王琳琳 祝程誠 陳婷 趙軍 應春妹 高晶(通訊作者)
(1 上海市楊浦區控江醫院檢驗科 上海 200093)
(2 復旦大學附屬婦產科醫院檢驗科 上海 200011)
革蘭陰性腸桿菌引起的院內感染,尤其是泌尿系統感染非常普遍[1]。院內感染的腸桿菌耐藥率的變化,增加了抗感染治療失敗的風險[2]。老年人免疫功能的下降,使其對病原菌的防御能力較弱,導致更易感染病原菌,尤其是泌尿系統感染,嚴重影響疾病治療效果。雖然已經有很多抗菌譜可以指導臨床進行經驗性抗菌藥使用,但考慮到這些抗菌譜都有一定的地域局限性和病人的個體差異[3],本文對引起我院老年患者泌尿系統感染的腸桿菌科細菌的臨床分布和耐藥情況進行分析,為臨床合理使用抗生素提供參考。
2017年7 月—2018年7月,從我院住院老年泌尿系統感染患者(年齡≥60歲)尿液標本中培養分離的94株腸桿菌科菌株,采集連續2次送檢培養出同一細菌的中段尿樣本,剔除同一患者反復分離到的菌種。
(1)標本收集:收集患者中段尿,置于無菌容器內。標本在2h內送檢并接種。對于生長的純種細菌或菌落計數具有臨床意義(≥105CFU/ml)的菌種進行鑒定和藥敏分析[4]。
(2)培養、鑒定和藥敏試驗:對培養出的可疑菌落使用法國生物梅里埃公司的VITEK2微生物全自動分析儀、API鑒定系統進行鑒定和藥敏試驗。藥敏試驗采用最低抑菌濃度(MIC)和K-B紙片擴散法,頭孢哌酮/舒巴坦和替加環素按歐洲藥敏試驗委員會(EUCAST)制定的標準判斷藥敏結果。此外,商品化藥敏卡片缺少的藥敏結果使用OXOID公司生產的藥敏紙片進行補充試驗,包括頭孢哌酮/舒巴坦、美洛培南、頭孢噻肟、頭孢呋辛、頭孢美唑、頭孢唑林、替加環素、多粘菌素、磷霉素。質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853,由上海市臨床檢驗中心提供。
(3)超廣譜B內酰胺酶(ESBLs)測定:按照CLSI M100-S27采用ESBLs表型確證試驗測定大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和變形桿菌屬中產ESBLs菌株。
采用WHONET5.6統計軟件對抗菌藥物敏感性試驗的結果進行分析。采用SPSS22.0統計軟件對腸桿菌檢出情況進行分析和比較。
除去檢出為革蘭氏陽性球菌和真菌的標本,男性和女性患者革蘭氏陰性腸桿菌的檢出率見表1,≥81歲以上患者泌尿系統腸桿菌的檢出率顯著高于另兩個年齡段(P<0.05);男性患者腸桿菌的總檢出率顯著低于女性患者(P<0.05),見表1。

表1 不同性別和年齡組患者腸桿菌檢出情況
大腸埃希菌67株(71.3%)為老年泌尿系統感染最多見致病菌,其次為肺炎克雷伯菌8株(8.52%)和奇異變形桿菌6株(6.38%),細菌檢出構成比的差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 老年泌尿系統感染腸桿菌種類及構成比
老年護理科46株(48.9%)最多,心內科16株(17.1%)次之,第三為內科綜合13株(13.8%),見圖。

圖 94株腸桿菌在醫院各臨床科室的檢出分布
ESBL(+)腸桿菌細菌比例為69.3%,其中大腸埃希菌49例(52.1%),肺炎克雷伯菌3例(3.2%)。
MIC結果顯示第一代頭孢菌素、青霉素類、喹諾酮類、氟喹諾酮類的耐藥率均在80%以上。β-內酰胺/β-內酰胺抑制劑復合物類抗菌藥物中,除哌拉西林/他唑巴坦和頭孢替坦外,其他耐藥率都在70%左右;單環內酰胺類、磺胺類藥物耐藥率也大于50%。碳氫霉稀類和氨基糖苷類抗菌藥物對腸桿菌有很好的抑制作用,厄他培南、亞胺培南和阿米卡星的耐藥率均<10%,藥物敏感率均>90%。
K-B法結果顯示,替加環素的耐藥率10.8%,敏感率>80%;磷霉素耐藥率為8.2%,美洛培南10.8%,多粘菌素B的耐藥率23.7%,但它的中敏率確達到75.3%。針對9例變形桿菌加做了亞胺培南藥敏紙片,敏感率只有66.7%,見表3。

表3 94株腸桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率
本院老年人泌尿系感染革蘭氏陰性腸桿菌94株,其中71.3%為大腸埃希菌,第二為肺炎克雷伯居8.52%,奇異變形桿菌占6.38%,這一結果趨勢與以往相關文獻報道相似[5]。從圖1可以看出老年護理科的病人患泌尿系統感染的概率最高,占比48.9%,主要是因為老年護理科的病人多為長期臥床的病人,極易引起泌尿系統感染,統計陽性菌株各年齡段患泌尿系統感染的病人情況,其中主要集中在81歲以上占比77.7%,這一結果與國內相關的報道一致[6],由此可見年齡越大,患泌尿系統感染的風險明顯增加。同時,我們統計了同期送檢的所有尿液標本,腸桿菌總檢出率女性顯著高于男性,≥81歲患者泌尿系統腸桿菌的檢出率都明顯高于另兩個年齡段的患者,與翁麗貞等報道一致[7],并且我們的統計顯示男性以大腸埃希細菌和肺炎克雷伯菌為主要致病菌,而女性主要以大腸埃希菌和奇異變形桿菌為主要致病菌。
本研究顯示老年護理科的抗菌藥物整體耐藥率低于心內科和內科綜合科,可能由于老年護理科是以護理康復為主,而心內科和內科綜合科患者合并其他基礎疾病,抵抗力較差,抗生素使用較多等原因。
我院泌尿系統感染檢出的腸桿菌科細菌對多種抗生素均已產生耐藥。哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南、亞胺培南、阿米卡星和磷霉素的耐藥率均<10%,對腸桿菌有極好的抑制作用,可以作為急性重癥感染經驗用藥優先選擇的藥物。臨床上哌拉西林/他唑巴坦、頭霉屬類和碳青霉烯類抗菌藥物對ESBLs(+)大腸埃希菌的耐藥率要好于ESBLs(-)大腸埃希菌,可用于產ESBLs(+)大腸埃希菌感染治療的首選藥物[8]。
綜上所述,我院住院老年患者泌尿系統感染病原菌以大腸埃希菌為主,對多類抗菌藥物有高耐藥率,不同性別、不同科室的患者菌株檢出率和耐藥率有顯著差異,臨床應根據尿液培養及藥敏結果合理選擇抗菌藥物。