非洲豬瘟的檢測技術

車寧寧

非洲豬瘟（ASF）是野豬和家豬的一種高度致死性傳染病，死亡率可達100%，主要由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起。據臨床研究發現，該病可細分為四大類型。急性型潛伏期略短，大約5天以內，在臨床上主要表現為高熱、表皮發黑，在1周左右發生死亡。豬在感染病毒后以發熱、出血性病變為主要特征。有的毒株可引起高發病率和高死亡率。目前尚無有效預防該病的疫苗。現發現ASF的臨床癥狀與經典豬瘟十分相似，對于防控和根除該病，簡便、靈敏的診斷技術至關重要。沈陽市首次出現此類病例，隨后在多個省份暴發，造成巨大經濟損失。ASF的慢性病例與艾滋病的某些癥狀相似，也曾有研究者將ASF稱為豬的獲得性免疫缺乏綜合征。ASF屬于一種復雜的出血性傳染病，并且目前并沒有研制出預防該病的疫苗。適用于ASF或與其相似臨床癥狀的疾病的診斷與鑒別的方式相對較少，并且對于活病毒的診斷技術手段較為欠缺。隨著ASF的肆意蔓延，愈加需要更完善的技術來診斷鑒別病毒，而對于實驗室而言，則需要把檢測方法進一步的完善，減少漏洞的出現。

該病目前還沒有發現治愈和防控的疫苗，所以我國研究并建立高效，完善的ASFV檢測實驗室，通過該實驗室的快速成立為ASF的防控和治療做好了很重要的鋪墊。就目前來看，ASF病原學診斷技術包括核酸檢測、抗原檢測和活病毒檢測等一系列。目前，ASFV的檢測技術主要有針對病毒DNA的核酸檢測技術和病毒抗原、抗體反應的免疫學技術兩大類，通過研究世界衛生組織推薦ASFV的檢測方法主要有 實時熒光定量PCR檢測、PCR檢測和ELISA檢測等。通過免疫學的知識進行抗體檢測，通過檢測我們可以了解到ASFV的感染過程以及發生階段，這樣會使我們更好的進行治療，但是這種方式的檢測，抗體只有感染病毒到一定程度才會出現，這樣會對治療造成一定延誤，所以ELISA等其他抗體檢測的方法存在一定的限制性。PCR、實時熒光定量 PCR、LAMP等分子生物學技術在豬感染ASFV的早期即可檢測到病毒核酸，這種方法的研究和普及對早期的檢測起到至關重要的作用。總體來說，ASFV的實驗室檢測方法有很多種，各自有不同的優缺點。

核酸檢測，PCR檢測技術是目前應用最為廣泛的檢測技術，其具有特異性強、靈敏度高的特性。PCR檢測操作方法簡單、快捷。但擴增后需要使用溴化乙錠來進行電泳檢測，且該方法的敏感性較低。是目前最簡單的分子生物學檢測技術。同時PCR技術也適用于對保存不當的組織及血液樣品進行檢測。實時熒光定量PCR方法，將光譜技術引入其中，特異性擴增產物的量是通過熒光信號的強弱變化定量測定，不但解決了敏感性較低的問題，而且減輕了電泳檢測中溴化乙錠對環境的污染。實時熒光定量PCR可同時快速檢測大批量樣品，因其特異性高、敏感性好，是目前應用最廣泛的檢測技術。酶聯免疫吸附試驗 （ELISA），目前常用的免疫學診斷技術是ELISA試驗，該實驗操作過程簡單、操作速度快，可用于豬群中ASFV感染的大規模調查，但無法對ASFV的早期感染做出診斷，具有一定的滯后性。