唐禎臻,范世珍,林 潔,于波海
(1.大連大學附屬中山醫(yī)院 檢驗科,遼寧 大連116001;2.廣州中醫(yī)藥大學深圳醫(yī)院,廣東 深圳518034)
尿路感染(UTI) 好發(fā)于各年齡段女性和老年男性患者,由各種病原菌感染引起,少量為真菌感染[1]。中段尿定量培養(yǎng)為實驗室診斷尿路感染的金標準,但是該法一般需要3-4 d才能獲得檢驗結(jié)果,存在一定的假陰性率,不利于尿路感染的快速早期診斷[2]。SysmexUF-1000i(簡稱UF-1000i)尿有形成分分析儀檢測細菌采用獨立通道,將細菌的核酸成分進行特異染色并抑制參雜物的非特異染色,對尿液中的細菌進行定量檢測,用于尿路感染的快速診斷和篩檢[3]。本研究對497例大連大學附屬中山醫(yī)院住院疑似尿路感染的患者尿標本進行UF-1000i尿有形成分檢測,并與定量中段尿細菌培養(yǎng)結(jié)果對比,旨在評估UF-1000i的細菌聯(lián)合白細胞檢測在UTI篩查中的應(yīng)用價值,為臨床提前預(yù)判診斷和治療UTI提供實驗依據(jù)。
1.1 一般資料選取2018年4月-2018年10月于我院住院疑似尿路感染的497例患者,清潔中段尿(或?qū)蚬芰裟?標本10 ml于無菌管中。其中男140例,平均年齡78.56歲;女357例,平均年齡68.11歲。無菌管中尿標本先進行尿細菌培養(yǎng)試驗,后迅速進行尿有形成分分析,從標本收集到完成接種及尿有形成分分析不得超過2 h。患者均有尿頻、尿急、尿痛等尿路感染癥狀。陽性標準為白細胞(WBC)計數(shù)>25個/μL和細菌(BACT)計數(shù)>380個/μL,并對陽性標本做進一步分析。
1.2 儀器與試劑日本Sysmex醫(yī)用電子有限公司生產(chǎn)的UF-1000i尿有形成分分析儀、配套試劑及質(zhì)控品。貝瑞特生物技術(shù)有限責任公司提供的血瓊脂培養(yǎng)基、沙保羅瓊脂培養(yǎng)基和顯色培養(yǎng)基。全自動微生物鑒定儀為西門子醫(yī)學診斷產(chǎn)品有限公司。
1.3 尿細菌培養(yǎng),菌種鑒定一般菌培養(yǎng)采用接種環(huán)取無菌試管中尿標本三區(qū)劃線血瓊脂培養(yǎng)基上。溫度為35℃培養(yǎng)18-24 h,肉眼觀察菌落并計數(shù)。革蘭陰性菌≥105cfu/ml,革蘭陽性菌≥104cfu/ml為尿定量細菌培養(yǎng)結(jié)果陽性,出現(xiàn)兩種以上雜菌生長,且沒有優(yōu)勢菌時則被判為混合污染。培養(yǎng)陽性結(jié)果的菌株用全自動微生物鑒定儀進行菌種鑒定。真菌培養(yǎng)采用接種環(huán)取尿標本密集劃線于沙保羅瓊脂培養(yǎng)基生長并于顯色培養(yǎng)基上鑒定。
1.4 UF-1000i尿有形成分分析將接種完成后的無菌試管尿液標本立即進行UF-1000i尿有形成分分析儀檢測,詳細記錄白細胞和細菌計數(shù)結(jié)果。結(jié)果以WBC計數(shù)>25個/μL和BACT計數(shù)>380個/μL的標本記為陽性。
1.5 統(tǒng)計學分析采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。繪制白細胞和細菌計數(shù)的ROC曲線,記錄診斷的cut off值,并計算診斷試驗各個相關(guān)評價指標。
2.1 住院患者尿細菌培養(yǎng)結(jié)果497例住院疑似尿路感染送檢尿標本培養(yǎng)結(jié)果陽性278例,陽性率為55.94%。其中,革蘭陰性桿菌168例(60.43%),革蘭陽性球菌65例(23.38%),真菌33例(11.87%)。病原菌分布以大腸埃希菌(33.81%)為首,其次依次為肺炎克雷伯桿菌(15.47%)、屎腸球菌(15.11%)和糞腸球菌(4.68%)等致病菌;真菌以白色假絲酵母(6.47%)和熱帶假絲酵母(3.60%)為主。見表1。

表1 278份住院尿液標本病原菌分布及構(gòu)成比﹝%﹞
2.2 UF-1000i WBC計數(shù)和BACT計數(shù)診斷住院患者尿路感染的ROC曲線下面積及cut off值以臨床診斷尿路感染中段尿定量培養(yǎng)為金標準將UF-1000i尿有形成分分析儀檢測所得WBC、BACT結(jié)果繪制ROC曲線。WBC和BACT診斷住院患者尿路感染ROC曲線下面積(AUC)分別為0.860(95%CI:0.810-0.901)和0.917(95%CI:0.875-0.948),見圖1。從SPSS輸出表中獲得WBC和BACT的cut off值分別為64個/μL和880.6個/μL。

圖1 WBC和BACT診斷住院患者尿路感染的ROC曲線圖
2.3 WBC計數(shù)和BACT計數(shù)診斷住院患者尿路感染的診斷性能評價以WBC 64個/μL和BACT 880.6個/μL為cut off值,計算兩者單獨診斷住院患者尿路感染的診斷性能和兩者聯(lián)合應(yīng)用的診斷性能指標。單獨應(yīng)用時細菌計數(shù)具有較好的敏感性和特異性。兩試驗并聯(lián)時敏感性為97.04%。兩試驗串聯(lián)時特異度為97.9%。見表2。

表2 WBC和BACT計數(shù)診斷住院患者尿路感染的診斷性能評價
UF-1000i尿有形成分分析儀不僅能定量檢測出尿中白細胞數(shù)量,還能精準檢測出細菌數(shù)量。但其不能區(qū)分活菌與死菌,可能將其他有形成分如氣泡、灰塵、結(jié)晶、脂肪等誤認為細菌,導致結(jié)果假陽性[4]。如標本采集不合格有污染菌、放置時間過長細菌生長或采樣前患者已使用過抗菌藥物等,都會影響尿培養(yǎng)結(jié)果的陽性率。尿液定量培養(yǎng)方法通常使用普通營養(yǎng)瓊脂,其只能檢出腸桿菌屬和厚壁菌科的細菌,需氧菌和特殊營養(yǎng)的細菌不能在此培養(yǎng)基中發(fā)育[5,6]。白細胞作為診斷指標時,腫脹、破裂或聚集成團的白細胞易被儀器誤認為其他成分,若尿液中白細胞吸附在黏液絲上,易造成漏檢[7]。
本研究住院患者定量尿細菌培養(yǎng)結(jié)果陽性率為55.94%,大腸埃希菌33.81%、腸球菌19.79%(包括屎腸球菌和糞腸球菌)和肺炎克雷伯桿菌15.47%是尿路感染最常見的致病菌[8];真菌以白色假絲酵母為主,感染率增加[9],跟文獻報道相符。UF-1000i尿有形成分分析儀檢測住院患者尿液WBC計數(shù)和BACT計數(shù)ROC曲線下面積分別為0.860(95%CI:0.810-0.901)和0.917(95%CI:0.875-0.948),說明WBC計數(shù)和BACT計數(shù)在住院患者尿路感染診斷中具有較高的診斷價值。該診斷試驗通過ROC曲線所建的cut off值分別為WBC計數(shù)>64個/μL和BACT計數(shù)>880.6個/μL。單獨應(yīng)用于診斷時細菌計數(shù)的診斷效能高于白細胞計數(shù)。本研究中WBC計數(shù)的cut off值與文獻報道的WBC計數(shù)>68.5個/μL相符;但盧麗萍等研究得出門診及住院所有患者的BACT計數(shù)的cut off值為532.7個/μL,本研究中BACT計數(shù)的cut off值則高于文獻報道[10]。這種差異可能與實驗納入的人群不同相關(guān)。本研究針對的是住院疑似尿路感染患者,住院患者的BACT計數(shù)高于門診患者;同時患者病情復雜多樣,常伴有基礎(chǔ)病,平均年齡偏高,抵抗力低容易受到病原菌入侵生長、增殖并發(fā)生感染,所以BACT計數(shù)會高一些。同時盧麗萍等研究又得出門診及住院女性患者的BACT計數(shù)的cut off值為863.1個/μL,與本研究以女性患者71.83%(357/497)為主,BACT計數(shù)的cut off值相符。
綜上所述,UF-1000i尿有形成分分析儀能夠快速檢測出患者尿液中WBC計數(shù)和細菌計數(shù)等信息,兩者可用于聯(lián)合分析尿路感染,預(yù)先給藥治療,減輕患者痛苦和縮短病程,具有一定的臨床應(yīng)用價值,為臨床初步診斷及排除UTI提供可靠的依據(jù)。