大黃側(cè)柏散薄層色譜鑒別研究

李毓祺

(臺山市中醫(yī)院，臺山 529200)

大黃側(cè)柏散是臺山市中醫(yī)院的醫(yī)院制劑，該制劑由大黃、黃柏、澤蘭、側(cè)柏葉、薄荷5味中藥材組成的，具有活血祛瘀、消腫止痛功效。用于瘡瘍初起時紅腫熱痛、靜脈炎和急慢性盆腔炎的治療。治法以活血祛瘀、消腫止痛、清熱涼血為主，而中藥外敷可使外用藥物有效成分直接作用于氣血瘀滯的患處，是中醫(yī)傳統(tǒng)治法之一[1，2]。其方中重用生大黃，其功擅破積滯、行瘀血，又可泄熱，唐宋《日華子本草》譽贊其可“通宣一切氣，調(diào)血脈，利關(guān)節(jié)”，外敷可推陳致新，力破血瘀之陳。其性苦寒，歸脾、胃、大腸、肝、心包經(jīng)。具有瀉下攻積，清熱瀉火，涼血解毒，逐瘀通經(jīng)，利濕退黃之效，現(xiàn)代藥理研究顯示其具有抗菌抗感染作用，其中大黃含的羥基蒽醌衍生物對多種革蘭陽性菌和陰性菌有抑制作用，抗炎效果顯著[3-5]。側(cè)柏葉，性苦寒，歸肺、肝、脾經(jīng)，具有涼血止血、清熱解毒之效，藥理研究表明其含的黃酮類物質(zhì)具有鎮(zhèn)靜抗炎抗菌作用[6，7]，兩者共為君藥；黃柏苦寒沉降，可清熱燥濕、瀉火解毒，現(xiàn)代藥理研究顯示其抗炎效果顯著，抑制炎性物質(zhì)釋放，其中黃柏所含小檗堿及少量黃柏堿物質(zhì)能對疼痛信號進行阻礙，鎮(zhèn)痛療效顯著[8，9]，為臣藥；澤蘭功可補氣血、利血脈、散瘀血、生肌肉，又可活血祛瘀、消腫止痛。《日華子本草》載：“通九竅，利關(guān)脈，養(yǎng)血氣，破宿血，消癥癖”，更有《太平圣惠方》用澤蘭丸“治諸傷折，踠損蹉跌，筋骨疼痛”[10]，其療效可見一斑，為佐藥；薄荷辛涼，清熱透疹行氣，引諸藥通竅，現(xiàn)代藥理研究表明其在鎮(zhèn)靜解熱、抗炎抗菌、抑制病毒方面有特效，同時其還有促進透皮吸收的作用[11-13]，為使藥。諸藥合用，功專活血祛瘀，消腫止痛，清熱涼血。用于瘡瘍初起時紅腫熱痛、靜脈炎和急慢性盆腔炎的治療。又因其采用外敷用法，藥物在患處發(fā)揮作用，無需經(jīng)胃腸道代謝，藥物安全性高。本制劑使用方便，臨床療效佳，患者依從性好，深受廣大患者好評。本次研究對方中的大黃及黃柏進行薄層鑒別，建立起初步的質(zhì)量控制方法，從而保證該制劑的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

FA1604S電子天平(賽多利斯-季爾國際貿(mào)易(上海)有限公司);XMTD2888風熱式電熱恒溫干燥箱(山東省禾雅實驗科技有限公司)，GoodSeedⅡ型薄層色譜儀(上海科哲生化科技有限公司)。

1.2 藥品試劑

大黃側(cè)柏散(臺山市中醫(yī)院自制，批號：20190108，20190521，20191106)，大黃、黃柏對照藥材(中國藥品生物制品檢定所)。薄層層析用硅膠G(中國青島海洋化工集團公司)；甲醇、鹽酸、石油醚(30～60℃)、甲酸乙酯、甲酸、冰醋酸、正丁醇等所用試劑均為分析純。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 大黃藥材的薄層鑒別

2.1.1供試品制備

3個批號的大黃側(cè)柏散各取5g，加10%鹽酸溶液2mL和甲醇30mL，使用超聲進行處理，時間為15min，并進行濾過處理了，之后將濾液進行蒸干處理，將殘渣放入甲醇中，甲醇的量為2mL，將其進行充分的溶解，將制備液作為供試品溶液。

2.1.2對照藥材溶液制備

取大黃對照藥材，量為1g，制備方法同于2.1.1中的供試品制備方法。

2.1.3陰性對照溶液制備

取全部處方藥材(不含大黃)，其制備方法參照大黃側(cè)柏散的制備工藝方法及2.1.1的具體操作方法。

2.1.4靈敏度試驗

將供試品溶液放入甲醇中進行稀釋處理，以稀釋10倍為宜。

2.1.5薄層鑒別

將上述制備的溶液各取出2μL，并在硅膠G薄層上進行滴點，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層液為展開劑，展開(展開缸預平衡15分鐘)，完成后取出并進行晾干處理，使用紫外光燈進行檢視。觀察供試品的色譜在與對照藥材相對應的位置上顯現(xiàn)出相同的熒光斑點，且顏色為橙黃色。

2.2 黃柏藥材的薄層鑒別

2.2.1供試品溶液制備

3個批號的大黃側(cè)柏散各取5g，并加入1%醋酸甲醇溶液，量為40mL，進行超聲處理，時間為20min，之后進行濾過并對濾液進行蒸干處理，把2mL甲醇放入殘渣中進行溶解，制備所得的溶液為供試品溶液。

2.2.2對照藥材溶液制備

取黃柏作為對照藥材，量為0.5g，其制備的方法與2.2.1中供試品溶液制備方法相同。

2.2.3陰性對照溶液制備

取除了黃柏以外的全部處方藥材，制備方法同于大黃側(cè)柏散的工藝方法，具體的操作按照2.2.1中的方法。

2.2.4靈敏度試驗

將供試品溶液放入甲醇中進行稀釋處理，以稀釋10倍為宜。

2.2.5薄層鑒別

將上述制備的溶液各取出2μL，并在硅膠G薄層板上進行滴點，展開劑為正丁醇-冰醋酸-水(7∶2∶2)，展開，并將制備液取出后進行晾干處理，使用紫外光燈進行照射檢視。觀察供試品色譜在與對照藥材相應的位置中顯現(xiàn)出相同的顏色的熒光斑點。

3 結(jié)果

3.1 大黃的薄層鑒別

從圖1中可看出，供試品及對照藥材的色譜熒光斑點均呈現(xiàn)出一一對應，能夠清晰地看出色譜斑點，具有較好的分離度與靈敏度，陰性的對照物沒有產(chǎn)生干擾。

3.2 黃柏的薄層鑒別

從圖2可看出，供試品與黃柏對照藥材的色譜均在相應的位置上呈現(xiàn)出，有相同的熒光斑點，且具有較高的清晰度、分離度與靈敏度，陰性的對照物沒有產(chǎn)生干擾。

4 討論

而薄層鑒別法是一種簡便、可靠、快速的定性鑒別方法，本制劑所含藥味多，成分復雜，對處方中具有抗炎鎮(zhèn)痛消腫的大黃、黃柏進行薄層色譜檢測，經(jīng)反復試驗陰性對照無干擾，薄層色譜分離效果好，可用于定性評價大黃側(cè)柏散質(zhì)量。