)果提示，血管生成在IC發(fā)病過程中起重要作用。因此，本研究對女性IC患者尿頻、膀胱疼痛與膀胱組織血管生成的關(guān)系作了深入探討，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IC組ICSI、ICPI及VAS評分及膀胱組織中VEGF、CD31陽性表達(dá)占比均明顯高于對照組，且ICSI、ICPI及VAS評分與膀胱組織中VEGF、CD31陽性表達(dá)占比均呈正相關(guān)。由于女性IC患者尿頻、膀胱疼痛與膀胱組織血管生成密切相關(guān)，抑制膀胱組織血管生成可能是IC的一個(gè)潛在治療目標(biāo)。