不同證候糖尿病腎病血清腎胺酶表達及其相關性研究※

李 偉 瞿 偉 李曉倩

(江蘇省南通市中醫院腎內分泌科，江蘇 南通 226000)

糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病的主要并發癥，起病隱匿，進展迅速，患病率逐年升高，已成為嚴重的公共衛生問題。現代醫學強調中西醫并舉，中醫中藥在診治疾病上具有一定的優勢和特色。辨證論治是中醫學的特色與精髓，也是指導臨床診治疾病的基本法則。辨證是論治的前提，證候是其關鍵。DN屬于中醫學“下消”“水腫”“尿濁”“關格”等范疇，多為消渴病日久不愈所致，而陰津虧損、燥熱偏盛是消渴的基本病機。中醫學認為，DN多為稟賦不足，情志失調，飲食失節，勞欲過度，精氣俱虧，導致陰虛內熱，腎虛水泛所致[1-2]。腎胺酶(renalase，RNLS)主要由腎臟合成和分泌，具有降解血循環中兒茶酚胺的作用，可能是急性腎損傷的生物標志物，重組血RNLS可能對預防和治療急性腎損傷有潛在的作用[3-4]。但目前RNLS與DN中醫證候的關系研究甚少。因此，本研究從中醫證型的角度出發，研究不同中醫證候DN與RNLS的關聯性，以期為DN的臨床診療提供一定依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018-06—2020-01江蘇省南通市中醫院腎內分泌科門診DN患者120例，根據Mogensen分期標準[5]：Ⅲ期48例，Ⅳ期54例，Ⅴ期18例，按照中醫辨證分型，分為陰虛燥熱型組、氣陰兩虛型組、脾腎氣虛型組、陰陽兩虛型組。同時選取本院同期健康體檢者106例作為健康對照組。各組性別、年齡、體質量指數(BMI)比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 各組一般資料比較

1.2 納入及排除標準 DN患者納入標準：①符合DN診斷標準[6]，Mogensen分期為Ⅲ～Ⅴ期[5]；②符合中醫辨證分型標準[7-8]；③年齡≥18歲；④病歷資料完整；⑤患者及其家屬對本研究知情同意，并簽署知情同意書；⑥本研究經本院醫學倫理委員會批準通過。DN患者排除標準：①1型糖尿病患者；②有尿毒癥、惡性腫瘤等其他嚴重疾病者；③合并原發性腎小球、腎小管功能異常者；④妊娠期、哺乳期患者；⑤精神病患者。對照組納入標準：體檢健康，無糖尿病、原發性高血壓及各種原發性和繼發性腎病等。

1.3 研究方法 所有研究對象入組時抽取晨起空腹肘靜脈血5 mL，3 000 r/min離心30 min，分離血清，冷凍保存待測。采用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測血清RNLS水平，操作步驟嚴格按照RNLS ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司，產品貨號：JL15133-96T)說明書進行。采用全自動生化分析儀檢測血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平，并用CKD-EPI公式[9]估算腎小球濾過率(eGFR)。

2 結 果

2.1 各組血清RNLS水平比較 見表2。

表2 各組血清RNLS水平比較

由表2可見，陰虛燥熱組、氣陰兩虛組、脾腎氣虛組及陰陽兩虛組血清RNLS水平均顯著高于健康對照組(P<0.05)；脾腎氣虛組、陰陽兩虛組均顯著高于陰虛燥熱組、氣陰兩虛組(P<0.05)。脾腎氣虛組與陰陽兩虛組、陰虛燥熱組與氣陰兩虛組比較差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2 各組BUN、Cr及eGFR水平比較 見表3。

由表3可見，健康對照組、陰虛燥熱組、氣陰兩虛組、脾腎氣虛組及陰陽兩虛組血清BUN、Cr水平依次升高(P<0.05)，eGFR水平依次降低(P<0.05)。

表3 各組BUN、Cr及eGFR水平比較

2.3 不同中醫證候DN患者血清RNLS水平與BUN、Cr及eGFR的相關性 見表4。

表4 不同中醫證候DN患者血清RNLS水平與BUN、Cr及eGFR的相關性

由表4可見，Pearson相關性分析結果顯示，陰虛燥熱組、氣陰兩虛組、脾腎氣虛及陰陽兩虛組血清RNLS水平與BUN、Cr均呈正相關(P<0.05)，與eGFR均呈負相關(P<0.05)。

3 討 論

DN是臨床常見的糖尿病慢性微血管并發癥之一，主要表現為腎功能下降，死亡率較高，嚴重威脅著人類健康。近年來，中醫治療DN愈來愈受到關注，辨證論治及證候研究是中醫基礎理論及臨床研究的重要課題[10-12]。DN屬中醫學“消渴”變證范疇。中醫學認為，消渴發病機制為陰津虧損，燥熱偏勝，其病因責之于素體陰虛、飲食失宜、情志失調及房勞過度等。消渴病腎病屬消渴日久，陰損及陽，導致陰陽兩虛或病久入絡，血脈瘀滯，為本虛標實之證，其中醫證候主要表現為陰虛燥熱、氣陰兩虛、脾腎氣虛、陰陽兩虛[13-14]。研究發現，從陰虛燥熱到陰陽兩虛，最終進展至氣血陰陽俱虛的過程是DN的中醫證候演變規律，血瘀證貫穿疾病始終[15-16]。因此，了解DN的發病機制，選擇敏感的檢測指標，并結合中醫證候對DN患者進行辨證論治具有重要的臨床意義。

RNLS是一種主要由腎臟分泌的黃素蛋白，可降解兒茶酚胺，減少炎癥細胞浸潤，減輕腎臟損傷，在調節血壓、心血管功能及腎臟保護中有重要作用[17-18]。解冰等[18]研究指出，血清RNLS、BUN水平檢測有助于腎臟疾病及分期的判斷，其水平上升是腎功能下降的危險因素。糖尿病的發病涉及多基因和環境等因素。研究發現，RNLS遺傳表型多態性與糖尿病相關[19]。但目前關于RNLS在DN不同中醫證候中的表達水平還缺乏研究。本研究結果顯示，血清RNLS水平在不同中醫證候DN患者中的表達水平差異明顯，陰虛燥熱組、氣陰兩虛組、脾腎氣虛組及陰陽兩虛組血清RNLS水平均顯著高于健康對照組(P<0.05)，脾腎氣虛組、陰陽兩虛組均顯著高于陰虛燥熱組、氣陰兩虛組(P<0.05)，提示脾腎氣虛、陰陽兩虛證DN患者RNLS水平較高，即腎損傷可能嚴重，隨著中醫病機由陰虛燥熱向陰陽兩虛的逐漸轉化，病情進一步進展。

研究表明，不同中醫證候DN患者腎功能及腎小管的損害程度有輕重差異，實驗室指標水平可隨中醫證候的病機轉化規律而動態變化。現代醫學研究通過現代實驗室指標與中醫證候相結合，實現了辨證指標的量化，提高了中醫證候分型的準確性與科學性。BUN、Cr是評估腎功能的主要指標，其水平上升與多種急慢性腎功能障礙直接相關[13，18]。eGFR是評價腎功能的重要指標，其水平下降提示腎功能減退。本研究結果顯示，健康對照組、陰虛燥熱組、氣陰兩虛組、脾腎氣虛組、陰陽兩虛組血清BUN、Cr水平依次升高，eGFR水平依次降低，表明DN患者中醫證候的演變，實驗室指標BUN、Cr及eGFR水平也呈現相應的變化，可作為中醫辨證的客觀依據，可能有助于降低中醫辨證的主觀性，促進辨證標準化與客觀化。而RNLS、BUN、Cr水平上升及eGFR下降均與腎功能惡化有關，其中存在的關聯尚需進一步研究驗證。本研究進一步通過Pearson相關性分析結果顯示，陰虛燥熱、氣陰兩虛組、脾腎氣虛組及陰陽兩虛患者血清RNLS水平與BUN、Cr均呈正相關(P<0.05)，與eGFR呈負相關(P<0.05)。表明不同證候DN患者各指標之間存在密切關聯，并且隨著DN疾病進展，機體失代償加劇，可能進一步激發體內多種變化。

綜上，血清RNLS水平在DN患者不同中醫證候中存在差異性表達，且陰虛燥熱、氣陰兩虛組、脾腎氣虛組及陰陽兩虛患者血清RNLS水平與BUN、Cr均呈正相關(P<0.05)，與eGFR呈負相關(P<0.05)。由于本研究樣本量偏少，且受地域限制，研究結論難免存在偏差。因此，后期尚需擴大樣本量，進行多地區、大樣本、多中心的臨床觀察，并深入探討不同證候DN血清RNLS表達及其與其他實驗室指標的相關性。