靈芝番茄膠囊工藝研發及增強免疫力功能試驗研究

宋小飛 麻開香 田密

摘要 [目的]靈芝番茄膠囊的工藝開發及增強免疫力的功能評價。[方法]分別測定不同混合時間對牛磺酸含量的影響，確定最佳混合時間，測定混合物的休止角、堆密度、吸濕率和相對吸濕率，確定最佳的生產工藝。分別以0.27、0.53和0.80 g/kg（分別相當于本品人群推薦劑量的10、20、30倍）的劑量連續給小鼠灌胃30 d，檢驗其對小鼠免疫力的影響。[結果]靈芝番茄膠囊的最佳生產工藝為混合時間30 min，物料混合及生產過程中濕度應小于65%。靈芝番茄膠囊高劑量組能顯著增強小鼠Con A誘導的脾淋巴細胞增殖能力;高劑量組能顯著增強小鼠對DNFB誘發的DTH反應;中劑量組能顯著提高小鼠抗體生成細胞的數量;中劑量組能顯著升高小鼠血清溶血素含量;低、高劑量組能顯著提高小鼠碳廓清吞噬指數;低劑量組能顯著提高小鼠吞噬百分率和小鼠吞噬指數。[結論]靈芝番茄膠囊具有增強免疫力的功能。

關鍵詞 靈芝番茄膠囊;工藝研發;增強免疫力

中圖分類號 R285.5 文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2020）03-0178-04

Abstract [Objective]The technology of Lingzhifanqie capsule was developed and its immunity enhancement function to be assessed.[Method]The effects of different mixing time on the determination of taurine were determined.The best production process was determined by the angle of repose，bulk density，moisture absorption rate and relative moisture absorption rate of the mixture.The mice were given 0.27，0.53 and 0.80 g/kg （10，20，30 times the recommended dose of the population respectively） for 30 days to test their effects on the immunity of mice.[Result]The optimum production technology of Lingzhifanqie capsule was 30 minutes of mixing time，and the humidity during mixing and production should be less than 65%.The high dose group of Lingzhifanqie capsule can significantly enhance the proliferation of spleen lymphocyte induced by Con A in mice; the high dose group can significantly enhance the DTH response induced by DNFB in mice; the middle dose group can significantly increase the number of antibodyproducing cells in mice; the middle dose group can significantly increase the content of serum hemolysin in mice; the low and high dose groups can significantly increase the number of antibodyproducing cells in mice.The carbon clearance phagocytosis index of mice was increased，and the phagocytosis percentage of mice and the phagocytosis index of mice were increased significantly in the low dose group.[Conclusion]Lingzhifanqie capsule has the function of enhancing immunity.

Key words Lingzhifanqie capsule;Technological research and development;Enhancing immunity

靈芝番茄膠囊是以靈芝提取物、番茄提取物、牛磺酸、維生素E為主要原料制成的保健食品，主要用于增強免疫力。靈芝性溫，味淡。《本草綱目》記載靈芝具有“治胸中結，溢心氣”“入心生血，助心充脈”等功效，對全身五臟之氣均有補益作用。現代藥理學研究表明，靈芝含多糖、三萜類、氨基酸等多種成分，具有增強免疫力的保健功效[1-2]。番茄提取物是從天然植物番茄中經提取精制而成，其活性成分主要為番茄紅素，現代藥理學研究表明，番茄紅素具有很好的抗氧化[3]和增強免疫力功能[4]。牛磺酸為人體的條件必需氨基酸。研究發現，牛磺酸是調節機體正常生理活動的活性物質，具有消炎[5]、鎮痛[6]、提高機體免疫能力[7]等功能。維生素E具有促進動物生殖，維持中樞神經系統、心血管系統和骨骼肌的正常功能的作用。近年來研究表明，維生素E能通過增強體液免疫[8]，提高細胞介導的免疫應答，影響吞噬細胞功能[9]等作用而提高機體免疫狀態。筆者對靈芝番茄膠囊的制備工藝進行研究，評價靈芝番茄膠囊增強免疫力的功能。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象。靈芝提取物，西安三江生物工程有限公司;牛磺酸，潛江藥業股份有限公司;維生素E，浙江新和成股份有限公司;番茄提取物，陜西中鑫生物技術有限公司;糊精，安徽山河藥用輔料股份有限公司;硬脂酸鎂，安徽山河藥用輔料股份有限公司。

1.1.2 動物。

SPF級昆明種雌性小鼠（18～22 g，200只），由湖北省實驗動物研究中心提供，生產許可證號：SCXK（鄂）2008-0005，使用許可證號：SYXK（鄂）2012-0065號。

1.2 方法

1.2.1 工藝研究方法。靈芝番茄膠囊制備過程主要包括物料的混合、填充、拋光等基本工藝。對物料的混合時間、粉體的流動性、吸濕率進行相關參數的考察確定其最佳的生產工藝。

在25 ℃、相對濕度75%的條件下放置物料，定時稱量，直至吸濕平衡為止。按下式計算吸濕百分率：吸濕百分率=（吸濕后重量-吸濕前重量）/吸濕前重量×100%。

1.2.2 動物試驗方法。按靈芝番茄膠囊人群推薦日攝入量0.027 g/kg擴大10、20、30倍設置低、中、高3個計量組，即0.27、0.53、0.80 g/kg，共分5個試驗組，每個試驗組包括陰性對照組、低、中、高劑量組，各劑量組試驗動物為10只。免疫試驗一組進行遲發性變態反應試驗;免疫試驗二組進行Con A誘導的小鼠淋巴細胞轉化試驗和NK細胞活性測定;免疫試驗三組進行小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗;免疫試驗四組進行血清溶血素的測定和抗體生成細胞檢測;免疫試驗五組進行淋巴器官/體重比值和碳廓清試驗。小鼠連續灌胃30 d后開始試驗。各試驗組小鼠均按0.02 mL/g容量經口灌胃試驗。

2 結果與分析

2.1 工藝研究

2.1.1 混合時間對混合均勻性的影響。

由于配方中各原料配方量相差不大，靈芝提取物、牛磺酸、維生素E粉、番茄提取物、糊精可直接混合即可，在混合過程中分別在第20分鐘、第25分鐘、第30分鐘、第35分鐘時間點分別隨機不同位置取樣（3份），檢測樣品中牛磺酸含量，計算3份樣品中牛磺酸含量的相對標準偏差。

從表1可以看出，混合粉混合30 min后，牛磺酸成分含量的RSD<3%，35 min后指標成分含量RSD雖小于30 min后的指標含量，但考慮到實際生產過程中的能耗，因此確定混合粉混合時間30 min較為合理。

2.1.2 粉體的流動性研究。

混合粉是否可以直接灌裝膠囊取決于混合粉的流動性，因此，對混合粉的流動性進行考察，測定其堆密度，根據靈芝番茄膠囊的人群推薦服用量確定膠囊殼的規格。

測定3次靈芝番茄膠囊混合粉的休止角為38.7°、381°、38.2°，平均休止角較小（低于40°），說明其流動性較好，可適合直接填充膠囊。根據測定的堆密度結果（表2）可知，混合粉平均堆密度約為0.656 g/mL，根據靈芝番茄膠囊日服用量確定每粒裝量為0.4 g，膠囊型號確定為0#空心膠囊。

2.1.3 吸濕率測定。物料的吸濕性對實際生產過程中有重要的影響，決定了生產過程的溫濕度控制和制劑過程的時間控制。取適量靈芝番茄膠囊混合粉放置在25 ℃、相對濕度75%的條件下，定時稱量，測定吸濕百分率。從圖1可以看出，在相對濕度為75%的條件下，靈芝番茄膠囊混合粉的吸濕率在24 h內吸濕較快，24 h后吸濕率接近平衡，因此在制劑過程中靈芝番茄膠囊混合粉不易在環境中暴露時間過長，最好控制在8 h以內。

2.2 保健功能評價

2.2.1 靈芝番茄膠囊對小鼠遲發性變態反應的影響。從表3可以看出，與陰性對照組相比，低劑量組與中劑量組的Con A 誘導脾淋巴細胞增殖OD差值和DNFB誘導DTH左右耳重量差無顯著性差異，而高劑量組能顯著增強小鼠DNFB誘發的DTH反應（P<0.05）。

2.2.2 靈芝番茄膠囊對小鼠抗體生成細胞檢測的影響。從表4可以看出，與陰性對照組相比，低劑量組與高劑量組的溶血空斑數無顯著性差異，而中劑量組能顯著增強小鼠的溶血空斑數（P<0.05），即中劑量組能顯著提高小鼠抗體生成細胞的數量。

2.2.3 靈芝番茄膠囊對小鼠血清溶血素滴度水平的影響。從表5可以看出，與陰性對照組相比，低劑量組與高劑量組的血清溶血數無顯著性差異，而中劑量組能顯著增強小鼠的血清溶血數（P<0.05）。

2.2.4 靈芝番茄膠囊對小鼠碳廓清功能的影響。從表6可以看出，與陰性對照組相比，中劑量組的小鼠碳廓清吞噬指數無顯著性差異，而低劑量組和高劑量組能顯著增強小鼠的碳廓清吞噬指數（P<0.05）。

2.2.5 靈芝番茄膠囊對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞功能的影響。從表7可以看出，與陰性對照組相比，中劑量組與高劑量組的小鼠腹腔巨噬細胞吞噬指數無顯著性差異，而低劑量組能顯著增強小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬指數（P<0.05）。

2.2.6 靈芝番茄膠囊對小鼠NK細胞活性的影響。從表8可以看出，與陰性對照組相比，低、中、高劑量組對小鼠的NK細胞活性無顯著性差異（P<0.05）。

3 結論與討論

靈芝番茄膠囊是以靈芝提取物、番茄提取物、牛磺酸、維生素E為主要原料制備而成，其中靈芝提取物具有益氣血、安心神健脾胃[10]、止咳平喘的功能[11]。番茄提取物有抗氧化效果，具有提高人體的應激能力，進而達到提高機體免疫作用;牛磺酸、維生素E屬于營養強化劑，能改善、提高機體的免疫狀態。從中醫理論方面講，上述原料皆具有扶正之功，即具有增強免疫力功能，而現代藥理研究也證明上述原料均具有增強免疫力功能。

靈芝提取物、番茄提取物、牛磺酸、維生素E可以經混合后直接填充膠囊，最佳混合時間為30 min，選用0#膠囊作為膠囊規格，物料混合及生產過程中濕度應小于65%，制劑過程應控制在8 h以內。

從靈芝番茄膠囊的功能性試驗結果可以看出，高劑量組能顯著增強小鼠Con A誘導的脾淋巴細胞增殖能力和小鼠對DNFB誘發的DTH反應;中劑量組能顯著提高小鼠抗體生成細胞的數量;中劑量組能顯著升高小鼠血清溶血素含量;低、高劑量組能顯著提高小鼠碳廓清吞噬指數;低劑量組能顯著提高小鼠吞噬百分率和小鼠吞噬指數;各劑量組均不能顯著性增強小鼠NK細胞活性。綜上所述，該膠囊具有增強免疫力的保健功能。以中醫理論為基礎，結合現代藥理研究，制備的靈芝番茄膠囊具有制備工藝簡單、增強免疫力保健功能確切的優勢，具有廣泛的應用前景。

參考文獻

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