尿NGAL在微小病變型腎病并急性腎小管壞死中的診斷價值分析*

曾慶義 周才芳 曾秀琴

廣東省惠州市第三人民醫院腎內科 516002

腎病綜合征是臨床最常見的腎小球疾病，微小病變型腎病是腎病綜合征的常見病理表現，而急性腎損傷又是微小病變型腎病較為多發的危重并發癥之一，會對患者的健康狀況造成嚴重的影響[1]。急性腎損傷(衰竭)最常見誘發因素為腎小管壞死，其在病程的發展中起到了重要的作用，在任何階段都有可能發生，一旦未能夠及時診治，隨著病情的不斷進展，病情會加重為慢性腎衰竭，威脅患者的生命安全[2]。因此，必須要加強對微小病變型腎病并急性腎小管壞死的診斷，特別是在當前腎病綜合征發病率不斷上升的背景下，腎病綜合征的防治形勢日益嚴峻，早期診斷顯得至關重要。目前，腎活檢在微小病變型腎病并急性腎小管壞死的診斷中發揮著關鍵性作用，被視為診斷急性腎小管壞死的金標準，但是該診斷方式因為具有一定的創傷，存在一定的風險性[3]。因此，尋找到一種敏感性更高、特異性更強的生物學標志物，對早期急性腎小管壞死的診斷意義重大。既往有研究發現在進行早期急性腎小管壞死診斷時，尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)可以作為生物學標志物[4]。但對于此觀點的相關文獻報道較少，仍需進一步深入探究。因此，本研究進一步探討尿NGAL對微小病變型腎病并急性腎小管壞死早期診斷的價值分析，為臨床早期診斷急性腎損傷提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月—2018年12月在我院接受治療的微小病變型腎病合并急性腎小管壞死患者50例進行研究，均符合納入標準和排除標準。納入標準：(1)符合腎病綜合征的診斷標準[5](24h尿蛋白>3.5g，24h血漿白蛋白<30g/L)；(2)經腎活檢確診為微小病變型腎病；(3)未使用過糖皮質激素、免疫抑制劑、抗凝劑、血管緊張素轉換酶抑制劑等藥物治療；(4)基本資料完整齊全。排除標準：(1)合并繼發性腎病綜合征；(2)合并慢性腎臟病患者；(3)妊娠期或哺乳期患者。根據3個月后隨訪復診情況，分為腎衰竭組和非腎衰竭組。非腎衰竭組27例，男16例，女11例；年齡15～68歲，平均年齡(32.67±2.35)歲；體重指數17～26，平均體重指數20.34±2.08；腎病綜合征病程6～1年，平均病程(2.03±0.27)年；合并糖尿病10例、高血壓8例、冠心病5例；吸煙史14例，無吸煙史13例。腎衰竭組23例，男14例，女9例；年齡16～70歲，平均年齡(32.64±2.28)歲；體重指數17～25，平均體重指數20.26±2.10；腎病綜合征病程5～1年，平均病程(2.05±0.24)年；合并糖尿病9例、高血壓7例、冠心病3例；吸煙史11例，無吸煙史12例。另選取同期相應年齡段的25例經肝腎功能、尿檢檢查結果顯示正常的健康體檢者納入研究中，視為對照組。其中，男14例，女11例；年齡26～75歲，平均年齡(44.98±2.54)歲。排除合并嚴重心腦血管疾病、中樞神經系統疾病、感染性疾病、腫瘤患者。三組在性別、年齡、體重等資料方面，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 尿NGAL檢測：(1)標本采集：于檢測當天清晨，采集患者10ml中段尿液，離心處理10min，靜置15min后取上層尿液，及時送檢。(2)檢測方法：行雙抗夾心ABC-ELISA法對檢測。(3)于腎活檢當天，收集患者尿中的NGAL與生物素化的抗人NGAL單抗結合，并且生物素化的抗人NGAL單抗上的生物素與酶標板上的5 trepidation結合，加人辣根過氧化物酶標記的抗人工NGAL，加入TMB，進行NGAL濃度的測定。

1.2.2 腎小管壞死診斷及NGAL表達水平測定：腎小管病理診斷：腎小球微小病變，急性腎小管壞死，小管腔閉塞或部分擴大，腎小管萎縮，上皮細胞顆粒變性、腫脹、脫落。腎組織NGAL診斷：在細胞漿或胞膜處有棕黃色或黃色物質為陽性表達細胞。200倍視野下每個病理至少5個視野，分別測定各視野的陽性平均光密度、陽性目標總面積、陰性目標總面積，計算NGAL在腎組織的表達指數(EI)[6]。

1.2.3 腎功能測定及預后判斷：腎功能測定：于入院后12h、24h、48h、72h、96h檢測各項腎功能指標，包括血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿肌酐、血尿電解質、24h尿蛋白定量。預后判斷：血肌酐增加大于基線的2倍，或GER下降1/2以上，或尿量在0.5ml/(kg·h)以下，上述各項中滿足1項，且時間持續>12h，即可診斷為急性腎損傷。

1.3 觀察指標 (1)比較各組尿NGAL水平、EI值；(2)分析尿NGAL水平與各項腎功能指標(BUN、Scr、尿肌酐、血尿電解質、24h尿蛋白)的相關性；(2)采用ROC曲線分析腎功能各項指標、EI值、尿NGAL對腎小管壞死的診斷價值。

1.4 統計學方法 數據分析使用SPSS21.0統計軟件包，P<0.05為差異有統計學意義。相關性分析采用Spearman。ROC曲線分析NGAL對腎小管壞死的診斷價值。

2 結果

2.1 各組NGAL水平、EI值的比較 對照組、非腎衰竭組、腎衰竭組各組相互之間NGAL水平和EI值比較，腎衰竭組高于對照組和非腎衰竭組，非腎衰竭組大于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。如表1所示。

表1 各組NGAL水平、EI值的比較

2.2 尿NGAL水平與各項腎功能指標相關性 尿NGAL同BUN、Scr、尿肌酐、24h尿蛋白均呈正相關。如表2所示。

表2 尿NGAL水平與各項腎功能指標相關性

2.3 ROC曲線分析腎功能各項指標、EI值、尿NGAL對腎小管壞死的診斷價值 尿NGAL曲線下面積最大(AUC=0.868)，特異度94.72%，敏感度72.68%。EI值位居第二(AUC=0.795)，與尿NGAL曲線下面積差異相比較，差異無統計學意義(P>0.05)，但與BUN(AUC=0.412)、Cr(AUC=0.424)、尿肌酐(AUC=0.403)、血尿電解質(AUC=0.397)、24h尿蛋白(AUC=0.405)等腎功能各指標相比，曲線下面積明顯更大，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)，又被稱為載脂蛋白-2，屬于一種脂質運載蛋白，作為脂質運載蛋白超家族的重要組成部分，是脂質運載蛋白超家族的有力補充。臨床研究實踐證實，NGAL的功能強大，集中表現在以下幾個方面：(1)可結合并運輸疏水性小分子；(2)有類似轉鐵蛋白的鐵轉運功能；(3)能促進腎小管上皮細胞再生[7]。有關研究發現，早期診斷急性腎功能損傷中，血清及尿中的NGAL濃度可以作為重要的參考指標，對診治和預后意義重大[8-10]。此外，部分研究認為早期腎小管間質損害的診斷和預后判斷中，NGAL也發揮著十分重要的作用。吳杰等[11]研究表明，IgA腎病患者NGAL水平可以反映患者的病情程度，在聯合尿NGAL與尿NAG酶判斷有無腎小管間質損害時，效果要明顯優于血肌酐、尿滲透壓等指標。張科等[12]認為尿NGAL可作為反映慢性腎臟病患者腎小管間質損傷的標志物，對慢性腎臟病的診斷、治療及預后具有較高的價值。本研究結果顯示，在尿NGAL的比較中，腎衰竭組明顯高于非腎衰竭組和對照組，這與相關文獻報道一致[13]，說明尿NGAL水平的上升，對急性腎小管壞死的預測具有十分重要的作用。另外BUN、Scr、尿肌酐、24h尿蛋白與尿NGAL水平呈正相關，而BUN、Scr、尿肌酐、24h尿蛋白均為反應腎功能的主要指標，水平越高表示腎功能越差，間接提示尿NGAL保持在較高水平，會對患者的腎功能造成損傷。ROC曲線分析腎功能各項指標、EI值、尿NGAL對腎小管壞死的診斷價值結果顯示，尿NGAL曲線下面積最大，說明其診斷急性腎小管壞死的準確性、敏感性和特異性更高。

綜上所述，微小病變型腎病并急性腎小管壞死的早期診斷中，尿NGAL可作為重要的生物學標志物，早期通過對尿NGAL的檢測能為急性腎小管壞死的診斷、治療及預后提供更多有價值的參考信息。