畜產品中喹諾酮類藥物檢測技術

楊丹

喹諾酮類藥物，特別是氟喹諾酮類抗生素的發展史可追溯到半個世紀之前。氟喹諾酮類藥物又可稱為吡啶酮酸類、吡酮酸類、沙星類藥物，屬于含氟第三代氟喹諾酮類化學合成抗生素，是廣泛應用的人工合成抗菌藥。喹諾酮類藥物主要通過阻斷DNA回旋酶，造成細菌DNA不可逆損害來達到抗菌效果，它們具有抗菌、抗支原體、抗球蟲等作用。因喹諾酮類藥物對多種革蘭氏陰性菌具有良好的殺菌作用，是養殖中常用到的三大類藥物之一，主要用于預防和治療畜禽及魚類的感染性病狀。因為喹諾酮類藥物價格低廉、抗菌譜廣，被廣泛應用于臨床和獸藥領域。

濫用引發的環境危害和人類疾病風險成為目前的焦點，甚至在經濟利益的誘惑下，在養殖、加工貯存等過程中添加過量的抗菌藥物，造成抗生素類藥物殘留量超標。喹諾酮類藥物殘留通過食物進入人體，造成人類中毒、過敏，甚至致癌、致畸、致突變等嚴重后果，給消費者的健康帶來潛在的危害。有些國家將喹諾酮類藥物列為禁藥，或嚴格要求用量。目前，歐盟制定的喹諾酮類藥物在動物源性食品中的殘留標準是不超過100納克/毫升。

目前，常用于畜產品中氟喹諾酮類抗生素殘留的前處理方法有固相萃取法、基質固相分散萃取法、超臨界流體萃取法、固相微萃取、分子印跡聚合物法、分散液液微萃取等方法。檢測畜產品中殘留的喹諾酮的方法有高效液相色譜法、液相色譜—串聯質譜法、液相色譜—四極桿—飛行時間質譜法、熒光免疫測定法、免疫學方法等。膠體金免疫層析技術分為競爭法、間接法和雙抗夾心法。膠體金法檢測原理是以條狀纖維層析材料為固相，樣品溶液在毛細作用下在層析條上泳動，使樣品中的層析材料上針對待測物質的受體與待測物產生特異性強、親和性高的結合。在層析過程中免疫復合物容易被截留或富集在層析材料的一定范圍內，可以通過酶促的顯色反應或直接使用可目測的著色標記物來標記，在短時間內就可以觀察到直觀的實驗結果。禽蛋中的藥物殘留主要使用膠體金免疫層析技術的競爭法。試紙條對含有恩諾沙星、沙拉沙星、雙氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、環丙沙星、培氟沙星、依諾沙星和惡喹酸等藥物的豬尿樣品的檢出限值為20微克/升，檢測的特異性高，在37℃時可保存160天左右;在4℃時，可保存24個月。膠體金免疫層析技術在基層養殖場易操作、易廣泛應用，對工作人員的專業要求技術水平不高，應用到基層養殖場比較切合實際且便捷。

質譜分析是先將樣品離子化，按離子的質荷比再進行分離，測量每個離子譜峰的強度，實現分析目的的分析方法。色譜與質譜的聯用將色譜的分離能力與質譜的定性功能相配合起來，實現對復雜混合物進行更精準的定量和定性分析，簡化了樣品的前處理過程，使分析樣品的過程更簡單、快捷。高效液相色譜法擁有靈敏、快速、高分辨率、重復性穩定的優點，已經普遍應用到物質的定量和定向分析檢測。在分析氟喹諾酮類抗生素殘留中，高效液相色譜需要根據不同動物源性樣品選用相應的檢測器進行操作，通過回收率、定量限和檢出限等系列參數計算出喹諾酮類藥物的殘留量。