超高效液相色譜法在衛(wèi)生檢驗(yàn)中的應(yīng)用

徐修臻，管梓寧*

（1.青島市黃島區(qū)疾病預(yù)防控制中心，山東 青島 266499；2.黃島區(qū)第三人民醫(yī)院，山東 青島 266499）

現(xiàn)如今科技日新月異，各種分離檢測手段層出不窮，2014年美國WATERS公司推出了世界上第一臺(tái)超高效液相色譜儀[1]，其借助高效液相色譜的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測手段等全新技術(shù)[2]，成為物質(zhì)分離分析的一個(gè)新領(lǐng)域，并在近些年得到了快速的發(fā)展。目前國標(biāo)方法中尚無超高效液相色譜的檢測方法，為更好的運(yùn)用此法來開展工作，本文對(duì)超高效液相色譜在各領(lǐng)域的應(yīng)用作簡要概述。

1 在食品分析中的應(yīng)用

隨著食品工業(yè)的快速發(fā)展，食品添加劑品種不斷增加。在2007年我國發(fā)布的GB2760《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中，允許使用的食品添加劑有22類，近2000種；在現(xiàn)代食品加工中常用的食品添加劑有防腐劑、甜味劑、合成色素、咖啡因等，而有些不法商家會(huì)在生產(chǎn)中使用過量的食品添加劑，對(duì)人體健康造成危害，這就需要有更可靠的技術(shù)手段來檢測。如凌云等[3]建立超高效液相色譜法，對(duì)14種化學(xué)添加劑進(jìn)行測量，定量限在0.01-0.6mg/Kg；董桂賢等[4]采用超高效液相色譜法同時(shí)測定醬腌菜中的7種防腐劑與2種甜味劑，檢出限為0.2-1.0 mg/Kg，定量限為0.5-4.0 mg/Kg；劉泰然等[5]建立了超高效液相色譜法來同時(shí)測定17種食品添加劑，檢出限為0.00070-0.0074 mg/Kg，定量限為0.0024-0.043 mg/Kg；黃永輝等[6]建立了超高效液相色譜法同時(shí)測定碳酸飲料中22種添加劑，其檢出限為0.02-0.50mg/Kg；肖立群[7]研究了超高效色譜同時(shí)測定種面制品中防霉劑和多種防腐劑；王希希[8]等建立了凝膠色譜-超高效液相色譜法同時(shí)測定20種常見非食用色素；涂小柯等[9]建立了同時(shí)測定茶葉中兒茶素、酚酸及生物堿含量的超高效液相色譜分析方法；石偉杰等[19]建立了固相萃取-超高效液相色譜法測定茶葉中檸檬黃、新紅、莧菜紅、胭脂紅、日落黃和亮藍(lán)等6種著色劑，檢出限為0.1～1.0mg/kg，定量限為0.3～3.0mg/kg；楊曉倩等[10]建立了同時(shí)測定肉制品中檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃和誘惑紅等5種合成著色劑含量的固相萃取-超高效液相色譜法，振蕩超聲提取肉制品中的著色劑，檢出限為0.05～0.20 mg/kg，最低定量限為0.15～0.60 mg/kg；云環(huán)等[11]建立了固相萃取-超高效液相色譜同時(shí)測定乳制品中蘋果酸、酒石酸、乳酸、乙酸、檸檬酸、富馬酸等6種有機(jī)酸的分析方法；鐘慈平[12]建立的固相萃取-超高效液相色譜法可同時(shí)檢測食品中直接紅Ⅱ、直接紅28、紅2G、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、赤蘚紅等染料；曾永芳等[13]建立了固相萃取-超高效液相色譜法同時(shí)測定葡萄酒中的12種合成色素，檢出限為0.05 mg/L～0.15 mg/L。

黃曲霉毒素是一類結(jié)構(gòu)相似、有較強(qiáng)毒性和致癌性的化合物,付朝輝等[14]建立了同時(shí)測定發(fā)酵茶葉中的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的超高效液相色譜法，其檢出限為0.32ug/Kg(B1、G1)，0.18ug/Kg(B2、G2)； 氟喹諾酮類藥物 (Fluoroquinolone, FQs) 是一類十分重要的人工合成抗菌藥物，被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中，金高娃等[15]建立了超高效液相色譜法測定水產(chǎn)品中的諾氟沙星、環(huán)丙沙星和恩諾沙星三種喹諾酮藥物殘留，其檢出限為0.1ug/Kg，定量下限為0.3ug/Kg；維生素是維持人類生命活動(dòng)必須的有機(jī)化合物，蒲明清等[16]建立了高效液相色譜法同時(shí)測定保健食品中的多種水溶性維生素；喹乙醇是一種抗菌促生長劑，廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)，對(duì)禽和魚類，有中度至明顯蓄積毒性，劉淳[30]建立了測定豬肉中喹乙醇?xì)埩袅康某咝б合嗌V法，檢出限為0.015μg/g。

經(jīng)以上所述超高效液相色譜法在食品分析中的廣泛應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)該法簡便、快速，其準(zhǔn)確度和靈敏度高，且檢出限低，對(duì)于制定食品中添加劑的加入標(biāo)準(zhǔn)可提供更精確的數(shù)據(jù)，同時(shí)在保障人類健康問題上也提供了更可靠的依據(jù)（超高效液相色譜法在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用見表1）。

2 在環(huán)境及其他領(lǐng)域中的應(yīng)用

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，我國的環(huán)境問題日益嚴(yán)重,采用準(zhǔn)確、快速的方法來檢測有毒有害物質(zhì)的含量尤為重要。苯并芘是致癌性最強(qiáng)的多環(huán)芳烴，張少君等[17]建立了固相萃取-超高效液相色譜法測定水中痕量苯并(a)芘的方法；加氯消毒劑是主要的飲用水消毒技術(shù)，消毒副產(chǎn)物因其環(huán)境毒性及潛在的致癌性引起人民的密切關(guān)注，劉艷等[18]建立了固相萃取/超高效液相色譜法測定飲用水中9種痕量鹵乙酸的分析方法；王昭申等[19]采用反相超高效色譜法測定生活飲用水中的溴氰菊酯，最低檢出質(zhì)量為0.05ug，最低檢出濃度為0.02ug/L；環(huán)境內(nèi)分泌干擾物烷基酚中以壬基酚、辛基酚為代表，毒性大且不易降解，張鈺等[20]建立了飲用水中壬基酚、辛基酚的分析方法，檢出限為0.005-0.020ug/L；王曉楠等[21]建立了固相萃取-超高效色譜法測定水中速滅威、異丙威、乙霉威及仲丁威的分析方法，檢出限為0.049-1.600ug/L；趙志紅等[22]建立了超高效液相色譜法快速、靈敏檢測水中苯酚的方法；俞濤等[23]建立了同時(shí)測定飲用水中苯酚、間甲酚、3,4-二甲酚、2,5-二甲酚的超高效液相色譜方法，樣品直接過濾測定；潘亞娟等[24]建立了工作場所中丙烯酰胺的超高效液相色譜法測定法，檢出限為0.02ug/ml；王點(diǎn)點(diǎn)[41]等利用UPLC建立了能夠同時(shí)測定水和土壤中噻蟲啉、氟蟲雙酰胺及其代謝產(chǎn)物的快速分析方法；趙寬[25]等建立了利用超高效液相色譜法測定土壤中檸檬酸、草酸、蘋果酸、酒石酸和丁二酸的分析方法,檢測限為0.05-0.18 mg / kg，并測定了不同土壤樣品中的有機(jī)酸含量。

還可以將超高效液相色譜應(yīng)用于其他領(lǐng)域。如謝強(qiáng)勝等[26]將UPLC應(yīng)用于藥品領(lǐng)域，測定了唐解膠囊中鹽酸苯乙雙胍、羅格列酮和格列本脲含量；區(qū)潔雯[27]等應(yīng)用超高效液相色譜測定了復(fù)方氟嗪酸鼻噴劑中氧氟沙星、鹽酸萘甲唑啉和馬來酸氯苯那敏的含量；李偉亮[28]基于超高效液相色譜測定了化妝品中6種防腐劑的含量，有利于對(duì)化妝品中防腐劑的含量進(jìn)行控制；張斌[29]等利用超高效液相色譜測定了化妝品中7種美白成分的含量，檢出限為0.39-4.33mg/kg；楊培[30]等建立了應(yīng)用超高效液相色譜測定牙膏中丹皮酚、麝香草酚、和厚樸酚、厚樸酚、甘草次酸5種植物源活性成分的方法等。

超高效液相色譜在環(huán)境及其他領(lǐng)域中有著廣闊的應(yīng)用前景，能夠在短時(shí)間內(nèi)檢測出有毒有害物質(zhì)的含量，并為決策及標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。

3 結(jié) 語

目前，超高效液相色譜法（UPLC）在衛(wèi)生檢驗(yàn)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，相比于液相色譜技術(shù)，它具有更高的分辨率、靈敏度、分離度和更快的分析速度，而且在一定程度上減少了溶劑的用量。超高效液相色譜具有新型固定相填充劑和超高柱效，可以滿足各種高通量分析的要求。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，超高效液相色譜一定會(huì)在食品、環(huán)境和其他領(lǐng)域發(fā)揮出更大的作用。