兩臺全自動血細胞分析儀新鮮血白細胞分類檢測結果直接比對的可行性分析

歐陽貴平，謝香萍，陳有華

（江西省贛州市南康區第一人民醫院檢驗科，江西 贛州 341400）

依據《醫療機構臨床實驗室管理辦法》要求實驗室內采用不同方法或儀器檢驗的同一項目，應進行一致性比較，定期實施比對（至少每年一次）[1]。我科嘗試采用兩臺血細胞分析儀白細胞分類檢測結果進行直接比對及兩臺儀器白細胞分類結果分別與人工鏡檢分類結果比對,對兩種方法的比對結果進行比較,分析采用兩臺血細胞分析儀白細胞分類檢測結果進行直接比對的可行性,并對兩臺儀器的白細胞分類結果數據的一致性進行分析，報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 日本Sysmex公司生產的Sysmex XN-10全自動血細胞分析儀和邁瑞公司生產的BC-5390全自動血細胞分析儀,兩臺儀器均使用原裝配套試劑、校準品和質控品；Sysmex XN-10全自動血細胞分析儀采用血涂片人工分類計數驗證白細胞分類計數結果的準確性,作為比對試驗的參比儀器；CH31奧林巴斯顯微鏡、BASO瑞氏－姬姆薩染色液。

1.2 實驗條件 兩臺儀器按各自廠家要求做好維護、保養,開機后空白測試,均在校準有效期內,測試結果符合廠家要求，確認儀器正常工作狀態，使用單項中值室內質控品在控的條件下進行檢測工作。

1.3 方法

1.3.1 儀器5種白細胞分類重復性（CV%）測定 將2份無脂濁、無黃疸、無溶血、兩臺儀器檢測沒有觸及我科人工復檢規則的新鮮EDTA-K2抗凝血(兩份血白細胞分類檢測結果相近)分別在兩臺儀器重復檢測11次，記錄2至11次結果，用于觀察儀器白細胞分類檢測結果的精密度。

1.3.2 比對試驗 選取無脂濁、無黃疸、無溶血、沒有觸及本科室人工分類規則的本院門診、住院、體檢新鮮血液分析標本30份(包含中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞及嗜堿性粒細胞分類百分比高、中、低值)在參比儀器Sysmex XN-10全自動血細胞分析儀全自動進樣模式重復3次檢測,在比對儀器BC-5390全自動血細胞分析儀上重復3次檢測，檢測試驗在2h內完成，記錄各參數檢測結果。將上述30份標本每份制作3張末梢血涂片，瑞氏－姬姆薩染色后由有經驗工作人員人工鏡檢白細胞分類計數,取3張涂片白細胞分類計數均值為靶值。

1.3.3 數據處理 采用Excel 2016軟件和SPSS 16.0進行數據處理，30份血標本3次白細胞人工分類結果平均值作為參比儀器的準確度驗證值和兩臺儀器比對的靶值、3次Sysmex XN-10全自動血細胞分析儀分類結果平均值作為參比儀器驗證測定值及兩臺儀器直接比對的靶值、3次BC-5390全自動血細胞分析儀分類結果平均值作為比對測定值。各分類結果依據靶值計算偏差（偏差＝測定值－靶值），計量資料用（x±s）表示，組間比較采用方差分析（ANOVA）、P＜0.05差異有統計學意義，檢驗結果的一致性采用線性回歸分析和回歸系數t檢驗，P＜0.05認為兩種結果存在線性回歸關系。

1.3.4 判斷標準 批內精密度采用國內學者蔣敘川[2]報告的白細胞分類批內精密度判斷標準見表1；以《全國臨床檢驗操作規程》第四版，對不同檢測項目的分析質量要求,確認參與比對的各檢測系統的不精密度均符合要求的前提下,可依據醫療機構醫師的臨床經驗提出的建議指標確定不同檢測項目的分析質量要求[1]，我科與本院臨床醫師共同探討,決定采用WS／T246-2005白細胞人類計數參考方法Rumke表95%可信區間[3]，作為本實驗室白細胞分類比對的判斷標準,中性粒細胞（N）、淋巴細胞（L）符合率≥90%，單核細胞（M）、嗜酸性粒細胞（E）符合率≥80%，嗜堿性粒細胞（B）符合率≥70%作為本實驗室比對的合格標準。

2 結果

2.1 兩臺儀器白細胞分類結果批內精密度CV%符合要求，見表1。

2.2 兩臺儀器白細胞分類結果直接比對及兩臺儀器分類結果與人工分類結果比對 五類白細胞在白細胞分類表對應的觀測值Rumke表的95%置信區間的符合率均達到本實驗室質量目標要求,30份新鮮血白細胞人工分類結果與兩臺儀器檢測結果符合率,符合率=符合例數/比對例數×100%,見表2。

2.3 30例樣本白細胞人工分類結果與兩臺全自動血細胞分析儀白細胞分類計數 三組結果方差分析差異無統計學意義（P＞0.05），見表 3。

2.4 兩臺儀器分類結果的一致性分析 兩種儀器檢測結果直線回歸及一致性分析 兩臺儀器檢測結果直接比對中性粒細胞（N）、淋巴細胞（L）、單核細胞（M）三種細胞分類結果相關系數（r）均大于0.99，除嗜堿性粒細胞（B）外，認為兩種儀器的檢測結果存在相關關系（P值均<0.05）；兩臺儀器與人工分類結果比對只有中性粒細胞 （N）、淋巴細胞（L）兩類細胞r＞0.96，兩種比對方法嗜堿性粒細胞（B）分類結果相關系數（r）值很小，三組檢測結果無相關關系（P<0.05）。 見表 4。

表1 兩臺血細胞分析儀各項參數的CV%

表2 30例樣本人工分類與兩臺血細胞分析儀白細胞分類計數結果比對符合率（%）

表3 30例樣本人工分類與兩臺全自動血細胞分析義白細胞分類計數結果（%，x±s）

3 討論

本實驗采用新鮮抗凝血評價兩臺儀器的批內精密度，XN-10血細胞分析儀五種白細胞分類的CV值均小于BC-5390血細胞分析儀，說明XN-10血細胞分析儀五種白細胞分類精密度較BC-5390高，兩臺儀器嗜堿性粒細胞（B）CV值均大于其它四種白細胞，這與嗜堿性粒細胞（B）外周血數量少且分布不均勻有關[2]。目前，國內各級臨床檢驗中心對白細胞分類結果的沒有建立室間質量評價系統,對于白細胞分類結果的比對大部分學者采用的是血液分析儀白細胞分類結果與作為金標準的傳統人工鏡檢分類結果比對[4-8]，也有部分學者采用血液分析儀白細胞分類結果與各種白細胞直接計數結果比對[9]，傳統的白細胞人工鏡檢分類和白細胞分類直接計數要經過大量手工操作，如：手工推片、固定染色、人工稀釋、充池、鏡檢等步驟，其操作復雜耗時長，工作效率低，常因人為因素造成誤差[10]。本實驗采用白細胞人工分類結果驗證的血細胞分析儀作為參比儀器,進行實驗室內不同儀器間白細胞檢測結果直接比對和一致性分析,因為血細胞分析儀只能起到篩查作用,對異常細胞的檢測能力存在缺陷,觸及復檢規則的標本,要人工復檢[11,12]。故本次試驗樣本只選擇沒有觸及復檢規則的標本,比對結果與兩臺儀器白細胞分類結果直接與人工分類結果比對基本一致，儀器間結果比對符合率、一致性均高于儀器結果與人工分類結果直接比對，這與儀器檢測細胞數多，分類計數原理比較接近,手工分類細胞計數少、精密度較低有關。此次比對試驗因為嗜堿性粒細胞（B）數量少，符合率較低，統計顯示三組結果之間均無線性相關，有文獻報道嗜堿性粒細胞 （B）＜5%不適用儀器與人工分類的比對試驗[13]。

綜上,兩臺全自動血細胞分析儀白細胞分類的測定結果直接比對能達到了解兩臺儀器間檢測結果一致性的要求，有提高比對效率、減輕檢驗人員工作量的優點,比對結果與儀器結果與人工分類直接比對基本一致,可以用較少的標本驗證參比儀器的準確度，加大兩臺儀器的直接比對樣本，可以節省工作量,比對結果能反映兩臺儀器測定結果的可比性，比對結果可靠。隨著各個品牌的全自動血細胞分析儀白細胞分類室內質控品[14]以及室內質控數據室間比對的應用[15]，白細胞分類結果儀器間直接比對值得進一步研究。

表4 人工分類與兩臺儀器檢測白細胞分類結果數據回歸分析