前列腺癌組織中環氧化酶-2 和細胞周期蛋白D1 的表達水平及臨床意義

程肇平，程鈺，盧柳

安康市中心醫院病理科，陜西 安康7250000

前列腺癌是臨床上常見的男性惡性腫瘤，多見于70～80 歲老年男性，由于人口老齡化加劇，前列腺癌在中國的發病率逐年升高，嚴重威脅男性的生命健康[1-3]。為了解前列腺癌的生物學行為，目前醫學工作者在不斷尋找前列腺癌發生發展的分子機制[4]。本研究比較了前列腺癌組織和前列腺增生組織中環氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）和細胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表達情況，并分析不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 和cyclin D1 的表達情況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015 年4 月至2018 年10 月安康市中心醫院收治的前列腺癌患者。納入標準：①接受手術治療；②經病理檢查確診為前列腺癌；③手術前未接受相關內分泌治療、放療或化療。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②未能耐受或完成手術；③合并嚴重的心血管系統疾病。依據納入和排除標準，本研究共納入47 例前列腺癌患者。患者的年齡為58～83 歲，平均年齡為（73.97±7.34）歲；術前血清前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平為（42.73±12.55）ng/m；依據Gleason 病理分級系統[5]，7 分以上（低分化腺癌）19 例，7 分（中分化腺癌）16 例，4～6 分（高分化腺癌）12 例；依據Whitmore-Jewett 分期標準[6]，A 期7 例，B 期14 例，C期16 例，D 期10 例。另 選擇2015 年4 月至2018 年10 月安康市中心醫院收治的前列腺增生患者。納入標準：①接受手術治療；②經病理檢查確診為前列腺增生；③術前未行抗前列腺增生治療；④無腫瘤病史及家族史。排除標準：①合并其他前列腺病變；②未能完成全系統前列腺增生治療。依據納入和排除標準，本研究共納入31 例前列腺增生患者。患者的年齡為57～81 歲，平均年齡為（71.55±6.95）歲；術前血清PSA 水平為（1.72±0.23）ng/ml。兩組患者的年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。分別收集前列腺癌患者和前列腺增生患者的前列腺癌組織47 例和前列腺增生組織31 例。

1.2 實驗方法

1.2.1 主要試劑 鼠抗人COX-2 和cyclin D1 單克隆抗體及鏈菌素-生物素標記（labeled streptavidin biotin，LSAB）免疫組化試劑盒均購自福州邁新生物技術開發有限公司，均為即用型。

1.2.2 免疫組織化學染色方法 采用微波-EliVi‐sionTM（MW-EliVisionTM）免疫組織化學染色方法[7]檢測前列腺癌組織和前列腺增生組織中COX-2 和cyclin D1 的表達情況，實驗步驟按照試劑盒說明書進行，采用H2O2-二氨基聯苯胺（diaminobenzi‐dine，DAB）顯色[8]。采用已知COX-2 和cyclin D1陽性的前列腺癌組織作為陽性對照，采用枸櫞酸緩沖液代替一抗工作液作為陰性對照。

1.2.3 結果判定標準 COX-2 和cyclin D1 陽性均為棕黃色，COX-2 在細胞質中表達，cyclin D1 在細胞核中表達[9-10]。每張切片隨機選取10 個高倍視野，計算陽性細胞數。無陽性細胞為（-），陽性細胞數＜25%為弱陽性（+），25%≤陽性細胞數≤50%為中等陽性（++），陽性細胞數＞50%為強陽性（+++）。陽性表達率=（中等陽性+強陽性）例數/總例數×100%。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18.0 軟件對數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，等級資料的比較采用秩和檢驗。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 前列腺癌組織與前列腺增生組織中COX-2 和cyclin D1 表達情況的比較

前列腺癌組織中COX-2 的陽性表達率為80.85%（38/47），明顯高于前列腺增生組織的16.13%（5/31），差異有統計學意義（χ2=31.632，P＜0.01）。前列腺癌組織中cyclin D1 的陽性表達率為61.70%（29/47），明顯高于前列腺增生組織的19.35%（6/31），差異有統計學意義（χ2=13.542，P＜0.01）。（表1、表2）

表1 前列腺癌組織與前列腺增生組織中COX-2的表達情況

表2 前列腺癌組織與前列腺增生組織中cyclin D1 的表達情況

2.2 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 表達情況的比較

不同年齡、腫瘤直徑前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 的陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。不同分化程度、臨床分期、轉移情況前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 的陽性表達率比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表3）

表3 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2表達情況的比較（n=47）

2.3 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中cyclin D1 表達情況的比較

不同年齡前列腺癌患者前列腺癌組織中cy‐clin D1 的表達情況比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。不同腫瘤直徑、分化程度、臨床分期、轉移情況前列腺癌患者前列腺癌組織中cyclin D1 的表達情況比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表4）

表4 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中cyclin D1表達情況的比較（n=47）

3 討論

前列腺癌是發生于前列腺的上皮性惡性腫瘤，包括腺癌（腺泡腺癌）、導管腺癌、尿路上皮癌、鱗狀細胞癌和腺鱗癌等類型，絕大部分為腺癌[11-12]。本病起病隱匿，早期無明顯癥狀，隨著腫瘤發展，可表現為進行性排尿困難、尿頻、尿急、尿失禁等，侵及膀胱可出現血尿，骨轉移可引起病理性骨折、截癱等。前列腺癌的治療方法主要包括手術、內分泌治療、放化療等，但本病起病隱匿，發病時多為晚期。近年來有研究表明，COX-2 和cyclin D1在前列腺癌的發生發展中具有重要作用，為臨床治療前列腺癌帶來了新的方向[13]。

本研究結果顯示，COX-2 和cyclin D1 在前列腺癌組織中的陽性表達率分別為80.85%、61.70%，分別明顯高于前列腺增生組織的16.13%、19.35%，差異均有統計學意義（P＜0.01）。表明COX-2 和cyclin D1 的表達情況均與前列腺癌的發生具有密切聯系。不同年齡、腫瘤直徑前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 的陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。低分化、臨床分期為C～D期、腫瘤出現轉移患者的COX-2 陽性表達率分別為94.74%、92.31%、95.00%，腫瘤出現轉移、分化程度越低、臨床分期越晚，COX-2 的陽性表達率越高。不同年齡前列腺癌患者前列腺癌組織中cy‐clin D1 的表達情況比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。腫瘤直徑≥5 cm、低分化、臨床分期為C～D期、腫瘤出現轉移患者的cyclin D1 陽性表達率分別為76.00%、89.47%、84.62%、85.00%，腫瘤出現轉移、腫瘤直徑越大、分化程度越低、臨床分期越晚，cyclin D1 的陽性表達率越高。表明前列腺癌的惡性程度越高，COX-2 和cyclin D1 的表達水平越高，提示在前列腺癌的發生發展過程中，COX-2 和cy‐clin D1 具有協同作用。

環氧化酶（cyclooxygenase，COX）又稱前列腺素內氧化酶還原酶，可促進前列腺素生成，具有參與炎癥反應的作用，COX 有兩種同工酶COX-1 和COX-2，COX-2 定位于核膜，其產物可進入核內，對靶細胞的基因轉錄具有調節作用，具有抑制免疫反應、促進腫瘤血管生成及抑制腫瘤細胞凋亡等作用[14]。因此，COX-2 水平升高時，機體對腫瘤細胞的免疫力下降，而腫瘤血管增多、腫瘤細胞凋亡減緩更容易促進腫瘤組織的發展[15]。研究顯示，在前列腺癌組織中可檢測出COX-2 高表達，且惡性程度越高其表達水平越高，反映了COX-2 對前列腺癌的發展具有促進作用[16]，與本研究結果一致。cyclin D1 是調控細胞進行分裂增殖的蛋白，在細胞分裂由G1期進入S 期的過程中具有重要作用，其表達異常會引起細胞周期調節失控，細胞增殖發生異常。因此當cyclin D1 過度表達時，前列腺細胞不斷由G1期進入S 期，發展為癌，前列腺癌細胞不斷增殖，進一步促使腫瘤組織發展、惡化[17]。

綜上所述，前列腺癌患者中COX-2 和cyclin D1的表達水平相對較高，COX-2 和cyclin D1 可能參與前列腺癌的發生發展。