老年動脈粥樣硬化性心肌梗死患者血清胱抑素C水平與血管內皮細胞損傷相關性研究*

劉玉珊

青海省心腦血管病?？漆t院檢驗科(西寧 810000)

心肌梗死(Myocardium infarction，MI)是冠脈長期缺血缺氧所致的心肌壞死性病變，冠脈粥樣硬化(Coronary atherosclerosis，CAS)是MI發生的病理基礎[1-2]?！凹毙怨诿}綜合征”這一概念的提出，使人們明確MI與AS斑塊形成及破裂所致凝血酶形成、血小板激活及血栓形成有關。胱抑素C(Cystatin C，Cys C)是機體內有核細胞分泌的非糖化的蛋白分子，僅可通過腎小球濾過被清除，因此是評估機體腎功能的理想標志物。近年來，越來越多研究證實，Cys C通過參與動脈血管內平滑肌細胞增殖和纖維組織增生等慢性炎癥反應，參與AS形成及進展[3-4]。血管內皮細胞是襯于淋巴管及血管內表的單層上皮，具有吞噬衰老和壞死細胞組織、細菌和其它異物，參與機體免疫防御等功能?，F已證實，AS發生是各類損傷作用于血管內皮細胞，導致血管內皮功能失調而表達釋放各類細胞因子共同參與的慢性炎癥過程[5]。血管內皮功能檢測在預防AS形成，判斷斑塊穩定性和臨床治療效果等方面具有重要意義。本研究擬通過檢測一氧化氮(Nitric oxide，NO)、內皮素-1(Endothelin-1，ET-1)、纖溶酶原激活物抑制劑-1(Plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1)、血栓調節蛋白(Thrombomodulin，TM)評估老年動脈硬化性MI患者血管內皮細胞損傷情況，探討高Cys C與老年動脈硬化性MI患者血管內皮細胞損傷的相關性。

資料與方法

1 一般資料 以2018年1月至2019年7月本院收入的42例MI患者(MI組)、35例心絞痛患者(心絞痛組)和同期進行健康體檢的35例健康志愿者(對照組)為研究對象。病例納入標準：心絞痛及MI患者均經冠脈造影(CAG)確診；排除近期服用過維生素B12、葉酸、激素等可能影響測定指標的藥物；簽署知情協議書。對照組男22例，女13例；年齡60～86歲，平均(71.35±4.57)歲；合并糖尿病6例，合并高血壓11例，吸煙16例。心絞痛組男23例，女12例；年齡61～87歲，平均(71.51±4.55)歲；合并糖尿病8例，合并高血壓9例，吸煙18例。MI組男27例，女15例；年齡60～87歲，平均(71.84±4.50)歲；合并糖尿病8例，合并高血壓15例，吸煙20例。三組性別、年齡分布、合并癥占比及吸煙占比間差異無統計學意義(P>0.05)，組間具有可比性。

2 研究方法 分別收取三組受試者均于入組后次日空腹狀態下肘靜脈血樣5 ml，加入離心管中，3500 r/min條件下離心10 min，分離血清保存，用于研究指標的測定。Cys C測定選擇乳膠增強免疫投射比濁法，儀器選擇全自動蛋白分析儀(美國貝克曼庫爾特，型號IMMAGE 800)，試劑由武漢明德生物科技股份有限公司提供；血清NO測定選擇硝酸還原酶法；ET-1測定均選擇酶聯免疫吸附法，PAI-1測定選擇酶聯雙抗體夾心法；TM測定選擇放射免疫法。試劑盒均購自于上海紀寧實業有限。

結 果

1 三組受試者基礎生化資料比較 見表1。單因素方差分析顯示，三組血清肌酸激酶(CK)、總膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平間比較差異具有統計學意義(P<0.01)，但兩組尿素氮(BUN)、空腹血糖(FBG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平間比較差異無統計學意義(P>0.05)。LSD檢驗顯示，MI組血清CK水平明顯高于心絞痛組和對照組(P<0.01)，但心絞痛組和對照組間差異無統計學意義(P>0.05)；MI組和心絞痛組血清CHOL、TG、LDL-C水平均顯著高于對照組(P<0.01)，但MI組和心絞痛組血清CHOL、TG、LDL-C水間比較差異無統計學意義(P>0.05)。

表1三組受試者基礎生化資料比較

注：與對照組比，*P<0.01；與心絞痛組比，#P<0.01

2 三組受試者Cys C和血管內皮細胞因子表達水平比較 見表2。單因素方差分析顯示，三組血清Cys C、NO、ET-1、API-1、TM水平間比較差異具有統計學意義(P<0.01)。LSD檢驗顯示，MI組和心絞痛組血清Cys C、ET-1、API-1、TM水平均顯著高于對照組(P<0.01)，血清NO水平明顯低于對照組(P<0.05)；MI組血清Cys C、ET-1、API-1、TM水平均顯著高于心絞痛組，血清NO水平顯著低于心絞痛組(P<0.01)。

3 MI患者血清Cys C與CK、CHOL、TG、LDL-C及血管內皮功能因子相關性分析 見表3。Pearson相關系數分析顯示，MI患者血清Cys C水平與CK、CHOL、TG、LDL-C、ET-1、PAI-1和TM均呈顯著正相關，與NO水平呈顯著負相關(P<0.01)。

表2三組受試者Cys C和血管內皮細胞因子表達水平比較

注：與對照組比，*P<0.05，△P<0.01；與心絞痛組比，#P<0.01

表3MI患者血清Cys C與CK、CHOL、TG、LDL-C及血管內皮功能因子相關性

討 論

冠心病已成為威脅全球人生命健康的主要心血管疾病，MI是冠心病的最嚴重發病類型，表現在起病急，病情變化兇險，病死率高等。AS作為MI主要發病基礎，其形成是一個受多種因素影響的復雜的生理病理過程，包括年齡、吸煙、糖尿病、高血壓、高血脂、家族病史、性格等。但近年來，有報道稱，約20%左右的AS患者并未存在上述危險因素[6-7]。Cys C是臨床應用廣泛的反應患者腎功能情況的良好生化指標。然而，近年來，越來越多研究指出，Cys C可能參與AS形成，其血漿水平升高會增加機體心血管疾病患病風險[8]，故可作為心血管疾病發生發展的獨立預測因子[9]。

血管內皮是機體內最大的內分泌、旁分泌、自分泌組織，通過分泌各種活性分子，調節血管舒縮功能、抑制血栓形成及白細胞的粘附作用。有研究顯示，血管內皮功能異?；驌p傷是AS及血栓形成的始動環節，且與其發生發展密切相關，臨床可將血管內皮細胞功能及相關活性因子測定作為心腦血管疾病判斷及臨床診治效果評估的直接指標[10]。NO主要由血管內皮細胞內NO合酶作用于L精氨酸而成的血管內皮依賴性舒張因子，其表達水平受凝血酶、5羥色胺、P物質和剪切應力等影響。NO不僅是維持機體血管正常舒張功能的重要分子，且是介導內皮細胞中多種抗AS作用的介質，可抑制血小板和單核細胞向血管內皮組織聚集粘附[11]。血管內皮細胞受損則NO合成釋放量下降時，則有助于單核細胞向內皮遷移粘附，參與AS早期發生[12]。ET是維持心血管系統穩態和基礎血管張力的活性多肽類物質，具有控制血管收縮、調節血液流量的作用，其代謝異常可引發心肌缺血、機體代謝紊亂等。ET-1是功能最強的縮血管物質，正性肌力作用強。正常生理狀態下，ET-1表達水平較低，分別通過內皮素受體A和受體B發揮縮血管和輸血管效應，依靠兩者動態平衡維持血管張力；此外，其對血管平滑肌細胞增殖具有明顯促進作用，參與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的發生發展。王錫惠等[13]測定分析發現，在慢性心衰合并發顫患者體內，Cys C表達與ET-1呈顯著正相關，其上調會增加心衰患者并發房顫的風險系數；趙新華等[14]分析顯示，穩定型心絞痛、不穩定型心絞痛和MI患者體內ET-1變化趨勢與Cys C水平相一致，均隨冠心病病變程度加重而升高。PAI-1是血管內皮細胞合成釋放的單鏈糖蛋白，是血液中重要的纖溶酶原活劑抑制劑，具有較強穩定性。近年來，許多研究指出，PAI-1異常表達與AS形成相關[15]。TM是內皮細胞在基礎狀態下合成的跨膜糖蛋白，與細胞表面受體結合，并在蛋白酶S協同下，發揮抗凝作用；同時其與受體結合還具有抑制血管內皮細胞凋亡的作用。血管內皮功能受損，TM釋放進入血液，引起血清TM異常增加，故成為目前臨床反應血管內皮細胞功能損傷的內源性活性分子。馬進等[16]研究中發現，在不同頸動脈狹窄程度、斑塊大小及病灶大小患者中，其血管內皮損傷因子NO、TM表達變化趨勢與Cys C水平相似。本研究通過對比分析顯示，MI組血清ET-1、PAI-1和TM明顯高于心絞痛患者和對照組受試者，NO水平明顯高于心絞痛組和對照組。表明MI患者均存在較明顯的血管內皮細胞，該結果與以往報道相吻合[17]。Gao等[18]在系統性紅斑狼瘡急性發作患者的研究中發現，活動期患者血清Cys水平明顯升高，且其升高程度與肱動脈內徑呈顯著負相關，與血管內皮生長因子水平呈正相關；Li等[19]研究顯示，阻斷血管內皮生長抑制因子A表達，會促進Cys C表達，顯著抑制血管內皮細胞增殖、遷移。本研究進一步分析顯示，MI患者血清Cys C與ET-1、PAI-1和TM均呈顯著正相關，與NO水平呈顯著負相關。表明，老年動脈粥樣硬化性MI患者長期高水平Cys C會損傷血管內皮細胞，導致血管內皮細胞功能失衡，細胞因子ET-1、PAI-1和TM合成分泌量增加，NO合成釋放減少。

綜上所述，老年動脈粥樣硬化性MI患者血清Cys C水平與血管內皮細胞損傷程度顯著相關。高水平Cys可能通過介導機體內皮細胞損傷，參與MI的發生發展。臨床可通過測定老年動脈粥樣硬化患者血清Cys C水平，反應機體血液內皮細胞功能狀態，從而為MI早期預防及治療提供參考依據。