3種不同方法檢測肺炎支原體抗體IgM結果比較

藍仙娥 文尚梅

(1.廣東省清遠市婦幼保健院檢驗科 清遠 511500；2.廣東省清遠市婦幼保健院兒科 清遠 511500)

肺炎支原體(M.Pneumonia)是人類支原體肺炎的病原體，主要病理改變以間質性肺炎為主，或并發支氣管肺炎[1]。抗體IgM是急性感染的指標，實驗室進一步檢查，對確定病因，對癥治療具有重要的臨床價值。本研究為比較分析肺炎支原體抗體IgM檢測的常用方法檢測結果，特選定我院1832例疑似肺炎支原體感染的患兒末梢血及血清，進行肺炎支原體抗體IgM檢測，并對其檢測結果進行對比分析，具體報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

應用醫學樣本對比勘驗法，選取入住我院1832例疑似肺炎支原體感染的患兒，收取其末梢血及血清樣本進行檢測，并對其檢測結果進行統計分析。所有患兒均符合《實用兒科學》的診斷標準，起病緩慢，患者伴有乏力、咽痛、頭痛、咳嗽、發熱、食欲不振、腹瀉、肌痛、耳痛等癥狀[2]。其中，男1034例，女798例，年齡0～14歲，中位數年齡5歲。3組患者臨床資料差異不明顯，不具有統計學意義(P>0.05)。

1.2 儀器與試劑

膠體金法采用珠海麗珠試劑股份有限公司提供的肺炎支原體IgM抗體檢測試劑盒對病人末梢血進行檢測；間接免疫熒光法采用比爾賽有限公司提供的九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒；酶聯免疫吸附法用歐蒙試劑公司提供的抗肺炎支原體IgM抗體檢測試劑盒。

1.3 檢驗方法

用微量吸管取病人末梢血10μl進行膠體金檢測；干燥管抽取患兒靜脈血2～3ml，分離血清備檢測，采用間接免疫熒光法和酶聯免疫吸附法檢測。

1.4 觀察指標

與臨床檢出陽性率研究結果進行對比分析，檢出率一致性好，與臨床符合率高，視為檢出效果好。

1.5 統計學分析

本次調查均采用DAS(統計設計和分析系統)對研究數據進行統計分析，陽性率以%表示，計量資料組間比較用χ2檢驗。當P<0.05時，有統計學意義。

2 結果

2.1 3種方法陽性檢出率

1832例中采用膠體金法檢測陽性770例，陰性1062例，陽性率42.07%；間接免疫熒光法檢測陽性375例，陰性1457例，陽性率20.52%；酶聯免疫吸附法陽性384例，陰性1448例陽性率21.0%。膠體金法在肺炎支原體抗體IgM檢測中的陽性檢出率明顯高于間接熒光法和酶聯免疫吸附法，膠體金法與間接熒光法兩組對比(χ2=42.31，P<0.05)；膠體金法與酶聯免疫吸附法兩組對比(χ2=39.26，P<0.05)；間接熒光法與酶聯免疫吸附法兩組對比(χ2=0.134，P>0.05)，見表1。

表1 3種方法陽性檢出率

總例數(n)陽性例數(n)陽性率(%)膠體金法183277042.07間接免疫熒光法183237520.52酶聯免疫吸附法183238421.0

2.2 3種方法陽性率與臨床診斷陽性率符合率對比

3種方法陽性檢出例數與臨床診斷實際陽性例數符合率差異不顯著，P>0.05。但是膠體金法一致性較好，間接免疫熒光法和酶聯免疫吸附法高度一致，見表2。

表2 3種方法陽性檢出率

陽性例數(n)臨床診斷陽性例數(n)陽性符合率(%)Kappa值膠體金法77053970.00%0.557間接免疫熒光法37528375.46%0.632酶聯免疫吸附法38428975.26%0.621

3 討論

3.1 支原體肺炎概況

支原體肺炎是嬰幼兒期常見和高發呼吸道疾病，具有極高的危害性，可導致患兒皮膚、神經系統、心血管系統、泌尿系統、運動系統等損傷。從支原體肺炎發病機制來看，支原體感染引起嬰幼兒感染、肺部感染支原體導致的肺炎，通過咳嗽、咳痰等傳染，代謝較慢[3]。早期診斷中，通過應用肺炎支原體抗體IgM檢測來實現對患者疾病的科學治療，并成為指導預后的指標。具體方法為膠體金法、間接熒光法 、酶聯免疫吸附法。

3.2 3組患者不同檢測方法的臨床療效比較

膠體金法在肺炎支原體抗體IgM檢測中的陽性檢出率明顯高于間接熒光法和酶聯免疫吸附法，膠體金法與間接熒光法兩組組差異顯著(P<0.05)；膠體金法與酶聯免疫吸附法兩組差異顯著(P<0.05)；間接熒光法與酶聯免疫吸附法兩組差異不顯著(P>0.05)。

文獻資料數據進一步佐證，疑似肺炎支原體(MP)感染中,血清MP-IgM抗體聯合檢測，具有極高的特異度、靈敏度、陰性預測值、陽性預測值(P<0.05)[4]。MP-IgM陽性率為30.1%；不同年齡段間總體的MP-IgM陽性檢出率為26.0%，男女性患兒對比為41.2%和35.1%(χ2=31.161,P<0.001)[5]。MP-IgM和MP-IgG的敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確度中(膠體金法)快速檢測MP-IgM和MP-IgG，對提高疾病診斷率、縮短病程、避免交叉感染、減輕患者及社會負擔，起效顯著[6]。磁微粒化學發光法與被動凝集法的陽性符合率為95.8%,陰性符合率為96.9%,Kappa值為0.893；ELISA法的陽性符合率為97.4%，陰性符合率為98.9%,Kappa值為0.956[7]。

綜合來講，膠體金作為一種常用標記技術，以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體之免疫標記技術，以氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等還原劑的作用下，聚合成相應大小的金顆粒，并由于靜電作用而使金顆粒成為一種穩定的膠體狀態，形成攜帶著負電的疏水膠溶液。其主要方法原理為：雙抗體夾心法原理，用于較大分子量的蛋白(抗原)的檢測中檢測效果確切，比之間接熒光法(將抗原或抗體吸附在固相載體表面)和酶聯免疫吸附法(將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法)在肺炎支原體抗體IgM陽性率檢測中對比效果更明顯。

綜上所述，3種方法與臨床總符合率比較好，且各有優缺點，膠體金法在肺炎支原體抗體IgM檢測中的陽性檢出率明顯高于間接熒光法和酶聯免疫吸附法，且操作簡便，結果報告快速，可作為臨床肺炎支原體抗體檢測篩查指標；間接熒光法與酶聯免疫吸附試驗一致性好，與臨床陽性符合率高，可作為臨床肺炎支原體感染首選項目。