利尿合劑抗感染作用的實驗分析

陳向英　孫冬梅　楊志華

【摘要】 目的：分析利尿合劑對尿路感染（UTI）大鼠的抗感染作用。方法：制備100只大鼠UTI模型，按隨機數字表分為模型組、陽性治療組、高劑量組、中劑量組及低劑量組，各20只;另取20只正常大鼠為對照組。模型組與對照組均給予0.9%氯化鈉溶液;陽性治療組給予左氧氟沙星治療;高劑量組以18.0 g/kg利尿合劑治療;中劑量組以9.0 g/kg利尿合劑治療;低劑量組以4.5 g/kg利尿合劑治療。比較六組腎臟及膀胱菌落計數及炎癥反應情況。結果：治療2、4 d后，模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組的腎臟及膀胱菌落計數與炎癥反應評分均高于對照組（P<0.05）。治療4 d后，高劑量組腎臟及膀胱菌落計數與炎癥反應評分與對照組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）;治療2、4 d后高劑量組腎臟及膀胱菌落計數與炎癥反應評分均低于模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組（P<0.05）。結論：高劑量利尿合劑對UTI大鼠的抗感染作用較好，可控制腎臟及膀胱的炎癥反應。

【關鍵詞】 利尿合劑 尿路感染 腎臟及膀胱菌落計數

Experimental Analysis on the Anti-infection Effect of Diuretic Mixture/CHEN Xiangying， SUN Dongmei， YANG Zhihua. //Medical Innovation of China， 2020， 17（09）： 0-035

[Abstract] Objective： To analyze the anti-infection effect of Diuretic Mixture on urinary tract infection （UTI） rats. Method： A total of 100 rat models of UTI were prepared and divided into model group， positive treatment group， high dose group， medium dose group and low dose group， 20 rats in each group. Another 20 normal rats were selected as the control group. The model group and control group were given 0.9% Sodium Chloride Solution. The positive treatment group was treated with Levofloxacin. The high dose group was treated with a Diuretic Mixture of 18.0 g/kg. The medium dose group was treated with 9.0 g/kg Diuretic Mixture. The low dose group was treated with Diuretic Mixture 4.5 g/kg. The colony counts and inflammatory reaction of kidney and bladder in six groups were compared. Result： After 2 and 4 d of treatment， the colony counts and inflammatory reaction scores of kidney and bladder in the model group， the positive treatment group， the medium dose group and the low dose group were all higher than those of the control group （P<0.05）. After 4 d of treatment， there were no statistically significant differences in the colony counts and inflammatory reaction scores of kidney and bladder between the high dose group and the control group （P>0.05）. After 2 and 4 d of treatment， the colony counts and inflammatory reaction scores of kidney and bladder in the high dose group were lower than those of the model group， the positive treatment group， the medium dose group and the low dose group （P<0.05）. Conclusion： The anti-infection effect of Diuretic Mixture for the UTI rats is better， it can control the inflammation of kidney and bladder.

[Key words] Diuretic Mixture Urinary tract infection Colony count of kidney and bladder

First-authors address： TCM Hospital of Zhongshan City in Guangdong Province， Zhongshan 528400， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.09.008

泌尿系感染在我國臨床極為常見，具有極高的發病率。而本類感染疾病的臨床危害不容小覷，嚴重者可導致腎間質病變，進而對機體造成進一步的損傷。臨床中對于本類疾病多采用抗菌藥物進行治療，效果較受肯定的同時，療效的提升空間仍較大。近年來以中西醫結合及中醫藥治療尿路感染（UTI）的研究不斷增多，且大多具有良好的臨床效果，其中利尿合劑是本院的自制中藥制劑（批文：粵ZB20110564），主要由白花蛇舌草、海金沙、葉下珠、紫珠草、一點紅組成，具有清熱祛濕及解毒通淋作用的作用，其在抗感染方面的作用仍有待進一步探究[1-2]。因此本研究就利尿合劑的抗感染作用進行實驗研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 制備100只大鼠尿路感染（UTI）模型，納入標準：體重200～250 g;12周齡的大鼠;意識精神正常的大鼠。排除標準：畸形大鼠;非健康大鼠。按隨機數字表法分為模型組、陽性治療組、高劑量組、中劑量組及低劑量組，各20只，另取20只正常大鼠為正常對照組。

1.2 方法 （1）UTI大鼠制備方法。大鼠禁水24 h后進行麻醉，并排盡剩余尿液，以酒精進行尿道周圍的消毒，以靜脈留置針套管插入尿道，以大腸桿菌液0.75 mL注入，注射完畢后夾閉尿道口，20 s后松開，并繼續禁水4 h后，方開始正常飲食[3]。對照組大鼠于膀胱內注入0.75 mL滅菌0.9%氯化鈉溶液。（2）給藥方法。對照組與模型組以0.9%氯化鈉溶液2.0 mL灌胃。陽性治療組以0.5 g/kg左氧氟沙星（生產廠家：河南藍圖制藥有限公司，批準文號：國藥準字H20064495，規格：0.2 g）進行灌胃治療。高劑量組以18.0 g/kg利尿合劑進行灌胃治療。中劑量組以9.0 g/kg利尿合劑進行灌胃治療。低劑量組以4.5 g/kg利尿合劑進行灌胃治療。均治療4 d。

1.3 觀察指標與判定標準 治療2、4 d后比較六組腎臟、膀胱菌落計數及炎癥反應情況。六組于治療2、4 d后各處死10只。處死大鼠后，于無菌條件下分離膀胱及腎臟，并進行稱重，然后分別稱取一半，加入0.9%氯化鈉溶液，制備滅菌0.9%氯化鈉溶液勻漿，取50 μL于瓊脂平皿培養基進行培養，置于37 ℃培養箱內進行培養，并于24 h進行菌落計數，以每毫克培養出的菌落數進行計數。另取大鼠剩余的一半腎臟及膀胱組織進行組織學檢測，首先以福爾馬林進行固定，進行石蠟包埋切片，并進行HE染色，然后由兩名經驗豐富者于光學顯微鏡下進行腎臟及膀胱炎癥反應的觀察。腎臟及膀胱炎癥反應評估：其中腎臟及膀胱的組織結構正常為0分;腎臟黏膜及間質、膀胱組織中存在少量炎性細胞浸潤的情況為1分;腎臟黏膜及間質、膀胱組織中存在較多炎性細胞浸潤的情況，且膀胱存在輕度血管擴張充血的情況為2分;以腎臟黏膜及間質、膀胱組織中存在大量炎性細胞浸潤的情況，且伴隨纖維化的情況為3分[4]。

1.4 統計學處理 采用SPSS 23.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，重復測量資料采用方差分析;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 六組一般資料比較 模型組雌性11只，雄性9只;體重201.5～238.7 g，平均（222.3±10.1）g。

陽性治療組雌性10只，雄性10只;體重202.1～239.1 g，平均（223.1±9.9）g。高劑量組雌性11只，雄性9只;體重200.9～239.7 g，平均（222.7±10.6）g。中劑量組雌性10只，雄性10只，體重201.7～238.8 g，平均（222.9±9.7）g。低劑量組雌性10只，雄性大鼠10只，體重201.6～240.0 g，平均（223.0±10.3）g。對照組雌性10只，雄性

10只，體重201.9～239.9 g，平均（223.1±10.1）g。六組一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 六組治療2 d后腎臟及膀胱菌落計數比較 治療2 d后，模型組、陽性治療組、高劑量組、中劑量組及低劑量組的腎臟及膀胱菌落計數均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療2 d后，高劑量組腎臟及膀胱菌落計數均低于模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表1。

注：（1）與對照組腎臟、膀胱菌落計數比較，t模型組=18.930、18.028，P模型組=0.000、0.000;t陽性治療組=16.046、18.542，P陽性治療組=0.000、0.000;t低劑量組=16.019、18.312，P低劑量組=0.000、0.000;t中劑量組=14.164、14.897，P中劑量組=0.000、0.000;t高劑量組=13.011、4.134，P高劑量組=0.000、0.001。（2）與高劑量組腎臟、膀胱菌落計數比較，t模型組=16.288、17.670，P模型組=0.000、0.000;t陽性治療組=12.992、18.004，P陽性治療組=0.000、0.000;t低劑量組=12.868、17.678，P低劑量組=0.000、0.000;t中劑量組=9.492、12.040，P中劑量組=0.000、0.000。

2.3 六組治療4 d腎臟及膀胱菌落計數比較 治療4 d后，模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組的腎臟及膀胱菌落計數均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）;但是高劑量組的腎臟及膀胱菌落計數與對照組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。治療4 d后，高劑量組的腎臟及膀胱菌落計數均低于模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組，差異均有統計學意義（P<0.05）。

見表2。

2.4 六組治療后2 d腎臟及膀胱炎癥反應情況比

較 治療2 d后，模型組、陽性治療組、高劑量組、中劑量組及利尿合劑低劑量組的腎臟及膀胱炎癥反應評分均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療2 d后，高劑量組腎臟及膀胱炎癥反應評分均低于模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表3。

2.5 六組治療4 d后腎臟及膀胱炎癥反應情況比

較 治療4 d后，模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組腎臟及膀胱炎癥反應評分均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），而高劑量組腎臟及膀胱炎癥反應評分與對照組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）;治療后4 d，高劑量組腎臟及膀胱炎癥反應均低于模型組、陽性治療組、中劑量組及低劑量組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表4。

3 討論

泌尿系感染對患者泌尿系統的危害極為突出，是導致慢性腎衰的第二位因素，因此臨床受重視程度較高，與之相關的診治研究顯示，本類患者的治療主要以西醫抗生素為主，而本類治療方案在治療的同時，多存在一定的不良反應[5-7]。中醫治療泌尿系感染的研究不斷增多，對于泌尿系感染的控制作用較好的同時，減少了抗生素等導致的不良反應[8-10]。利尿合劑作為由葉下珠及白花蛇舌草等中草藥組成的合劑，其具有較好的清熱祛濕及解毒通淋等功效，對于泌尿系疾病的治療作用具有針對性，但是對于泌尿系的抗感染作用研究仍相對缺乏，因此本方面的探究空間仍較大[11-13]。另外，膀胱及腎臟的炎性反應程度可有效反應泌尿系感染情況的重要方面，其在泌尿系感染大鼠實驗中的檢測具有針對性[14-16]。

本研究就利尿合劑對UTI大鼠的抗感染作用進行研究與分析，結果顯示，利尿合劑高劑量治療的大鼠腎臟及膀胱菌落計數、炎癥反應情況均控制較好，均明顯優于低、中劑量利尿合劑及西藥治療，說明較大劑量的利尿合劑對于大鼠的泌尿系感染具有積極的控制作用，利尿合劑與西藥治療后的腎臟及膀胱菌落計數、炎癥反應情況均優于未治療者，但高劑量利尿合劑治療效果相對更好，進而肯定了利尿合劑的應用效果與價值。這可能與利尿合劑中的葉下珠、白花蛇舌草、金沙藤及紫珠葉等藥物合用起到的清熱解毒，利水通淋等功效有關，且用藥安全性較高，達到了預期的控制腎臟及膀胱炎癥反應的目的，保證療效的同時，安全性也值得肯定[17-23]。

綜上所述，利尿合劑對尿路感染大鼠的抗感染作用較好，對于腎臟及膀胱的炎癥反應具有較好的控制作用。

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（收稿日期：2019-10-12） （本文編輯：田婧）

*基金項目：中山市醫療衛生科研項目（2017A020042）