秦巴山區(qū)柿葉化學(xué)成分研究進(jìn)展

◎趙玟溪 張強(qiáng) 柏忠易 陳成昊 豆佳媛

一、引言

柿葉為柿科柿屬植物柿（Diospyros kaki L.）的新鮮或干燥葉，據(jù)統(tǒng)計(jì)柿科植物全世界大約有500 多種，主要分布于熱帶和亞熱帶，其中柿屬有350 多種，在我國(guó)大約有40 多種，主要有柿、君遷子和油柿等，以柿最為常見(jiàn)，分布十分廣泛，是我國(guó)南北各地普遍栽培的食用品種。秦巴山區(qū)柿葉較為豐富，使用方便，醫(yī)用療效確切，日益受到人們的重視。柿葉具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用，柿葉含有豐富的VC、蘆丁、膽堿、黃酮苷、胡蘿卜素、多種氨基酸及鐵、鋅、鈣等對(duì)人體健康有益的營(yíng)養(yǎng)成分，據(jù)測(cè)定，每百克柿葉中含有蛋白質(zhì) 11.05 g 、脂肪 6.84 g 、糖類 54.84 mg 、VC704 mg、膽堿317 mg、蘆丁121.34 mg，其中尤以維生素C 含量為多，比一般水果高幾倍到幾十倍。

二、化學(xué)成分

1.黃酮類化合物。

柿葉的主要有效成分是黃酮類化合物。1985 年Gorobets A V 發(fā)現(xiàn)了柿葉中黃酮類化合物萘酚3-O-β-D-葡萄糖苷、山萘酚、槲皮素、山萘酚3-O-α-L-鼠李糖苷 、山萘酚 3-β-D- 木糖苷 、山萘酚3-O-α-L-阿拉伯糖苷、槲皮素3-O-[ 2”-O-（3、4、5-三羥基苯甲基酰）]-葡萄糖苷。1989 年 N akatani M ，M iy azaki Y，Iw ashita T 等人發(fā)現(xiàn)柿葉中黃酮類化合物有黃芪苷、異槲皮素。1999 年，郭玟、董曉萍發(fā)表的文章中提到了黃酮類化合物還有盧丁、金絲桃苷（槲皮素-3-半乳糖苷）。

柿葉中黃酮類化合物主要是以苷類形式存在。晏亦林等人研究認(rèn)為，柿葉總黃酮的最佳提取工藝為用柿葉重8 倍、8倍和6 倍的體積分?jǐn)?shù)（下同）70%乙醇水溶液提取 3 次，提取時(shí)間分別為 2、1、1 h。而石錦芹等人用正交設(shè)計(jì)方法研究出乙醇提取柿葉總黃酮的最佳條件為，用15倍柿葉重的50%乙醇水溶液，在75℃下浸提3 h。施躍峰等人用pH 值為13 的水做溶劑，然后用YF-Ⅰ樹(shù)脂吸附、乙醇洗脫的方法提取分離柿葉黃酮，提取效果與有機(jī)溶劑提取相似，而且工藝安全、簡(jiǎn)單、成本低、不需溶劑回收等操作。嚴(yán)鑄云等人的研究認(rèn)為，柿樹(shù)不同生育期的柿葉總黃酮含量不同，果后期的含量（0.459%）比花期的含量（0.395%）高。

2.三萜類化合物。

柿葉中含有多種三萜類化合物。從柿葉中分離鑒定的三萜類化合物有烏蘇醇、烏蘇酸、齊墩果酸、白樺脂酸、19α-羥基烏蘇酸、19α，24-二羥基烏蘇酸、熊果苷等。存在于柿屬植物中的三萜類化合物基本都是五環(huán)三萜，其中較常見(jiàn)的結(jié)構(gòu)類型有齊墩果烷型（oleanane）、烏蘇烷型（Usrane）、羽扇豆烷型（LuPane）。此外，還有蒲公英烷（lhraxerane）、木栓烷（rFiedelane）等其他結(jié)構(gòu)類型的三萜類化合物。三萜化合物大都表現(xiàn)出多樣化的生理活性，如調(diào)節(jié)機(jī)體代謝、增強(qiáng)免疫功能、抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)和明顯的抗炎癥作用，對(duì)腦外傷以及心血管病有較好的治療作用。因此三萜類化合物被普遍認(rèn)為是許多重要的有效成分，成為目前比較活躍的一個(gè)研究領(lǐng)域。

3.酚類化合物。

酚類化合物是一類以苯酚為基本骨架，芳香烴環(huán)上的多羥基取代生成的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的芳香族化合物。根據(jù)其含有的羥基的數(shù)目可分為一元酚和多元酚。醌類化合物（quinones，quinonids）是一類重要的次生代謝產(chǎn)物，廣泛存在于自然界，特別是在海洋生物、細(xì)菌、真菌、地衣、高等植物中更為普遍。

4.萘醌和萘酚。

迄今為止已由柿屬植物中分離得到60 多個(gè)萘醌類化合物，可分為單聚體和多聚體。其中單聚體和二聚體數(shù)量最多，三聚體和四聚體各有一個(gè)化合物。這些化合物中 ， 基 本 都 有 Plumbagin 或 7 一Methyljuglone 結(jié)構(gòu)單位。Naaryan 等人從柿葉中分離出 diospyrin （40）和diosprol（41）2 種以萘為骨架的芳香化合物；Paphassarang 等人從干燥柿葉中分離出1 種無(wú)定形淡棕色粉末，通過(guò)譜學(xué)方法分 析 確 認(rèn) 為 diospyrols-8，8'-di-O-（6-β-O-apiofuranosyl-β-D-glucopyranoside）（42）；Uc-Cachon 等人從柿葉中分到1 個(gè)新的萘醌二聚體衍生物（43）和7個(gè)萘醌類化合物 plumbgin（44）、maritinone （45）、3，3'-biplumbagin（46）、chitranone （47）、cis-isoshinanolone（48）、eliptinone（49）、droserone（50）。

5.脂肪酸。

安秋榮等人用GC-MS 法從柿葉中分離出21 種脂肪酸，其中鑒定出19 種，占總含量的98.72%。在鑒定出的脂肪酸中，飽和脂肪酸11 種，占柿葉脂肪酸總含量的70.78 %，其中以棕櫚酸（30.00 %）、蠟酸（19.01 %）、硬脂酸（10.42 %）、肉豆蔻酸（6.68 %）、花生酸（1.72 %）為主；不飽和脂肪酸8 種，占柿葉脂肪酸總含量的27.93%，其中以十八碳-烯酸（22.22 %）、亞 油酸（1.84 %）、十六碳三烯酸（1.44%）、亞麻酸（1.25 %）為主。 柿葉中的不飽和脂肪酸（尤其是亞麻酸和亞油酸）具有較高的藥用價(jià)值，對(duì)心血管疾病有防治作用。

6.有機(jī)酸和無(wú)機(jī)離子。

柿葉中的有機(jī)酸包括琥珀酸、苯甲酸、水楊酸、糠酸、丁香酸、對(duì)羥基苯甲酸、原兒茶酚酸、吲哚醋酸和蘋(píng)果酸。張吉祥等人用離子色譜法測(cè)定柿葉中的有機(jī)酸和無(wú)機(jī)陰離子，發(fā)現(xiàn)琥珀酸和蘋(píng)果酸是柿葉中的主要有機(jī)酸，陰離子有H2PO4-、C1-、NO3-、SO42-。

7.單寧。

柿葉中含有豐富的單寧，具有較高的研究?jī)r(jià)值。單寧（Tannin）在藥典上又稱鞣質(zhì)，廣泛存在于植物的芽、葉、根苗、樹(shù)皮和果實(shí)中，具有很強(qiáng)的生物和藥理活性，在醫(yī)藥、食品、日化等方面具有廣泛的應(yīng)用。王燕采用超聲波提取法對(duì)柿葉中單寧提取量的影響因素進(jìn)行考察優(yōu)化，結(jié)合單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定最佳的提取工藝，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用柿葉資源提供依據(jù)。其通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定了柿葉單寧超聲波輔助提取的最佳條件為，乙醇濃度45%，超聲波功率80W，溫度65℃，時(shí)間20min。按照最佳工藝條件進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，柿葉中單寧平均提取率為5.68%。豆佳媛等人利用微波輔助分別以丙酮和含酸無(wú)水甲醇為溶劑對(duì)柿葉中的單寧進(jìn)行提取，采用正交試驗(yàn)對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。考察了微波功率、反應(yīng)溫度、溶劑濃度、提取時(shí)間等因素對(duì)單寧提取量的影響。結(jié)果表明，以丙酮為提取溶劑時(shí)，最佳提取工藝條件為微波功率600 W、反應(yīng)溫度為70 ℃、溶劑濃度30%、提取時(shí)間9 min，由此工藝得單寧的提取量為4.359%；以含酸無(wú)水甲醇為提取溶劑時(shí)，最佳提取工藝條件為微波功率500 W、反應(yīng)溫度為60 ℃、溶劑濃度1.4%、提取時(shí)間11 min，由此工藝得單寧的提取量為2.957%。以有機(jī)溶劑丙酮為提取劑，采用微波輔助提取，單寧提取效果更佳。

8.其他成分。

除以上化合物之外，柿葉中含有大量的維生素C、E 和有機(jī)酸類如琥珀酸、苯甲酸、水楊酸、糠酸、丁香酸、香草酸、多種氨基酸和微量元素等，還含有多糖、揮發(fā)油、氨基酸及礦物質(zhì)等等。安秋榮等人用程序升溫毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)柿葉的揮發(fā)成分進(jìn)行了分離鑒定，共分離出80 個(gè)組分，用峰面積歸一化方法計(jì)算出相對(duì)含量，用譜圖檢索確認(rèn)出75 個(gè)化合物。

三、總結(jié)

柿葉中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和功效成分，具有抗菌消炎、生津止渴、清熱解毒、潤(rùn)肺強(qiáng)心、鎮(zhèn)咳止血、抗癌防癌等多種保健功能，而且柿葉產(chǎn)品食用安全無(wú)毒。目前有關(guān)柿葉有效成分與藥理作用之間關(guān)系的研究較少，而它對(duì)柿葉制劑的研究又非常重要。所以，今后應(yīng)加強(qiáng)研究柿葉有效成分與藥理作用之間關(guān)系、柿葉復(fù)方藥劑的開(kāi)發(fā)和臨床應(yīng)用及柿葉系列產(chǎn)品的研究開(kāi)發(fā)，以便更充分地開(kāi)發(fā)和利用柿葉，從柿葉中提取具有較大的經(jīng)濟(jì)和實(shí)用價(jià)值的物質(zhì)。