血紅蛋白電泳與MCV對新生兒地中海貧血篩查的臨床診斷效果分析

李肖妹 馮王富 姚靖

【摘要】 目的：探究血紅蛋白（Hb）電泳與平均紅細胞體積（MCV）對新生兒地中海貧血篩查的臨床診斷效果。方法：選取2018年1月-2019年6月本院收治的疑似地中海貧血患兒352例，其中基因檢測陽性的218例作為地貧組，另選取同期本院體檢的健康新生兒85例作為對照組。所有研究對象均行Hb電泳及MCV檢測。比較兩組血液學檢測指標;比較不同類型地中海貧血者血液學檢測指標;以基因檢測作為金標準，比較Hb電泳、MCV單獨檢測和兩者聯合檢測的敏感度、特異度及準確性。結果：地貧組MCV、HbA均明顯低于對照組，而HbF明顯高于對照組（P<0.05）;α-地中海貧血者MCV、HbF均明顯低于β-地中海貧血者，而HbA明顯高于β-地中海貧血者（P<0.05）;根據ROC曲線圖顯示，Hb電泳臨界值為115 g/L，MCV臨界值為58 fL，聯合檢測的敏感度、特異度及準確性均明顯高于單獨檢測Hb電泳和MCV（P<0.05）。結論：Hb電泳、MCV檢測在新生兒地中海貧血篩查中具有一定價值，兩者聯合檢測的敏感度、特異度及準確性更高，對地中海貧血患兒早期診斷、治療及預后具有重要意義。

【關鍵詞】 Hb電泳 MCV 地中海貧血

[Abstract] Objective： To explore the clinical diagnostic effect of hemoglobin （Hb） electrophoresis and mean erythrocyte volume （MCV） on neonatal thalassemia screening. Method： A total of 352 children suspected of thalassaemia admitted to our hospital from January 2018 to June 2019 were selected， including 218 cases with positive gene test as the thalassaemia group. And 85 healthy newborns underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as the control group. All subjects underwent Hb electrophoresis and MCV detection. The hematological test indicators were compared between the two groups. The hematological indicators of patients with different types of thalassemia were compared. Gene test was used as the gold standard to compare the sensitivity， specificity and accuracy of Hb electrophoresis， MCV alone and combined detection. Result： MCV and HbA in the thalassemia group were significantly lower than those in the control group， while HbF was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. The MCV and HbF of patients with α-thalassemia were significantly lower than those with β-thalassemia， while the HbA was significantly higher than those with β-thalassemia （P<0.05）. According to the ROC curve， the critical value of Hb electrophoresis was 115 g/L?and the critical value of MCV was 58 fL. The sensitivity， specificity and accuracy of the combined detection were significantly higher than that of Hb electrophoresis and MCV detection alone （P<0.05）. Conclusion： Hb electrophoresis and MCV detection have certain value in screening neonatal thalassemia. The sensitivity， specificity and accuracy of combined detection of Hb electrophoresis and MCV are higher， which is of great significance for early diagnosis， treatment and prognosis of children with thalassemia.[Key words] Hb electrophoresis MCV ThalassemiaFirst-authors address： Maternal and Child Health Hospital of Yangjiang City， Yangjiang 529500， China

地中海貧血（地貧）又稱海洋性貧血或珠蛋白生成障礙性貧血，是一種隱性基因遺傳疾病，好發于新生兒，病因是遺傳的基因缺陷致使血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈合成缺如或不足所導致的貧血或病理狀態[1]。該病是全世界分布最廣泛，發病人數最多的一種單基因病[2]。有相關統計數據顯示，廣西是我國地貧多發地，約20%人群為地貧攜帶者，其他發病率較高的地區還有廣東、江西、四川及臺灣等地區[3]。若不能有效篩查出地貧新生兒，則容易發生飲食不合理，盲目醫治等情況[4]。當前地貧診斷的金標準為基因檢測，但操作繁瑣，設備要求高，價格昂貴，難以廣泛開展。因此，尋找一種經濟有效的篩查地貧患兒的方法顯得十分重要。本文采用血紅蛋白電泳與MCV對地貧患兒進行分析與診斷，探究這兩者方法對地貧患兒篩查的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月-2019年6月本院疑似地中海貧血患兒352例，納入標準：在本院接受體檢發現紅細胞脆性<60%或紅細胞分布寬度≤16%。排除標準：有其他貧血癥者;有其他系統疾病者。其中經基因檢測確診為陽性的218例患兒作為地貧組，另選取同期本院體檢的健康新生兒85例作為對照組。所有患兒家屬均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法 抽取所有研究對象空腹狀態下靜脈血2～5 mL，放置于無菌試管中并做好標記，搖晃均勻后進行抗凝離心（參數：5 000 r/min，5 min）;去血漿后用10倍0.9%氯化鈉溶液洗滌紅細胞3次，取10 μL紅細胞于裝有130 μL溶血素的試管中搖勻，溫室培育5 min備用。取抗凝靜脈血2 mL，用Sysmex KX-21血液分析儀，嚴格依照說明書操作檢測血液平均紅細胞體積（MCV）;使用Hb電泳儀、掃描儀和分析系統檢測Hb指標（包括HbA、HbF）。基因檢測：取疑似地中海貧血患兒靜脈血3 mL，采用人體細胞DNA提取試劑盒提取樣本DNA，采用GAP-PCR結合反向斑點雜交法診斷α-地貧，采用PCR結合反向斑點雜交法診斷β-地貧，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.3 觀察指標及評價標準 （1）比較兩組血液學指標，包括MCV、HbA及HbF;（2）比較不同類型地貧患兒血液學指標;（3）以基因檢測為金標準，比較Hb電泳、MCV單獨檢測和兩者聯合檢測診斷地貧的敏感度、特異度及準確性。MCV正常參考值為80 fL

1.4 統計學處理 采用SPSS 21.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，采用ROC曲線分析Hb電泳與MCV檢測的截斷值，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 地貧組男105例，女113例;孕周37～40周，平均（38.5±0.7）周，年齡3～34 d，平均（21.4±3.1）d;α型116例，β型102例。對照組男42例，女43例，孕周37～41周，平均（38.9±0.8）周，年齡2～35 d，平均（21.8±3.3）d。兩組一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組血液學檢測結果比較 地貧組MCV與HbA均明顯低于對照組，而HbF明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.3 不同類型地貧患兒的血液學檢測結果比較 α-地貧者MCV與HbF均明顯低于β-地貧者，HbA明顯高于β-地貧者，差異均有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.4 不同診斷方法對地貧的診斷價值 根據ROC曲線圖顯示，單獨檢測Hb電泳以臨界值為115 g/L時;單獨檢測MCV臨界值為58 fL;三種檢測方法診斷地貧的敏感度、特異度及準確性比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。聯合檢測的敏感度、特異度及準確性均明顯高于單獨檢測Hb電泳和MCV，差異均有統計學意義（P<0.05），見表3，圖1。

3 討論

地貧是一組單基因遺傳性疾病，最早出現于希臘、意大利等地中海沿岸國家，并由此而得名[5]。緣于基因缺陷的復雜性與多樣性，使缺乏的珠蛋白鏈類型、數量及臨床癥狀變異性較大。根據所缺乏的珠蛋白鏈種類，地貧可為α型、β型、δβ型和δ型4種，其中以α型、β型最為常見[6-7]。該病患病人數高，好發于新生兒，危害性大，且目前無特效治療方法，地貧重癥患兒僅可通過輸血、藥物等維持生命，但預后較差，發生較多不良反應和并發癥等，生存質量下降[8-9]。當前，我國臨床鑒定地貧主要是通過臨床癥狀、實驗室檢查和基因檢測，但由于檢測條件、技術操作及檢測價格較昂貴，基因檢測難以廣泛開展[10-12]。因此，探索一種廣泛有效的篩查方法尤為重要。

Hb電泳是臨床檢測地貧的常用方法，具有快速、操作簡單、特異度高等優點，能定量檢測HbA、HbF而將患者分為α型或β型地貧[13]。但該方法易受檢測試劑、樣品處理等諸多因素干擾，出現誤診、漏診等情況[14]。本研究結果顯示，地貧組MCV、HbA均明顯低于對照組，HbF明顯高于對照組（P<0.05），α-地貧的MCV、HbF均明顯低于β-地貧，HbA明顯高于β-地貧（P<0.05），提示Hb電泳、MCV檢測均可有效篩查地貧。且HbA在對照組中最高，α-地貧次之，β-地貧最低;HbF在β-地貧中最高，α-地貧次之，對照組最低，提示Hb電泳對地貧類型有一定程度的應用價值，原因在于Hb電泳通過分離不同等電點Hb并鑒定Hb的技術，但對輕度且無明顯癥狀的地貧篩查效果不佳，因此只能一定程度上提示α型或β型地貧[15-17]。根據ROC曲線圖顯示，單獨檢測MCV特異度最低，原因在于地貧患兒MCV降低，且缺鐵性貧血等情況也會發生MCV降低的狀況，因而單獨檢測MCV對篩查地貧效果不佳[18-19]。Hb電泳+MCV聯合檢測的敏感度、特異度、準確性均明顯高于單獨檢測Hb電泳和MCV（P<0.05），提示Hb電泳+MCV聯合檢測可更有效篩查出地貧。

綜上所述，Hb電泳、MCV檢測在新生兒地中海貧血篩查中具有一定價值，Hb電泳+MCV聯合檢測的敏感度、特異度及準確性更高，對地中海貧血患兒早期治療及預后具有重大意義。

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（收稿日期：2019-09-04） （本文編輯：田婧）