東莞南城區九項呼吸道病原體IgM抗體檢測結果分析

黃明蘭 ，彭致平 ，隋洪 ，劉安定

（1.東莞康華醫院檢驗科，廣東 東莞 523003；2.廣東醫科大學，廣東 東莞 523073）

常見的呼吸道感染，主要由細菌、病毒、支原體、衣原體、立克次體等病原體引起，呼吸道感染由不同的病原體侵襲所致[1]。患者的臨床癥狀有很大的相似度，引起上呼吸道感染、支氣管炎、毛細支氣管炎、肺炎、肺部感染、咳嗽、發熱等類似的臨床癥狀，在感染早期醫生只能夠憑經驗用藥，給臨床醫療工作者的診治活動帶來了極大的困擾，同時也會導致抗生素的濫用。在患者受到呼吸道病原體的感染后，1到3周內最先出現相關的特異性IgM抗體，相關的IgM抗體會存在人體血液內2～3個月的時間[2]。使用“九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒（間接免疫熒光法）”對常見的呼吸道病原體的特異性抗體進行聯合檢測,確定其感染的病原體，有助于醫生的針對性用藥，減少患者不必要的負擔與痛苦，給臨床疾病診斷提供依據。

為充分了解東莞南城區呼吸道病原體的感染情況及流行趨勢,統計2013年到2017年期間于我院就診的呼吸道感染患者,共計2019例，統計呼吸道患者中九項呼吸道病原體特異性IgM的檢出情況，為臨床診治提供參考性依據。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2013年1月-2017年12月于東莞康華醫院就診的2019例呼吸道感染的患者，男性1226例，女性793例，患者年齡1月～90歲，平均年齡（20.51±0.56）歲。根據就診患者的年齡進行如下分組，幼兒組≤1歲、兒童青少年組（＞1歲,≤18歲）、成人組（＞18 歲、≤60 歲）、老齡組（＞60 歲）

1.2 標本來源 抽取呼吸道感染的患者靜脈血4～5ml于紅色無抗凝劑的真空采血管中，靜置1h后，3000r/min離心10分鐘，取血清進行檢測。

1.3 方法

1.3.1 試劑、儀器的選擇 采用由鄭州安圖生物公司提供的 “九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒（間接免疫熒光法）”，生產地址：西班牙。儀器采用熒光顯微鏡OLYMPUS，型號CX31。

1.3.2 檢測原理 間接免疫熒光法（IFA）是在檢測板上包被有相對應的特異性抗原,待測樣品中的抗體與包被在檢測板上的抗原發生免疫特異性反應,未與抗原結合的非特異性抗體分子被洗滌緩沖液（PBS）除去。接下來，抗原-抗體免疫性復合物與熒光素標記的抗IgM發生免疫特異性反應,將熒光素（FITC）粘附在檢測板上。用免疫熒光顯微鏡觀察檢測板上相對應的孔位的熒光模型,得出對應的結果。

1.3.3 結果判斷 陽性結果：呼吸道合胞病毒(RSV),腺病毒（ADV），甲型流感病毒（INFA），副流感病毒1、2 和 3 型（PIVs）和乙型流感病毒（INFB）的測試孔位中有1%至5%細胞的細胞核、胞漿或胞膜呈現出綠色的熒光模型；嗜肺軍團菌（LP1），Q熱立克次體（COX），肺炎衣原體（CPn）的測試孔位中包被的菌體呈現出綠色的熒光模型;肺炎支原體測試孔位中呈現細胞外圍綠色的熒光模型。陰性結果：肺炎衣原體,嗜肺軍團菌和立克次體的檢測孔位無綠色熒光發出，甲型和乙型流感病毒，支原體，腺病毒,呼吸道合胞病毒和副流感病毒的檢測孔位的細胞發出紅色的熒光。10號位為質控孔位，發出紅色熒光。

1.3.4 數據處理 采用SPSS19.0軟件進行數據處理，計數資料以率或例數來表示。對于同一個體兩種以上的病原體感染,針對同一病原體采用重復計算。比較采用卡方檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 呼吸道感染病原體特異性IgM抗體檢測結果2013年至2017年共計2019例,共計有643例特異性IgM抗體陽性患者，772項IgM抗體陽性結果。九項呼吸道病原體的特異性IgM抗體總檢出率為31.85%（混合感染重復計算）。與相關文獻所報道的感染率相近[3]。 LP1 4.60%（93/2019），MP 22.10%（446/2019）,COX 0.15%（3/2019）,CP 1.09%（22/2019）,ADV 1.19%(24/2019),RSV 0.25%(5/2019),INFA 0.40% （8/2019），INFB 7.28% （147/2019），PIVs 1.19%(24/2019)，混合感染重復計算。結合數據分析，以肺炎支原體（MP）的感染率最高，乙型流感病毒次之，見圖1。

圖1 九項病原體特異性IgM抗體檢出情況

2.2 不同類型病原體感染的相關統計 在所檢測的共計有643例特異性IgM抗體陽性患者中混合感染(同一患者檢測出兩種及兩種以上的特異性Ig M抗體)總共有119例，混合感染的模式共有23種。其中，兩種病原體混合感染的模式有16種類型，三種病原體混合感染的模式有6種，四種病原體混合感染的模式有1種類型。病原體混合感染以肺炎支原體(MP)、乙型流感病毒(INFB)混合感染模式最高，共計52例，嗜肺軍團菌（LP1）和乙型流感病毒（INFB）混合感染次之,共計26例，肺炎支原體（MP）、副流感病毒 1、2 和 3 型（PIVs）混合感染8 例,肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CP）混合感染6 例，肺炎支原體（MP）、腺病毒（ADV）混合感染 4例。

2.3 呼吸道感染病原體的季節性分布 呼吸道病原體的傳播感染，會隨著季節的更替，呈現出一定的季節性變化的規律。先將該研究數據，依據感染的時間，劃分為四個組。春季（3月～5月）,夏季（6月～8 月），秋季（9 月～11 月），冬季（12 月～2 月），分別統計呼吸道病原體的感染率，見表1，采用卡方檢驗，得 χ2=60.99，χ20.05,1=7.81，P＜0.05；差異具有統計學意義；由表1可見，春季、夏季、秋季是呼吸道病原體感染的多發時間段,而冬季呼吸道病原體的傳播感染率較低。并將感染率最高的前三項病原體（LP1、MP、INFB），做出季節分布表,見表 2；由表2可見，肺炎支原體（MP）和嗜肺軍團1型（LP1）感染的高發時間段為春季（3月～5月），而乙型流感病毒(INFB)感染的高發時間段為夏季（6月～8月）。

表1 九項呼吸道病原體特異性IgM抗體檢出率隨季節變化規律

2.4 不同年齡組呼吸道病毒特異性IgM抗體檢出率 被檢測人群因處于不同的年齡階段，因免疫力的不同，對病原體的抵抗能力也截然不同。嬰幼兒（≤1歲）、兒童少年（＞1歲,≤18歲）的免疫系統正處于逐漸建立及完善的過程中，成年人（＞18歲，≤60歲）的免疫系統基本建立完全，對病原體的感染具有一定的抵抗力，老齡人（＞60歲）的體質下降。也隨著免疫力的下降,不同的人群對呼吸道病原體有著不同的抵抗力,在感染情況方面能夠體現出來,見表 3,采用卡方檢驗，得 χ2=123.78，χ20.05,1=7.81，P＜0.05為差異具有統計學意義。

表2 LP1、MP、INFB特異性IgM抗體檢出率隨季節變化規律

表3 九項呼吸道病原體特異性IgM抗體在不同年齡人群的檢出情況

2.5 不同臨床診斷呼吸道病毒特異性IgM抗體檢出率 呼吸道病原體,是能夠引起人類呼吸道系統疾病的病原體,有細菌、病毒、支原體、衣原體、立克次體等病原體，而以上是作為一個大類，若細分下去，則有更多的種類，在如此眾多的病原體的感染之下，用藥的方向、抗生素的選擇更是大相徑庭，但是呼吸道疾病的臨床表現卻大同小異主要引起上呼吸道感染、支氣管炎、毛細支氣管炎、肺炎、肺部感染、咳嗽、發熱等相似的臨床癥狀，在不同的臨床表現下,九項呼吸道病原體特異性IgM抗體的檢出情況也存在著應有的規律,現在將本研究的數據，依據不同的臨床表現分為支氣管炎、肺炎、肺部感染、呼吸道感染、發熱查因、血液病和其他，共計7個分組,見表4。采用卡方檢驗,得χ2=58.13，7.81，P＜0.05為差異具有統計學意義。

表4 九項呼吸道病原體特異性IgM抗體在不同臨床表現的檢出情況

3 討論

呼吸道是人直接與外界接觸的一個部分，而在自然界有無數種病原體能夠經空氣進入人體的呼吸道，在不同的情況下，能夠導致人體的呼吸道感染。不明原因發熱、咽炎、支氣管炎、喘息性支氣管炎、肺炎、肺部感染等都是呼吸道病原體感染的臨床表現,然而不同的臨床表現又隨著患者的年齡、免疫力、特殊體質、基礎性疾病等個人身體素質差異的不同而表現出不同的臨床特征,因而給臨床的診療帶來了極大的困擾。兒童免疫力低下，極易引發呼吸道感染,由于呼吸道感染的非典型病原體引起的臨床表現不典型,給臨床診斷和治療造成困難[4]。

引起呼吸道感染的危險因素多種多樣,若無明確的診斷極容易導致抗生素的濫用,給患者帶來不必要的痛苦和經濟負擔。因而使用正確檢查手段，得出明確的感染病原體是非常有必要的。肺炎支原體是介于細菌和病毒之間的已知能獨立生活的病原微生物中最小者,被認為是導致社區獲得性肺炎的第三位病原體[5]。現階段對于呼吸道病原的檢測有PCR法、病原體培養法、凝血試驗法、酶聯免疫吸附法(ELISA)。但不同的方法有各自的長短板。PCR法雖然敏感性高、但它的假陽性率也高，且試劑昂貴、檢測繁瑣,對檢測人員有較高的技術要求。支原體、衣原體培養法，流感病毒的凝血試驗等方法是鑒定的金標法，但培養時間過長[6]。現在使用的多數是間接免疫熒光法,檢測病原體特異性IgM抗體,該檢測方法具備高特異性：96.3%～100%、高靈敏性：85.7～100%（與另一商品化的IFA試劑盒對照）。檢測時間短（約3h）等優點，采用九項呼吸道病原體IgM抗體檢測試劑盒,更具有一份血清多項聯合檢測的優點，試劑較為便宜，適用于臨床的推廣。

呼吸道病原體的感染隨著季節的更替出現有一定的變化規律,春季和夏季是呼吸道病原體感染的高發期,呼吸道病原體IgM抗體的陽性率分別為36.49%、36.58%,高于秋季和冬季的33.06%、15.72%。相關文獻中，呼吸道病原體的高發期為秋季和冬季[7],該文獻報道的是成都地區的感染情況，與東莞南城區的氣候有較大的差異。故呼吸道病原體的流行與氣候相關，空氣不流通，高溫濕熱，是呼吸道病原體感染的高危因素。

本研究中,以肺炎支原體和乙型流感病毒最為常見，感染的人群年齡以兒童、青少年（>1歲，≤18歲）為主，感染率達46.49%。此年齡階段的人群免疫系統尚未完善,最容易受到呼吸道病原體的感染，與相關文獻報道相符[8]，若無相關的明確診斷，容易導致抗生素的濫用，憑醫生的經驗性用藥，對兒童、青少年的身體損害較大，采用該試劑盒進行明確診斷具有積極的臨床意義。而老齡組（＞60歲）的陽性率略低于成人組,是該研究分析老齡組人群的基數不夠，不具有代表性意義。

對不同臨床表現進行分析可得,呼吸道病原體IgM抗體陽性率前三的臨床診斷為上呼吸道感染、肺炎、支氣管炎,抗體陽性率分別為43.07%、37.83%、31.52%，故呼吸道病原體的感染是呼吸道疾病的高危因素。其中，對陽性患者的呼吸道病原體進行分類,以肺炎支原體(MP)和乙型流感病毒（INFB）為主。肺炎支原體，其大小介于細菌和病毒之間,是引起呼吸道感染的常見微生物[9]，乙型流感病毒為RNA病毒，容易發生變異，人群普遍對其缺乏免疫力，因此容易引起大流行[10],上述二者傳播途徑均是空氣飛沫傳播。故遠離人群密集區域，保持空氣流暢，對預防呼吸道病原體有積極地意義。

綜上可知,對呼吸道病原體的流行時間與易感人群的年齡段進行統計分析,可為呼吸道病原體的治療提供參考性依據。采用九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒,對呼吸道感染的患者進行檢測，有助于明確感染類型,為患者明確用藥方向，對患者的治療與康復有著積極的意義。