一種保健功能青紅酒30天喂養試驗研究

朱賁峰 趙 立 闞永軍 胡 娟,2

1. 福建省中醫藥研究院，福建 福州 350003；2. 福建中醫藥大學附屬第二人民醫院，福建 福州 350003

藥酒在我國有著悠久的歷史，以酒為載體，利用酒的辛溫行散之性，以達到通經活絡、暢通血脈、活血散瘀、祛風散寒、健脾胃、提精神，以達引藥上行、助藥物之力的功效。保健酒不同于藥酒，其特點以健體、養生為目的，在滿足消費者嗜好的同時對身體狀態進行調節。藥酒用于對疾病的治療，而保健酒則重在對疾病的預防[1]。

以米粉、米糠、白粉土為基礎配方，加入茯苓、當歸、白芷、丁香、柴胡、藿香等數十味中藥制成藥白曲，并與黃精共同發酵，研制一款黃精青紅酒。其富含粗多糖和總黃酮等功效成分[2]，具有緩解體力疲勞[3]、輔助降血糖之功效。

本文依據保健食品檢驗與評價技術規范，進行30天喂養試驗，通過檢測白細胞計數、紅細胞計數、血紅蛋白、中性粒細胞等血液學指標，觀察黃精青紅酒對大鼠造血系統和功能的影響；通過檢測轉氨酶、白蛋白、尿素氮、肌酐、血脂、血糖等血液生化指標，觀察黃精青紅酒對大鼠肝、腎損傷及代謝系統的影響。對產品進行安全性評價[4]。

1 材料和方法

1.1 樣品 黃精青紅酒，棕黃色液體，澄清透明、無肉眼可見的雜質、久置后允許有少量沉淀物，成品酒精濃度(14±1)% vol。樣品常溫保存，樣品標示保質期24個月，成人人體推薦劑量100 mL/人/日(以60 kg體重計)，因人體推薦劑量大，本實驗室使用為60℃減壓濃縮方法，將受試樣品濃縮為15倍濃縮液作為本次實驗受試樣品，折算成成人人體推薦劑量為6.67 mL/人/日。

1.2 實驗動物 SPF離乳SD大鼠80只，雌雄各半。按體重隨機分為對照組、高、中、低劑量共4組，每組20只，雌、雄各半。雌性動物初始體重為70～85 g；雄性動物初始體重為74～90 g。

1.3 劑量選擇與受試物給予方式 設3.33、7.23、11.12 mL/(kg·bw)(低、中、高)三個劑量組，分別相當于人體推薦劑量的30、65、100倍。另設一個溶劑對照為0 mL/kg·bw。15倍濃縮液用50%(v/v)的酒基配制，調整各劑量組乙醇濃度最終為15%(v/v)。高劑量組用15倍濃縮液11.12 mL+50%(v/v)的酒基6 mL+無菌水2.88 mL，中劑量組用15倍濃縮液7.23 mL+50%(v/v)的酒基6 mL+無菌水6.77 mL，低劑量組用15倍濃縮液3.33 mL+50%(v/v)的酒基6 mL+無菌水10.67 mL，溶劑對照組用50%(v/v)的酒基6 mL+無菌水14 mL，灌胃量為20 mL/ (kg·bw)。

1.4 主要儀器 電子天平、離心機、全自動生化分析儀、血液分析儀等。

2 試驗方法

各組動物給予基礎飼料，供試品連續灌胃30天后，禁食隔夜，逐只稱重，10%水合氯醛按3.5 mL/(kg·bw)腹腔注射麻醉，腹主動脈取血測其血液學指標和血液生化指標。

2.1 一般情況觀察 每天觀察并記錄動物的一般表現、行為、中毒表現和死亡情況。

2.2 體重 每周稱1次體重，觀察每周體重變化情況。

2.3 血液學指標 取大鼠全血用血液分析儀測定其血紅蛋白含量、紅細胞計數、白細胞計數及其分類等。

2.4 血液生化指標 取大鼠血清，用全自動生化分析儀測定血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、總蛋白、白蛋白、總膽固醇、尿素氮、肌酐、血糖、甘油三酯等。

2.5 統計分析 用SPSS軟件對各實驗原始數據進行統計分析。各項指標進行方差齊性檢驗，不滿足方差齊要求，用秩和檢驗進行統計處理；用單因素方差分析方法中多個試驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理，P﹤0.05差異有統計學意義。

3 結果與討論

3.1 一般觀察 各組動物一般表現和行為均未見明顯異常、無中毒表現、無死亡。

3.2 黃精青紅酒對大鼠體重的影響 雌、雄性大鼠第0天體重各劑量組與0 mL/(kg·bw)/d組比較，差異無統計學意義(P>0.05)，即試驗前大鼠的體重在各組間較為均衡。

3.3 黃精青紅酒對大鼠血液學指標的影響 大鼠灌胃不同劑量的黃精青紅酒30天，測定血液紅細胞計數、血紅蛋白水平、白細胞計數及其分類等指標。各項指標進行方差齊性檢驗，均滿足方差齊要求，用單因素方差分析方法中多個試驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表1、表2可見，各項指標各劑量組與空白對照組比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。

性別劑量/[mL/(kg·bw)/d]動物數/只白細胞計數/×109/L紅細胞計數/×1012/L血紅蛋白/g/L雌0107.0±1.87.1±0.4138±53.33108.1±1.17.1±0.4142±77.23107.6±1.37.2±0.3137±511.12108.2±1.47.2±0.3140±7雄0109.0±1.27.4±0.2147±53.33108.6±1.57.4±0.3150±47.23107.4±3.17.5±0.3150±511.12109.9±2.37.2±0.3146±4

性別劑量/[mL/(kg·bw)/d]動物數/只淋巴細胞/%中性細胞/%單核細胞/%嗜酸性細胞/%嗜堿性細胞/%雌01085.3±3.010.6±2.93.0±0.60.5±0.20.2±0.13.331085.3±2.910.5±2.93.0±0.70.6±0.10.1±0.17.231086.4±2.510.0±2.82.5±0.80.4±0.20.1±0.111.121087.3±2.68.5±2.12.8±0.90.6±0.20.1±0.1雄01085.3±3.210.5±2.52.9±0.80.6±0.20.2±0.13.331084.7±3.110.9±2.63.2±1.30.5±0.10.2±0.17.231084.2±8.711.4±7.83.0±1.20.6±0.20.2±0.411.121083.9±4.011.8±3.32.8±1.00.7±0.70.2±0.1

3.4 黃精青紅酒對大鼠血液生化指標的影響 大鼠灌胃不同劑量的黃精青紅酒30天，測定血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、總蛋白、白蛋白、總膽固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐及血糖的水平。各項指標進行方差齊性檢驗，雌性大鼠谷草轉氨酶不滿足方差齊要求，用秩和檢驗進行統計處理；其它指標均滿足方差齊要求，用單因素方差分析方法中多個試驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理。由表3、表4可見，雄性大鼠7.23 mL/kg·bw/d組總膽固醇低于空白對照組 (P<0.05)。此項雖有統計學差異，但數值在正常值范圍內，且無劑量-反應關系，不認為具有不良生物學意義。其它各劑量組各項血液生化指標與空白對照組比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。

性別劑量/[mL/(kg·bw)/d]動物數/只谷丙轉氨酶/U/L谷草轉氨酶/U/L總蛋白/g/L白蛋白/g/L雌01034±6120±4252.4±1.834.1±1.23.331033±4131±854.3±2.234.7±1.37.231031±2115±1253.5±2.134.5±1.111.121030±6118±952.4±1.933.8±0.8雄01045±10146±2351.9±1.333.4±0.73.331041±5142±2251.4±2.733.1±1.67.231039±9139±1953.1±2.133.9±1.311.121041±6147±3052.2±2.633.0±1.4

性別劑量/[mL/(kg·bw)/d]動物數/只尿素氮/mmol/L肌酐/μmol/L總膽固醇/mmol/L甘油三酯/mmol/L血糖/mmol/L雌0107.14±1.6935±91.94±0.180.38±0.066.78±1.163.33107.69±1.9537±81.80±0.330.32±0.046.59±0.407.23106.15±0.7931±41.86±0.210.34±0.056.47±0.4811.12107.09±1.1432±41.71±0.250.35±0.046.08±0.71雄0105.60±0.8730±61.36±0.280.52±0.196.35±0.773.33105.54±1.0631±41.24±0.110.49±0.086.99±0.557.23104.84±0.6028±51.15±0.14*0.65±0.175.24±1.0511.12105.40±0.5031±41.25±0.180.57±0.146.40±1.54

注：與0g/(kg·bw)/d比較，*P﹤0.05。

4 結論

黃精青紅酒以3.33 mL/(kg·bw)/d、7.23 mL/(kg·bw)/d、11.12 mL/(kg·bw)/d(相當于人體推薦量的30倍、65倍、100倍)的劑量給予大鼠30天，受試動物一般情況良好，體重無異常改變；血液學指標及生化指標結果顯示，各項指標均在正常值范圍內。30天喂養試驗，給予動物人體推薦劑量100倍的黃精青紅酒，未觀察到有害作用。