COVID-19患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化的觀察研究

高海鋒，喬 芬

自2019年12月以來，武漢爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎(corona virus disease 2019， COVID-19)引起全球各界人士的極度關(guān)注。截至2020年2月21日11點(diǎn)已確診COVID-19患者75 567例，死亡2239例(數(shù)據(jù)來源于國家衛(wèi)生健康委員會(huì)官網(wǎng))。而目前對(duì)新型冠狀病毒(2019-novel coronavirus, 2019-nCoV)生物學(xué)特性的認(rèn)知并不清楚[1]，面對(duì)疫情我們只能按傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行防護(hù)、作業(yè)、處置。目前流行病學(xué)調(diào)查顯示，2019-nCoV具有傳染性強(qiáng)、致死率高、臨床癥狀不典型等特點(diǎn)[2-4]，故患者早期治愈率高，而重癥患者預(yù)后差甚至導(dǎo)致死亡。因此，早診斷、早隔離、早治療是提高本病治愈率、減少人群傳染、降低病死率的必要舉措。本研究旨在對(duì)COVID-19患者相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)進(jìn)行研究，以期為COVID-19患者的早期診斷及預(yù)后判斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020年1—2月寶雞市中心醫(yī)院感染科確診的13例COVID-19患者為研究對(duì)象，均符合《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第六版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男7例，女6例；年齡27～71(49.54±10.85)歲；均為輕型患者；治療7～20 d，均好轉(zhuǎn)。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集：將拭子放入0.9%氯化鈉注射液中濕潤(rùn)，用拭子估測(cè)鼻孔到耳根的距離并用手指做標(biāo)記，將拭子以垂直面部方向插入鼻孔，直至手指觸及鼻子，使拭子在鼻孔內(nèi)停留15～30 s，然后擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁3～5次，將拭子頭浸入含3 ml病毒保存液的病毒采樣管中，旋緊管蓋并做好標(biāo)記，迅速放入塑料密閉袋，用75%酒精或含有效氯消毒液噴灑密閉袋外表面后立即送檢。

1.2.2 標(biāo)本儲(chǔ)存及轉(zhuǎn)運(yùn)：樣本采集后室溫放置不超過4 h，2～8℃放置不超過72 h，超過72 h時(shí)應(yīng)保存在-70℃環(huán)境中。樣本運(yùn)輸時(shí)需放入專用的轉(zhuǎn)移箱中，同時(shí)要攜帶75%酒精或含有效氯消毒液，以便發(fā)生意外時(shí)能及時(shí)處理。

1.2.3 標(biāo)本檢測(cè)：采集患者治療前后血樣分別檢測(cè)血常規(guī)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、生化指標(biāo)、傳染病八項(xiàng)、凝血指標(biāo)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、淀粉樣蛋白A(SAA)、N末端B型腦鈉肽前體(NT-proBNP)等指標(biāo)，同時(shí)檢測(cè)患者尿便常規(guī)。2019-nCoV檢測(cè)采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，結(jié)果判定按試劑說明書執(zhí)行。2019-nCoV核酸檢測(cè)試劑盒由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供，檢測(cè)結(jié)果陽性時(shí)送至寶雞市疾病預(yù)防控制中心復(fù)核后確認(rèn)。

2 結(jié)果

2.1 治療前后實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化 治療前，13例白細(xì)胞總數(shù)(WBC)正常或減低，多數(shù)患者出現(xiàn)CRP、ESR、SAA、CD8+ T淋巴細(xì)胞比率升高，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(LYMP)、CD4+ T淋巴細(xì)胞比率降低；少部分患者出現(xiàn)肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、α羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、肌紅蛋白(Mb)、IL-6、NT-proBNP升高，血小板(PLT)降低；部分患者便潛血試驗(yàn)陽性。參照COVID-19國家指南所規(guī)定的出院標(biāo)準(zhǔn)，即患者體溫恢復(fù)正常3 d以上，呼吸道癥狀明顯好轉(zhuǎn)，連續(xù)兩次呼吸道病原核酸檢測(cè)陰性(采樣間隔至少1 d)，再次檢測(cè)WBC、PLT、CRP、CK、LDH、α-HBDH、DBIL、IL-6、SAA、NT-proBNP、便潛血試驗(yàn)均恢復(fù)正常。本結(jié)果顯示，治療前后WBC、PLT、CRP、ESR、CK、α-HBDH、IL-6、SAA、Mb水平存在明顯差異(P<0.05或P<0.01)，而其他指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 13例新型冠狀病毒肺炎治療前后實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化

注：WBC為白細(xì)胞總數(shù)，LYMP為淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，PLT為血小板,CRP為C反應(yīng)蛋白，ESR為紅細(xì)胞沉降率，CK為肌酸激酶，LDH為乳酸脫氫酶，α-HBDH為α羥丁酸脫氫酶，ALT為丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶，AST為天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶，TBIL為總膽紅素，DBIL為直接膽紅素，IL-6為白細(xì)胞介素6，SAA為淀粉樣蛋白A，Mb為肌紅蛋白，NT-proBNP為N末端B型腦鈉肽前體

2.2 治療前后實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)異常率比較 本結(jié)果表明，WBC、LYMP、PLT、CRP、ESR、CK、α-HBDH、DBIL、IL-6、SAA、便潛血試驗(yàn)異常率治療前后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)，而治療前后其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)異常率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 13例新型冠狀病毒肺炎治療前后實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)異常情況比較[例(%)]

注：WBC為白細(xì)胞總數(shù)，LYMP為淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，PLT為血小板,CRP為C反應(yīng)蛋白，ESR為紅細(xì)胞沉降率，CK為肌酸激酶，LDH為乳酸脫氫酶，α-HBDH為α羥丁酸脫氫酶，ALT為丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶，AST為天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶，TBIL為總膽紅素，DBIL為直接膽紅素，IL-6為白細(xì)胞介素6，SAA為淀粉樣蛋白A，Mb為肌紅蛋白，NT-proBNP為N末端B型腦鈉肽前體，OB為便潛血試驗(yàn)。因醫(yī)囑原因，OB有3例未檢測(cè)；因流式細(xì)胞檢測(cè)為開蓋操作，考慮生物安全及傳染性因素，僅檢測(cè)3例后立即停止檢測(cè)；NA：not available；“-”表示無

3 討論

自2019年12月以來，湖北武漢發(fā)生不明原因肺炎，研究證實(shí)該病毒是一種冠狀病毒，系單股正鏈RNA病毒，后經(jīng)WHO確認(rèn)，將該病毒命名為2019-nCoV，其與急性嚴(yán)重呼吸綜合征冠狀病毒的一致性為79.5%，與一種蝙蝠冠狀病毒的一致性高達(dá)96%[5]。流行病學(xué)研究顯示，COVID-19主要傳染源是確診患者和無癥狀攜帶者，經(jīng)呼吸道或密切接觸傳播[6-7]，可在短時(shí)間內(nèi)迅速傳播，無防護(hù)條件下人際間傳播效率高[8]。但也有報(bào)道顯示，氣溶膠和消化道傳播也有可能[9]。COVID-19呈輸入性、社區(qū)化、聚集性趨勢(shì)，多數(shù)患者為中輕癥狀，預(yù)后良好，少數(shù)患者病情危重甚至導(dǎo)致死亡[10]。目前雖然疫情有所控制，但是確診病例和病亡人數(shù)仍在遞增。

本研究收集我院確診的13例COVID-19患者病歷資料，發(fā)現(xiàn)所有患者均屬輸入性病例和聚集感染病例，其中50歲以上中老年感染者7例，占確診患者總數(shù)的53.85%，這與中國疾病預(yù)防控制中心新型冠狀病毒肺炎應(yīng)急響應(yīng)機(jī)制流行病學(xué)組調(diào)查的53.6%的感染率相近[11]，表明本地區(qū)人群發(fā)病率符合國家發(fā)病人群的總體分布。本研究對(duì)13例治療前后實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化進(jìn)行觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)WBC、PLT、CRP、ESR、CK、α-HBDH、IL-6、SAA、Mb水平存在明顯差異，而其他指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示治療期間可持續(xù)觀察WBC、PLT、CRP、ESR、CK、α-HBDH、IL-6、SAA、Mb這9項(xiàng)指標(biāo)的變化，用來評(píng)估治療有效性和患者的恢復(fù)情況。

根據(jù)診療方案[9](后簡(jiǎn)稱“方案”)中有關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查的描述，發(fā)病早期外周血WBC正常或減少，LYMP減低，本研究發(fā)現(xiàn)治療前患者WBC正常8例，減低5例，LYMP減低10例，符合“方案”中的描述。此外，13例中ALT升高4例、AST升高3例、TBIL升高5例、DBIL升高5例，LDH升高2例、CK升高4例、α-HBDH升高4例、Mb升高3例，符合“方案”所述“可出現(xiàn)肝酶、LDH、肌酶和Mb升高”，但未發(fā)現(xiàn)肌鈣蛋白升高的病例；CRP 8例升高、ESR 11例升高，符合“方案”所述“多數(shù)患者CRP和ESR升高”。除與“方案”描述一致外，本研究發(fā)現(xiàn)SAA升高11例，其陽性率大于CRP的陽性率，表明作為早期炎性指標(biāo)，SAA診斷COVID-19的效能優(yōu)于CRP，故建議將SAA納入實(shí)驗(yàn)室檢查診斷指標(biāo)，以提高診斷敏感度。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)確診患者CD4+ T淋巴細(xì)胞比率減低，CD8+ T淋巴細(xì)胞比率升高，表明在疾病早期，病毒侵犯人體T淋巴細(xì)胞，使機(jī)體細(xì)胞免疫系統(tǒng)遭受損傷，引起CD4數(shù)量減少，而CD8數(shù)量相對(duì)增多。本研究發(fā)現(xiàn)，10例便潛血試驗(yàn)檢測(cè)中4例陽性，提示該病毒可能侵犯腸道上皮細(xì)胞引起腸黏膜損傷導(dǎo)致出血，但需通過糞便中2019-nCoV分離鑒定或腸道上皮細(xì)胞活檢來證實(shí)確鑿與否。通過比較治療前后結(jié)果發(fā)現(xiàn)，本組WBC、LYMP、PLT、CRP、ESR、CK、α-HBDH、DBIL、IL-6、SAA、便潛血試驗(yàn)異常率在治療前后存在顯著差異，而其他指標(biāo)異常率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此，可將WBC、LYMP、PLT、CRP、ESR、CK、α-HBDH、DBIL、IL-6、SAA、便潛血試驗(yàn)這11項(xiàng)指標(biāo)納入實(shí)驗(yàn)室檢查診斷指標(biāo)，從而為COVID-19的早期診斷及輔助診斷提供更準(zhǔn)確、更可靠的依據(jù)。

綜上，對(duì)于COVID-19患者，要減輕患者痛苦、降低感染率和病死率，必須做到早診斷、早隔離、早治療。而選擇合適的早期診斷指標(biāo)、監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估指標(biāo)至關(guān)重要。由于本研究病例數(shù)較少，可能在研究結(jié)果方面存在偏差，在后續(xù)研究中，我們將聯(lián)合相鄰市區(qū)醫(yī)療機(jī)構(gòu)共同研究，增加樣本量以取得更準(zhǔn)確的研究結(jié)果。