化瘀調脂方對高脂血癥大鼠降脂作用的實驗研究*

安建峰，孫 燁，劉季元

1.西安交通大學附屬西安市兒童醫院中西醫結合科(西安710002)； 2.西安交通大學第一附屬醫院中醫科(西安710061)；3.陜西省中醫醫院老年病科(西安710003)

高脂血癥是以血清總膽固醇 (Total cholesterol，TC)和低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein-C，LDL-C)升高為特點的脂類代謝異常性疾病[1]，是嚴重心腦血管疾病的獨立危險因素。高脂血癥可以引起血液流變學異常，動脈內皮功能損害，從而引起NO釋放減少，產生超氧陰離子自由基，促使缺血性腦血管病發生。臨床常用治療高脂血癥的西藥主要有他汀類、貝特類等，雖然降脂效果明顯，但是近年研究發現他汀類藥物可能引發肝損傷、橫紋肌溶解、肌肉痙攣、新發腫瘤和糖尿病等不良反應[2-4]。近年來中藥治療高脂血癥因其標本同治、規避肝損傷等優勢越來越受到重視，目前已知約 130 多種中草藥有降脂的作用[5]。本研究旨在觀察化瘀調脂方對高脂血癥大鼠脂質、血清NO和SOD水平的影響。

材料與方法

1 實驗材料

1.1 實驗動物：SD健康雄性大鼠60只，體重(190±10) g。

1.2 化瘀調脂方水煎劑的制備：化瘀調脂方由用黃芪、紅花、茯苓、丹參、山楂、薏苡仁、西洋參、白術、澤瀉、何首烏組成(藥材均購自西安市藥材公司)。水煎,過濾,濃縮,配制成濃度為400%、200%、100%的藥液，分裝加蓋密封，滅菌后，4 ℃貯存備用。

1.3 藥品和試劑：TC、TG檢測試劑盒及NO、SOD檢測試劑盒，分別購自中生北控生物科技股份有限公司及南京建成生物工程研究所。非諾貝特片購自上海衡山藥業有限公司。

2 實驗方法

2.1 實驗分組：SD健康雄性大鼠按體重隨機分為六組：化瘀調脂方高、中、低劑量組、空白組對照、高脂血癥模型組、非諾貝特組，每組各10只。

2.2 造模及處理方法：60只SD大鼠常規飼養1周，禁食12 h，剪尾采血，檢測基礎血脂，組間無統計學差異，開始動物造模?？瞻讓φ战M給予10 ml/(kg·d)生理鹽水灌胃，其余各組大鼠每天一次給予高脂乳劑10 ml/(kg·d)灌胃，飲水不限，共計38 d。造模第11天開始，按藥理實驗方法學[5]計算，化瘀調脂方高、中、低劑量組分別按1 ml/100 g體重給予化瘀調脂方400%、200%、100%藥液灌胃。非諾貝特配成1.4 mg/ml濃度，按1 ml/100 g體重劑量每天一次灌胃[6]。高脂血癥模型組、空白對照組按1 ml/100 g體重劑量給予生理鹽水每天一次灌胃。連續給藥28 d，各組均自由飲水和進食。

3 標本采集 末次給藥后禁食12 h以上，麻醉后從腹主動脈取血，放置2 h左右，待凝后經轉速為3000轉/分離心15 min，取血清置-20℃凍存備檢。

結 果

1 各組對血脂水平的影響 見表1。高脂血癥模型組大鼠血清TG、TC水平明顯高于空白組，表明動物模型復制成功?；稣{脂方各劑量組及非諾貝特組血清TG、TC水平均明顯低于模型組。高劑量組TG、TC與中、低劑量組差異有統計學意義(P<0.05)。高劑量組TC與非諾貝特組差異有統計學意義(P<0.05)，TG與非諾貝特組差異無統計學意義(P>0.05)。中劑量組TC水平與低劑量組差異有統計學意義(P<0.05)，TG水平與低劑量組、非諾貝特組差異均無統計學意義(P>0.05)。低劑量組TG與非諾貝特組差異有統計學意義(P<0.05)。結果表明化瘀調脂方有明顯的降脂作用并有一定的量效關系。

注:與模型組相比,*P<0.05，#P<0.01

2 各組對NO、SOD的影響 見表2。高脂血癥模型組大鼠血清NO、SOD水平顯著低于空白組(P<0.01)，化瘀調脂方高、中、低劑量組及非諾貝特組血清NO、SOD水平明顯高于模型組(P<0.05)。高劑量組NO水平高于中、低劑量組及非諾貝特組(P<0.05)。中劑量組NO水平高于低劑量組(P<0.05)。中、低劑量組NO水平與非諾貝特組差異無統計學意義(P>0.05)。高劑量組SOD水平高于低劑量組及非諾貝特組(P<0.05)。中劑量組SOD水平高于低劑量組(P<0.05)。高、中劑量組之間，中、低劑量組與非諾貝特組SOD水平差異無統計學意義(P>0.05)。表明化瘀調脂方可以提高高脂血癥動物血清NO、SOD水平。

表2 各組對血清NO、SOD的影響(mmol/L)

注：與模型組相比，*P<0.05，#P<0.01

討 論

高脂血癥屬中醫學“痰濕”、“血瘀”范疇。它的主要危害是導致動脈粥樣硬化，進而導致眾多的相關疾病。高脂血癥能使大鼠血清中SOD、NO降低，導致血管內皮損傷，使內皮 NOS(eNOS)儲量和活性發生改變從而導致早期的動脈粥樣硬化病變[6]。

化瘀調脂方由丹參、紅花、山楂、黃芪、西洋參、白術、茯苓、薏苡仁、澤瀉、何首烏為主組成。其中黃芪、丹參配伍提取物可顯著上調大鼠CRP、PPARα、P38MAPK、NF-κB 基因和蛋白的表達，增強 TNF-α-TNFR-PI3K信號轉導通路表達從而有效降低高脂飼料誘導的高脂血癥模型大鼠 TC、TG、LDL 水平，提高 HDL 水平，具有明顯的降脂作用[7-8]。紅花的藥理研究及動物實驗均表明紅花具有保護血管內皮、抗氧化損傷及降低血清膽固醇的作用[9-10]。山楂能阻斷并減少自由基的生成，可通過降血脂、抗氧化、抑制炎癥因子和活化調節因子的生成、抗血小板凝集等多種作用抗動脈粥樣硬化[11-12]。西洋參可糾正血脂代謝紊亂，具有明顯改善胰島素抵抗大鼠脂代謝異常的作用[13]。白術精提物通過抑制肝臟中 HMG-Co A 還原酶來減少膽固醇合成，調節體內 LCAT，ACAT 水平來增加脂質代謝轉運，能有效調節高脂大鼠血脂紊亂，尤其對升高 HDL-C 有顯著療效[14]。茯苓可以抑制高脂血癥大鼠從對脂類物質的吸收，β-茯苓聚糖可加速機體脂類物質尤其是膽固醇的分解，從而促進機體體內的脂質代謝水平，阻止了脂類物質向動脈血管內膜的滲透，保護動脈血管的內皮細胞使其免受脂質氧化導致的損傷，從而減輕了動脈粥樣硬化發展[15]。薏苡仁含有多種酯類及多糖，具有降壓擴張血管等作用。澤瀉醇提取物可以通過改變腸道菌群的豐度、多樣性和功能類群等靶標有效降低高脂高糖飲食大鼠進行脂質代謝調節[16]。澤瀉水煎液能顯著降低高脂血癥大 鼠血清中TC、LDL-C水平[17]。何首烏有效成分能夠提高NO含量和SOD活性，能減輕高脂血癥引發的脂質過氧化反應而具有明顯的抗氧化作用[18]。綜上，化瘀調脂方的基本組成成分可從多個途徑調節脂質代謝。

高脂血癥的中醫病機，多數學者認為以肝、脾、腎等器官的臟腑功能失調為本，以痰瘀痹澀為標，瘀則生痰，痰則致瘀，互結于血脈之中發為本病。本虛標實是導致血脂異常的根本病機?；稣{脂方中以丹參、紅花為君藥以化瘀通絡，以黃芪、西洋參為臣藥以益氣，輔以薏苡仁、茯苓、白術、山楂健脾化濕祛濁，以何首烏補益氣血，澤瀉利濕泄濁，輔佐君臣共同發揮益氣活血化痰之效。本實驗研究結果顯示化瘀調脂方具有調節脂類代謝的作用，且存在一定的量效關系。其機理可能在于化瘀調脂方可以提高SOD活性和NO的合成，從而維護體內自由基穩態與平衡，減少脂質過氧化物的產生，改善血管內皮細胞功能，阻止動脈管壁血栓及粥樣斑塊的形成。因此，在高脂血癥及動脈粥樣硬化癥治療以及對于腦血管的保護等方面均有重要意義。