EB病毒相關性傳染性單核細胞增多癥兒童T淋巴細胞亞群臨床意義分析

王冬萌，王 慧，韓 乾

（保定市兒童醫院/保定市兒童呼吸消化疾病臨床研究重點實驗室，河北 保定 071000）

1 資料與方法

1.1 研究對象

對象來源：選自保定市兒童醫院感染內科2019年7月-2019年9月住院的36例IM兒童T淋巴細胞亞群資料，并搜集患兒末梢血檢測異型淋巴細胞資料，對照組40例為健康體檢的正常兒童，患兒診斷標準參照《諸福棠實用兒科學》第8版提出的IM的診斷標準[1]。排除標準：篩選排除傳單診斷依據不充足的兒童，篩選排除并存細菌感染、支原體感染、噬血細胞綜合征、免疫缺陷的傳單兒童。

1.2 方法

由醫護人員無菌操作下抽取急性期患兒靜脈血2ml（不許溶血/血凝），由專人立即送檢檢驗科用流式細胞儀檢測TB淋巴細胞亞群。并同時采集末梢血，由專業檢驗技師進行涂片，手工分類計數異型淋巴細胞百分比。對照組同樣進行上述處理。回顧性分析36例IM兒童急性期T淋巴細胞亞群的變化，與40例對照組相比較，對比T淋巴細胞亞群變化規律。并探討IM兒童，流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群與末梢血檢測異型淋巴細胞的靈敏度。

1.3 TB淋巴細胞亞群的檢測

應用的TB淋巴細胞亞群的檢測儀器為美國BECKMAN COULTER公司提供的CVTOMICS FS 500 型流式細胞儀。TB淋巴細胞亞群的檢測8個項目：淋巴細胞占有核細胞（CD45+） 12.5(%)，T淋巴細胞(CD3+)%，輔助/誘導性T細胞(CD3+CD4+)%，抑制/細胞毒T細胞(CD3+CD8+)%，CD4+/CD8+，CD3+CD4-CD8-，B淋巴細胞(CD3-CD19+)%，NK細胞(CD3-CD16+CD56+)%；其中T細胞亞群的3個項目變化最明顯，以此T 細胞亞群的3 個項目為研究項目：輔助/誘導性T細胞(CD3+CD4+)%（CD4+）；抑制/細胞毒T細胞(CD3+CD8+)%（CD8+）；CD4+/CD8+比值。

1.4 末梢血異型淋巴細胞檢測：

專業檢驗技師進行涂片，手工制片、染色、顯微鏡觀察檢測異型淋巴細胞百分比，以＞10%為檢驗標準。

1.5 統計學處理

采用SPSS20.0統計軟件包進行統計學處理，計數資料以例數和構成比表示，組間差異比較采用x2檢驗；計量資料符合正態分布數據檢測結果求出均值±標準差，組間比較采用t檢驗。計量資料不符合正態分布數據檢測結果，檢測結果用中位數表示，組間比較采用Mann-Whitney Y檢驗，檢測結果P＜0.05為差異性有統計學意義，P＞0.05無差異性,不具有統計學意義。

2 結 果

2.1 發病年齡與性別

IM組兒童共36例，其中男27例，女9例，男女比為3：1，年齡從1歲3月～9歲不等，中位年齡4.0歲。對照組40例，其中男25例，女15例，男女比為1.67：1，中位數年齡3.0歲；從46天～11歲不等。兩組性別經卡方檢驗差異無統計學意義。具有可比性。（x2=1.37，P=0.242，P＞0.05）兩組年齡經正態檢驗不符合正態分布，故經Mann-Whitney Y檢驗差異無統計學意義（Z=-1.315，P=0.188，P＞0.05），具有可比性。

2.2 IM組與對照組T淋巴細胞亞群水平比較：

對急性期IM組與對照組兩組CD4+水平比較，符合正態分布，急性期IM組CD4+水平（17.97±7.69 ）%明顯低于對照組（35.61±8.09）%，差異有統計學意義（t=-9.717，P=0.000，P＜0.05）。對急性期IM組與對照組兩組CD8+水平比較，不符合正態分布，故經Mann-Whitney Y檢驗（Z=-7.314，P=0.000，P＜0.05），差異具有統計學意義。對急性期IM組與對照組兩組CD4+/CD8+比值水平比較，不符合正態分布，故經Mann-Whitney Y檢驗（Z=-7.237，P=0.000，P＜0.05），差異具有統計學意義。

2.3 IM兒童的T淋巴細胞亞群變化與末梢血異型淋巴細胞的陽性率。

36例IM患兒中T淋巴細胞亞群存在圖1所述變化規律者33例占91.67%。末梢血異型淋巴細胞＞10%者21例占58.33%，對照組未發現異型淋巴細胞＞10%者。將上述IM組T細胞亞群與末梢血異型淋巴細胞靈敏度（組內自身比較）進行卡方檢驗顯示：x2=10.667，P=0.001＜0.05，IM病人在T淋巴細胞亞群和末梢血異型淋巴細胞之間靈敏度有差異，具有統計學意義。

3 討 論

IM主要與皰疹病毒群的EB病毒（EBV）原發感染有關，我國是EBV感染高流行國家[2]，無癥狀排毒者為感染源。EB病毒很不穩定，外界環境中從未發現該病毒存在。唾液傳播為主要途徑，在兒科感染中具有普遍性，感染后終生潛伏于體內，不能被機體免疫系統徹底清除，所以被稱為“無處不在的成功病毒”。

兒童對EBV易感，可出現多臟器多系統受累，并與多種腫瘤的發生、發展相關，如兒童急性淋巴細胞性白血病、淋巴瘤等。嚴重威脅兒童健康。從發病機制上講，EBV多種并發癥的發生與人體細胞免疫異常有著非常密切關系。本研究以符合IM診斷標準者36例為研究對象，分析IM的T淋巴細胞亞群的變化規律，并與末梢血涂片的異型淋巴細胞進行比較分析。以協助臨床早期診斷，早期治療。減少并發癥的發生發展。

國外資料顯示，IM的發病年齡多數在青少年及年輕成人，而我國與之不同，發病高峰年齡為4-6歲，本研究對象：36例IM病人中位數年齡為4.0歲，位于我國發病年齡特點正常低值。有學者研究發現，發病年齡低于國外原因是此年齡段兒童免疫功能相對較低有關。另外，4-6歲年齡兒童常居于幼托機構及家庭，經唾液傳播發病可能性大。經過對IM組和對照組的T淋巴細胞亞群結果進行t檢驗發現，CD4+、CD4+/CD8+較對照組下降，CD8+上升，T淋巴細胞亞群是反應T淋巴細胞免疫功能的一組指標。CD4+、CD8+的改變及其比值降低說明IM患兒存在T細胞免疫功能過度抑制。探究其原因，病毒入侵口咽部上皮細胞，再入血刺激B淋巴細胞增殖，表達病毒特異性抗原，誘導免疫應答反應，所以臨床抽血檢驗發現EB病毒抗體陽性、EB病毒載量增高。

IM組：T淋巴細胞亞群變化與末梢血涂片查找異型淋巴細胞結果相比較，經卡方檢驗，T淋巴細胞亞群變化比末梢血異型淋巴細胞變化有意義。有研究認為，末梢血異型淋巴細胞多數是細胞毒性T淋巴細胞（CD8+），CD8+是T細胞表面的一種標記物，是T細胞的免疫表型。研究它的變化規律可以彌補末梢血靈敏度低和形態學上的不足，彌補檢驗員對異型淋巴細胞識別的熟練度的主觀差異，使得對異型淋巴細胞的識別變得標準化。所以在中國發病年齡段偏小、臨床非特異性表現為主、臨檢證據不足時，行T細胞亞群檢測可協助IM診斷。