不同殺菌劑對柑橘黑點病菌的毒力測定

杜丹超，蒲占湑，鹿連明，胡秀榮，黃振東

(浙江省柑橘研究所，浙江 黃巖 318020)

柑橘黑點病是柑橘類植物上嚴重的真菌性病害，病原菌為有性態(tài)的柑橘間座殼菌(Diaporthecitri)和無性態(tài)的柑橘擬莖點霉菌(Phomopsiscitri)，可為害橘、柑、柚等大多數品種，其發(fā)生貫穿于整個柑橘生長期。根據發(fā)生部位的不同可分為柑橘黑點病、樹脂病和褐色蒂腐病，主要感染植株幼葉、幼梢和幼果。發(fā)病后表面出現黑色或紅褐色突起的小點或斑塊的即為黑點病；感染枝干并造成枝干萎蔫甚至整樹枯死腐爛的為樹脂病或流膠病；侵染果實蒂部，貯運過程中常從蒂部變褐，周圍呈油漬狀，最后整個果實腐爛的為褐色蒂腐病[1-2]。黑點病在柑橘種植區(qū)普遍發(fā)生，嚴重影響柑橘的產量和品質。據調查，一般柑橘園枝干發(fā)病率達0.5%以上，發(fā)病嚴重的園區(qū)黑點病株發(fā)病率可達100%，新稍發(fā)病率70%以上，果實發(fā)病率60%以上，造成部分枝干枯萎，甚至全樹枯死[3]。因此，柑橘黑點病的防治刻不容緩。

目前，化學防治仍是黑點病防治最經濟有效的手段，我國柑橘產區(qū)主要以二硫代氨基甲酸酯類代森錳鋅和銅制劑類的氫氧化銅來防治柑橘黑點病，貯藏期以咪鮮胺為主防治青綠霉和褐色蒂腐，但這些藥劑的頻繁的使用出現防效降低的現象，這可能與病原菌產生抗性有關[1，4]。本研究選擇氟啶胺、咪鮮胺和代森錳鋅測定柑橘黑點病的室內毒力，以期選出毒力較高的殺菌劑，為進一步開發(fā)利用和提高該病害的化學防治效率提供理論指導。

1 材料與方法

1.1 材料

供試菌種。柑橘黑點病病菌的分離純化，從浙江省臺州市黃巖、玉環(huán)、臨海、天臺等柑橘產區(qū)采集病葉，收集病害果實，采用常規(guī)組織分離法分離，按照科赫氏法回歸驗證，分類鑒定后，菌種于4 ℃保存于浙江省柑桔研究所。

藥劑。500 g·L-1氟啶胺懸浮劑(先正達集團)；450 g·L-1咪鮮胺乳油(以色列馬克西姆化學公司，江蘇龍燈化學有限公司分裝)；代森錳鋅可濕性粉劑(大生-M45，美國陶氏益農公司)。

培養(yǎng)基。馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)：去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，無菌水1 000 mL。

1.2 方法

采用菌絲生長速率法[5]。將17株柑橘致病菌D.citri在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5～7 d后，于菌落邊緣打取直徑5 mm的菌餅，分別接種于帶藥PDA培養(yǎng)基平板上，以不含殺菌劑處理為對照，每處理重復3次。將接菌后的平板于28 ℃培養(yǎng)箱內倒置培養(yǎng)，待對照菌落直徑長至培養(yǎng)皿的2/3時，采用十字交叉法測量菌落直徑，根據公式計算殺菌劑對柑橘病原真菌的菌絲生長抑制率。根據毒力回歸方程求出殺菌劑的有效抑制中濃度EC50。

2 結果與分析

由表1可見，氟啶胺對柑橘黑點病菌絲生長抑制作用最強，其次是咪鮮胺，代森錳鋅的抑菌作用最弱，室內毒力表現為氟啶胺>咪鮮胺>代森錳鋅。

表1 氟啶胺、咪鮮胺、代森錳鋅的毒力作用

3 討論

咪鮮胺、代森錳鋅和氟啶胺在中國均有登記用于柑橘黑點病的防治，本試驗結果也表明，3種殺菌劑均對柑橘黑點病有抑制作用。其中，氟啶胺的抑菌效果最好。咪鮮胺屬于咪唑類殺菌劑，通過作用于細胞膜甾醇的生物合成來抑制生長[6]。本試驗結果與方天露等[7]的報道一致，對柑橘黑點病菌絲生長室內毒力較強。二硫代氨基甲酸酯類藥劑代森錳鋅為多作用位點保護性殺菌劑，對柑橘黑點病的防效明顯[8-9]。本研究中代森錳鋅對菌絲生長有一定的抑制作用，但部分菌株有一定耐藥性，其最大值為最小值的174倍，這與劉欣等[8]的研究結果存在一定差異，是否由于菌種差異或抗性原因造成還需進一步試驗研究。

柑橘黑點病的黑點是寄主防衛(wèi)反應的產物，一旦感染病菌，黑點就會發(fā)生，故防治的重點是預防病菌感染，在藥劑選擇上，應以保護性殺菌劑為主。試驗結果表明，咪鮮胺的室內抑制效果高于代森錳鋅，但黃振東等[9-10]田間試驗剛好相反，認為代森錳鋅仍是防治黑點病的最佳藥劑，這可能與保護性殺菌劑耐雨水沖刷、持效期長等因素有關。二硝基苯胺類氟啶胺也屬于保護性殺菌劑，為氧化磷酸化作用的解偶聯(lián)劑[11]，對交鏈孢屬、疫霉屬等均有效，并有較強的抑制作用，兼有優(yōu)良的控制食植性螨類的作用，且耐雨水沖刷，持效期長[12]。本研究室內毒力試驗表明，氟啶胺毒力作用遠高于咪鮮胺和代森錳鋅，可作為柑橘黑點病防治的備選藥劑，但田間實際應用技術還未完善，田間使用劑量、持效期、農藥殘留等還需進一步研究。