國產精子計數板在長白公豬精液檢測上的應用研究

崔小榮，陳志林，黃梅，師曉杰，陳興榮，梁振華，陳斌燦，嚴廣寬

（溫氏食品集團股份有限公司，國家生豬種業工程技術研究中心，廣東 云浮 527400）

精液的常規檢測是評價公豬精液質量的一項基本檢查。近年來，養豬行業逐漸出現一些新的自動檢測技術應用在精液的常規分析檢測中，如CASA(Computer-aided sperm analysis)分析系統、EasyCyte分析儀、Magapor GESIPOR 分析系統等。然而這些精液分析儀配套的精子計數板存在價格高、不便清洗等缺點[1]。此試驗主要以精子計數板為研究對象，研究國產的精子計數板產品代替進口的精子計數板產品的可行性，以期為豬的精液檢測節省費用并提供參考與借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗動物來自溫氏食品集團股份有限公司山東聊城地區種豬場，共計81 頭長白溫系公豬，公豬不同生理階段飼糧營養水平依據中國《豬飼養標準》（NY/T 65—2004）。試驗數據采集于2019 年6 月至2019年10 月，試驗過程主要對公豬的耳號、精液采集時間及采精量、精子密度、精子活力、正常及異常精子數量等指標進行記錄。

1.2 試驗主要材料

豬精液的質量分析采用進口的自動檢測系統（如圖1），其中進口的精液自動檢測系統、進口的精子計數板、移液槍等采購于西班牙某公司；國產的精子計數板則由廣州某公司提供，國產精子計數池的深度設計為10 μm。

1.3 試驗方法

公豬站采精人員每天上下午各采精1次，具體操作時間如表1所示。采精完成后，精液檢測步驟如以下：1）對原精進行稱重，并記錄參數；2）打開自動檢測系統GESIPOR3.0，在頁面中的相應位置輸入公豬耳號，并打開采精檢測頁面；3）點擊公豬、采精員，并錄入相應信息；4）把原精輕輕地攪拌，使其均質，再取100 ul 原精和900 ul 稀釋液在等溫37 ℃下稀釋混合；5）混合均質后取3.5 ul 滴到相應的精子計數板上；6）用10 倍物鏡和10X 光圈檢測活力、對屏幕視野進行拍照分析，隨機分析3 個不同視野，然后再點擊活力、密度和正常形態等分析，同時在采精頁面讀取檢測結果。

1.4 統計方法

試驗數據采用Microsoft Excel 2010 進行整理篩選，精子數、精子密度、精子活力等指標使用SPSS 19.0 軟件的單因素方差分析LSD 法進行差異顯著性檢驗，結果均使用平均值±標準誤的形式表示。

2 結果與分析

2.1 不同精子計數板對長白公豬精液參數的影響

由表2 可知，不同的精子計數板對長白公豬精液的精子密度、精子活力、正常精子比例等參數沒有產生顯著差異性。進口組精子計數板測得的隨機3 個視野平均精子數、精子密度、精子活力、正常精子比例分別為566.06個、249.56×106/ml、92.65%、71.52%；國產組則對應測得為577.02 個、252.68×106/ml、91.32%、72.65%，以上兩組的同一指標相比均差異不顯著。綜合以上，相比進口的精子計數板，國產的精子計數板在長白公豬精液的各項參數間無統計學差異；國產的精子計數板替代進口的精子計數板是可行的。

表1 公豬站采精時間

表2 不同精子計數板對長白公豬精液參數的影響

3 討論

精子計數板作為精液常規分析的必備工具已在養豬生產上廣泛使用。不論是傳統的光學顯微鏡分析還是新的自動檢測系統分析，精液必須滴入精子計數池后才能進行分析[2]。而不同廠家配套的精子計數池其深度一般不統一，以10 μm和20 μm 深度的計數池最為常見。此試驗的國產精子計數池深度為10 μm，用以分析精液的精子密度、精子活力、正常精子比例等參數，探討其代替進口的不可重復使用的精子計數板產品的可行性。試驗結果表明，與進口的精子計數板產品相比，國產的精子計數板產品在長白公豬精液的各項參數間無統計學差異；國產的精子計數板產品可替代進口的精子計數板產品在養豬生產中應用。

此外，國產計數板產品對于降低使用成本上也有一定優勢。當前，精液自動分析儀配套的進口精子計數板產品一般存在價格高、不可重復使用等問題，其一般市場售價為5 ～6 元/腔，25 ～30 元/板；而此試驗的國產計數板產品的市場價格 一 般 在2 ～3 元/腔，10 ～15元/板，且可重復使用2 ～3 次。因此，使用國產計數板產品更加經濟適用，有利于降低公豬精液的檢測成本。