動物性食品中磺胺類藥物殘留檢測方法

王邦國

（靖遠縣農產品質量安全檢驗檢測管理站 730699）

1 分析方法

1.1 處理樣品的方法 液相萃取法是樣品處理方法中最經典的。 由于磺胺類藥物在非極性有機溶劑中不易溶解，而在極性有機溶劑中易溶解，通常工作人員采用CH2Cl2、C3H6O、甲基氰以及醋酸乙酯等作為萃取液。 由于某些有機溶劑能夠讓樣品蛋白喪失活性，因此，大力發展固相萃取法勢在必行，有利于更快速、順利地萃取與蛋白結合的磺胺類藥物殘留。 固相萃取法優勢很多，比如可操作性強、裝置簡單、適用范圍較為廣泛等。 其中陽離子交換樹脂以及C18 等是最常見固相萃取裝置。

基質固體分散技術和超過濾方法是近年來比較流行的萃取方法。 超過濾法能夠有效解決共萃取干擾、乳膠產生等很多液相萃取技術問題，同時簡化檢測步驟，提升檢測結果的準確性，減少分析費用。MSPD 的制備工藝為：將樣品與C18 柱填料混合，裝柱，之后利用正己烷清洗柱子，及時去掉脂質化合物，最后利用二氯甲烷清理掉被吸附的組分，保留高極性雜質。 相對于傳統樣品處理方法，MSPD 具有如下優勢：樣品處理方法效率較高，而且操作簡單；有效抑制和消除了乳化作用；溶劑消耗較少。 此外，超臨界流體萃取（SFE）也可用于從樣品中提取磺胺類藥物。

1.2 樣品凈化方法 在進行色譜分析之前，需要凈化和濃縮樣品， 以防止樣品基質中的復雜成分嚴重破壞色譜儀器和干擾目標分析物。 其中薄層色譜、柱色譜以及固相萃取等都是常見方法。 絕大多數凈化方法和樣品基質以及萃取過程都與萃取劑使用關聯不大。 其最終目的是去除干擾， 選擇性地提取磺胺類藥物。 磺胺類藥物一般以離子化合物的形式存在。 因此，將水相的pH 值調節到最佳范圍以獲得較高的回收率是磺胺類藥物凈化工藝的關鍵所在。

1.3 檢測技術 現階段，熒光檢測、質譜以及紫外-可見檢測是磺胺類藥物的常用的檢測技術， 能夠適用于各種磺胺類藥物的檢測，尤其是對含有各種磺胺類藥物的樣品的分析，但其選擇性不高。 紫外-可見檢測和GC/MS 需要在柱前或柱后進行衍生反應。 而質譜是不需要衍生的，因此得到了廣泛的應用。

2 常見的磺胺類藥物殘留檢測方法

2.1 微生物法 現階段，理化分析、免疫分析以及微生物學法是磺胺類藥物殘留檢測的常見方法。 微生物法是一種適用范圍非常廣泛的方法。 主要利用SAS 有效抑制特異微生物生理功能和代謝， 從而定性或定量測定樣品中SAS 的殘留量。 由此可見，此方法可操作性非常強、成本費用較低，但也存在一定不足，比如靈敏度低、敏感性差以及容易受其他抗生素干擾。 因此，很難定性定量地測定，從而無法達到測定標準要求。

2.2 免疫分析法 早在20 世紀80 年代，SAS 殘留免疫分析就已經誕生，是一種基于靶點和抗體結合的檢測方法。 其中放射免疫分析、熒光免疫分析以及酶聯免疫分析都屬于免疫分析法。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）是當前應用最廣泛的藥物殘留檢測方法，不僅分析樣本量大，而且靈敏度高，可操作性強等諸多優勢。 王喜良等人利用金免疫層析法檢測雞肉內磺胺嘧啶的殘留。半定量檢測需要在15min 內完成， 檢測限為5ng/mL， 并且還發現，此檢測藥劑并沒有與其他磺胺類藥物發生交叉反應，且回收率高達71%～95%，但是也存在一定短板，對于多種藥物殘留檢測能力不足，抗體制備較難等，適用范圍相對狹窄。

2.3 快速檢測法 隨著國內市場和進出口貿易對食品安全的日益重視，動物性食品中藥物殘留超標的現象也時有發生。 由于傳統實驗室使用藥物殘留檢測技術時，往往對技術人員、實驗室環境以及硬件設置要求較高，而且測試時間相對交纏，導致傳統的實驗室儀器分析測試技術已經無法適用大規模現場測試需求，無法在一般企業和基層食品安全檢測部門得到應用。 而現場快速檢測技術以其檢測靈敏度高、效率高、技術要求低等諸多優勢，備受基層工作人員喜愛。 由此可見，磺胺類藥物檢測已成為時下最為的研究課題，因其操作簡單、成本造價低廉、準確度高而聞名。 膠體金免疫層析法是一種可廣泛應用于即時檢測領域的分析方法。

膠體金免疫層析法（GICC）是一種結合金標記技術、檢測技術和免疫層析法的新型固相標記技術。 膠體金顆粒擁有兩個非常突出的特性：一是吸附性極強，特別是對免疫球蛋白、酶、血清蛋白等蛋白質分子吸附性極強。 膠體金顆粒能夠吸附膠體金標記過的蛋白質；二是金標蛋白結合位點的顯色反應，適用于定性和快速檢測。

膠體金免疫層析法以膠體金顆粒為抗體標記， 與特定的反應膜位置反應，出現生紫紅色。 并能直接觀察到相應結果。 基層檢測部門和食品企業檢測時，可以使用膠體金免疫層析法。 根據膠體金技術，研制了多種磺胺類快速試紙。 與傳統的實驗室檢測方法相比，可以快速檢測肉、奶、蜂蜜、動物體液等不同食品基質中磺胺類藥物殘留，膠體金免疫層析法具有成本造價低、靈敏度高、工藝簡單、成本低等諸多優勢，而且將其制作成試紙后，不僅方便保存和攜帶，而且操作簡單易行，在磺胺類藥物殘留的快速檢測方面前景一片光明，具有明顯優勢。

公共衛生和衛生機構最主要的任務是檢測動物性食品中磺胺類藥物殘留情況，要求使用的分析方法必須做到造價成本低、準確度高，使用方便、省時，同時檢測限要低于MRLs。 在人類不斷努力探索下，相信不久，必然就專研出分析效率高，適用多種磺胺類藥物殘留檢測的分析方法，從而更好地保護人類健康。