試論玉米中蛋白質含量測定的技術方法

邵兵

摘 要：玉米是我們日常生活中常見的一種食物，含有人體所需要的各種營養(yǎng)物質，包括脂肪、蛋白質、碳水化合物以及各種微量元素。其中，蛋白質含量最高。蛋白質作為人體生命活動所必須的一種營養(yǎng)物質，可以從各種食物中都獲得，玉米也是其中的一樣。玉米中含有大量的蛋白質，人們經常會從玉米中攝取所需要的蛋白質。那么，玉米中到底含有多少成分的蛋白質呢？其實，是可以通過一定的測量技術計算出來的。本文將針對玉米種蛋白質含量測定的技術方法進行一定的探究，僅供參考。

關鍵詞：蛋白質提取;蛋白質濃度測定;玉米

一、蛋白質的提取方法

想要從玉米中提取一定含量的蛋白質，就必須采用一定的化學藥劑，這些化學藥劑可以幫助實驗者從玉米中提取一定數量的蛋白質，讓蛋白質作為一種清晰可見的物質呈現(xiàn)在人們面前。另外，對于蛋白質的提取與研究也可以促進生命科學的發(fā)展，其技術的發(fā)展水平將直接影響著生命科學的發(fā)展進步。蛋白質的提取是對蛋白質進行研究的重要一步，它影響蛋白質活性的研究、產率和結構的完整性，因此，提取過程必須萬無一失，采用合適的提取方式是進行蛋白質提取的第一步。

（一）磷酸緩沖液法

磷酸緩沖液法在化學實驗中是一種常見的化學藥劑，通常使用的有磷酸鈉緩沖液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸鉀緩沖液（K2HPO4&KH2PO4），由于他們有兩極解離，因而被用作提取蛋白質的藥劑。用這種方法進行蛋白質提取時，在存放的過程中對于溫度有一定的要求，溫度不宜太高，不然會破壞蛋白質的生物結構特性。這種方法，過程非常復雜，且耗時較長，但是蛋白質提取的效率很高，因而也是常用的一種提取方法。磷酸緩沖液是利用磷酸鉀和磷酸鈉兩種化學物質配比得來的，因此，在應用的過程中，要注意兩者之間的配比比例，按照一定的比例配比成功之后，才能夠具體用于實驗當中。

（二）Tris法

Tris緩沖溶液（英文：buffer solution）是一種能在加入少量酸或堿和水時大大減低pH變動的溶液。蛋白質作為一種物質從玉米中提取出來，在自然環(huán)境的影響下，其物質結構特性很容易受到改變，在溫度、濕度以及陽光的照耀下，蛋白質的結構會被打破。而采用Tris緩沖溶液進行蛋白質的提取，可以保證蛋白質在自然環(huán)境中的ph值，可以應用這種緩沖體系來抵抗蛋白質在提取的過程中發(fā)生的ph值變化。

（三）TCA-acetone法

TCA-acetone法與其說是一種方法，還不如說是一種裂解液，在蛋白質的提取過程中，裂解液可以充分的將蛋白質從玉米中分離出來，這種利用解離液的方法相比較于前兩種方法來說，其過程操作非常復雜，且每一步步驟都必須嚴格按照操作規(guī)則來進行，如果中間出現(xiàn)錯誤，那么就會對蛋白質的提取產生一定的影響，且會破壞蛋白質本身的結構特性。另外，這種方法對蛋白質存儲的環(huán)境也有一定的要求，在高于或者低于一定范圍的溫度時，會破壞蛋白質本身的結構特性。蛋白質本身具有的結構特性才能在食物中提供人們身體所需要的營養(yǎng)物質，如果在實驗中破壞了蛋白質結構，就要考慮重新進行提取與測量過程了。

二、蛋白質濃度測定方法

（一）Bradford

Bradford法測量蛋白質的濃度屬于染料結合法的一種。蛋白質與Bradford結合在2min左右的時間內達到平衡，完成反應十分迅速。這種測量方法所需要的實驗藥劑需要進行現(xiàn)場配比，在常溫條件保存在棕色試劑瓶中三個月，但這段時間可能會出現(xiàn)染料的沉淀，所以每次使用前需混合均勻。在實驗開始之前，進行搖晃，可以讓兩者之間充分混合均勻，使他們的作用能發(fā)揮到最大，在實驗中能進行充分反應。

（二）紫外分光光度法

紫外線在我們的生活中是一種常見的光束，每天我們都會被紫外線照射，但是紫外線長時間的照射會對人的身體造成一定的傷害。紫外線在工業(yè)化學領域中也發(fā)揮著重要的作用，尤其是在室內實驗中，紫外線的照射能發(fā)現(xiàn)很多化學原料內在的性質。同樣的，紫外線的光照也可以測量出玉米中各個部位的蛋白質含量。在玉米中測量蛋白質含量的方法，利用的是紫外分光光度法。紫外-可見分光光度法是在190～800nm波長范圍內測定物質的吸光度，用于鑒別、雜質檢查和定量測定的方法。紫外分光光度法是一種采用光束對于蛋白質濃度進行測量的一種方法，因為蛋白質對于光波的吸收程度不一樣，對比不同濃度下蛋白質對于光波的吸收程度，從而判斷出蛋白質的濃度。

三、對玉米中蛋白質含量測定結果的分析

玉米中含有豐富的、大量的蛋白質，通過以上幾種提取與測量濃度方法的分析發(fā)現(xiàn)，在玉米中不同部位，蛋白質含量是不同的，而要測量蛋白質的含量，就需要在實驗中針對不同玉米不同部位采用不同的方法進行測定。在實際實驗中，提取蛋白質的實驗可以多做幾組，通過應用不同的提取方法，或者實驗的變量可以改為是玉米中不同的部位。最終得出不一樣的結論。

四、小結

本文分析了幾種提取蛋白質與濃度測量的方法。在實際的實驗過程中，實驗者應當根據現(xiàn)場的自然環(huán)境確定采用何種方法，避免外界環(huán)境對蛋白質的結構性質產生影響，同時也要保證蛋白質的生物結構特性在提取、測量的過程中不會發(fā)生變化。本文針對玉米中含有的蛋白質含量進行了探究，首先探討了玉米中提取蛋白質的方法，主要有磷酸緩沖液法、Tris法、TCA-acetone法，這三種方法都是采用化學試劑完成的，因而在實驗中要注意試劑的配比與反應，另外，化學試劑在實際環(huán)境中具有一定特殊的性質，可能會發(fā)生揮發(fā)，也可能會發(fā)生氧化，因而要注重化學試劑的保存方法。其次，介紹了蛋白質含量的測定方法，即測量在玉米中含有多少蛋白質，應用的方法有Bradford和紫外分光光度法，對于測量方法的應用，研究者在實驗的過程中要充分考慮實驗環(huán)境的情況，確定采用哪種方法才是最為合適的，對測量結果進行最終的總結與分析。

參考文獻：

[1]張龍翔，張庭芳，李令媛.生化實驗方法和技術[M].北京：高等教育出版社，1981：164-169.