液基薄層細胞學檢查聯(lián)合高危型人乳頭瘤病毒核酸檢測在宮頸癌及癌前病變篩查中的價值

張達衡 侯舒倩 陳紅玲

【摘要】 目的：探討液基薄層細胞學檢查（TCT）聯(lián)合高危型人乳頭病毒核酸檢測（HR-HPV-DNA）在宮頸癌及癌前病變篩查中的臨床價值。方法：選取2017年1月-2018年12月本院婦科門診行宮頸標本病理學檢查患者400例，在病檢前均行TCT、HR-HPV-DNA檢測，病理學結(jié)果為金標準，比較TCT、HR-HPV-DNA及聯(lián)合檢測的篩查價值。結(jié)果：病理學結(jié)果顯示炎癥、CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級、宮頸癌TCT檢測陽性率（68.25%）高于HR-HPV-DNA檢測（55.25%）（P<0.05）;隨著病理學結(jié)果分級的升高，TCT、HR-HPV-DNA檢測陽性率逐漸增高，說明有明顯相關(guān)性（r=0.629、0.684，P<0.05）;TCT聯(lián)合HR-HPV-DNA檢測靈敏度高于單一檢測（P<0.05），HR-HPV-DNA檢測特異度高于單一TCT檢測及聯(lián)合檢測（P<0.05）;隨著TCT檢測宮頸病變越重，其HR-HPV感染率越高，具有明顯相關(guān)性（r=0.715，P<0.05）。結(jié)論：TCT、HR-HPV-DNA檢測篩查宮頸癌、癌前病變各具優(yōu)勢，聯(lián)合檢測可提高檢出率及篩查價值。

【關(guān)鍵詞】 TCT HR-HPV-DNA 宮頸癌 癌前病變

[Abstract] Objective： To explore the clinical value of TCT combined with HR-HPV-DNA in screening cervical cancer and precancerous lesions. Method： A total of 400 cases of cervical specimens from January 2017 to December 2018 in gynecological clinic of our hospital were selected for pathological examination， TCT and HR-HPV-DNA were detected before the examination， and the pathological results were the gold standard， To compare the screening value of TCT， HR-HPV-DNA and combined detection. Result： Pathological results showed inflammation， CIN Ⅰ， CIN Ⅱ， CIN Ⅲ and cervical cancer， the positive rate of TCT was 68.25% higher than that of HR-HPV-DNA （55.25%） （P<0.05）. The positive rates of TCT and HR-HPV-DNA were gradually increased with the increase of pathological grade （r=0.629， 0.684， P<0.05）. The sensitivity of TCT combined with HR-HPV-DNA detection was higher than that of single detection （P<0.05）， and the specificity of HR-HPV-DNA detection was higher than that of single TCT detection and combined detection （P<0.05）. The more serious the cervical lesions detected by TCT， the higher the infection rate of HR-HPV， which has a significant correlation （r=0.715， P<0.05）. Conclusion： TCT and HR-HPV-DNA detection have advantages in screening cervical cancer and precancerous lesions， combined detection can improve the detection rate and screening value.[Key words] TCT HR-HPV-DNA Cervical carcinoma Precancerous lesionsFirst-authors address： Maoming Peoples Hospital， Maoming 525000， China

宮頸癌為常見婦科腫瘤，在女性惡性腫瘤中其發(fā)病率居第二位[1]，更有研究表明全球?qū)m頸癌患者約85%發(fā)生于發(fā)展中國家[2]。國內(nèi)宮頸癌發(fā)病率逐年上升，且越來越年輕化，嚴重威脅人類的生命健康[3-5]。宮頸癌臨床早期診斷較為困難，有數(shù)據(jù)表明宮頸癌發(fā)病、進展、預(yù)后與高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）感染明顯相關(guān)[6-7]。臨床上對于宮頸癌患者重在早期篩查，為治療爭取最佳時機。其中液基細胞學檢測（TCT）可有效觀察宮頸上皮的異型細胞，評估早期病變。而HR-HPV-DNA主要篩查機體感染HPV病毒情況，通過分析不同高危分型患者HPV感染情況，篩查早期宮頸癌患者[8-10]。為提高宮頸癌、癌前病變早期篩查率，本研究選取400例患者作為研究對象，評估TCT、HR-HPV-DNA檢測的臨床價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月-2018年12月本院婦科門診行宮頸標本病理學檢查的患者400例，年齡21～45歲，平均（36.95±4.22）歲;首次性生活年齡16～22歲，平均（20.95±3.12）歲;356例有生育史，平均孕次（1.25±0.22）次;具有陰道接觸性出血325例。納入標準：均行TCT、HR-HPV-DNA檢測;病理資料完整。排除標準：生殖道感染;宮頸感染;子宮切除;宮頸不完整。該研究已經(jīng)倫理學委員會批準，患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 TCT檢查 專用標本采集刷在宮頸口采集宮頸移行帶脫落細胞，并保存于專用保存液中待檢。采集的細胞進行TBS分級檢測，由本院病理科兩位高級職稱醫(yī)師進行判斷。TCT評價標準：炎癥或正常（NIML），意義不明的非典型鱗狀上皮細胞（ASCUS），不排除高度鱗狀細胞內(nèi)瘤變（ASC-H），低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL），高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL），鱗狀細胞癌（SCC），ASCUS及其以上病變?yōu)門CT診斷陽性。

1.2.2 HR-HPV-DNA檢查 專用采樣器置于宮頸口1.0～1.5 cm直至宮頸，進行逆時針旋轉(zhuǎn)3圈采集標本，樣本存于保存液中待檢。采用亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司提供的試劑盒進行HPV基因擴增及分型檢測，能同時檢測23種基因型，包括18種高危亞型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、MM4、83;5種低危亞型：HPV6、11、42、43、44。實驗步驟：（1）分泌物中細胞的DNA提取;（2）聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴增;（3）雜交;（4）洗膜;（5）顯色及結(jié)果觀察。檢測結(jié)果相應(yīng)亞型顯色，陰性結(jié)果無顯色，PC點顯色診斷為陽性。

1.2.3 聯(lián)合檢查評價標準 任一TCT、HR-HPV-DNA檢測陽性即為聯(lián)合檢查陽性。

1.2.4 病理學檢查 陰道鏡于宮頸異常病變處采取宮頸組織，并進行固定、包埋處理待檢。由本院病理科兩位高級職稱醫(yī)師進行讀片、分析。病理學結(jié)果顯示宮頸上皮瘤變（CINⅡ、Ⅲ）級、宮頸癌為陽性，CINⅠ、炎癥為陰性。

1.3 觀察指標 計算并比較TCT、HR-HPV-DNA及聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度、準確率、陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值、約登指數(shù)等。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 19.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 病理學結(jié)果 400例宮頸標本病理學檢查，其中炎癥100例，CINⅠ級75例，CINⅡ級115例，CINⅢ級85例，宮頸癌25例。病理學結(jié)果陽性225例，陽性率56.25%。

2.2 TCT檢查與病理學結(jié)果關(guān)系 隨著病理學結(jié)果分級的升高，TCT檢測陽性率逐漸增高，且具有明顯相關(guān)性（r=0.629，P<0.05）;宮頸癌、CINⅢ級患者的TCT陽性率顯著高于病理學炎癥組、CINⅠ級、CINⅡ級（P<0.05）;CINⅡ級、CINⅠ級患者的TCT陽性率顯著高于炎癥組（P<0.05）。見表1。

2.3 HR-HPV-DNA檢查與病理學結(jié)果關(guān)系 隨著病理學結(jié)果分級的升高，HR-HPV-DNA檢測陽性率逐漸增高，且具有明顯相關(guān)性（r=0.629，P<0.05）;宮頸癌、CINⅢ級患者HR-HPV-DNA陽性率顯著高于炎癥、CINⅠ級、CINⅡ級患者（P<0.05）;CINⅡ級、CINⅠ級患者HR-HPV-DNA陽性率顯著高于炎癥患者（P<0.05）。見表2。

2.4 CINⅠ級病變以上患者不同檢查方法診斷價值比較 TCT聯(lián)合HR-HPV-DNA檢測靈敏度高于單一檢測（P<0.05），檢測特異度高于單一TCT檢測及聯(lián)合檢測（P<0.05）。見表3。

2.5 HR-HPV-DNA感染與TCT檢測結(jié)果關(guān)系 隨著TCT檢測宮頸病變越重，其HR-HPV-DNA感染率越高，具有明顯相關(guān)性（r=0.715，P<0.05），見表4。

3 討論

目前在我國女性惡性腫瘤中，宮頸癌發(fā)病率僅次于乳腺癌，且其發(fā)病率正呈快速增長趨勢，嚴重威脅女性健康[11]。宮頸癌主要由于機體感染HR-HPV病毒，研究顯示HR-HPV病毒感染為宮頸癌發(fā)病的獨立危險因素之一[12]。因此，早期篩查、早期干預(yù)HPV病毒感染宮頸癌的防治、預(yù)后意義重大[13-15]。目前臨床早期篩查宮頸癌的手段分為細胞學、病原學兩方面。其中TCT檢測通過刷取宮頸脫落細胞，在光鏡下觀察細胞形態(tài)變化，可清晰地分辨早期病變情況。而HPV-DNA檢測通過采集宮頸樣本，利用特殊化學發(fā)光法進行病原學診斷，分析HPV危險分型篩查病變。

本研究收集的400例宮頸標本，進行病理診斷為宮頸癌前病變、宮頸癌共225例，其病變率56.25%，與胡麗芳[16]報道的宮頸癌、宮頸癌前病變病檢陽性率56.21%結(jié)果基本一致。TCT檢測屬于細胞學檢查，采集宮頸脫落細胞在光鏡分析細胞核的異型性、分裂現(xiàn)象及浸潤程度等，進而判斷為無法判斷細胞來源的增生、不典型上皮增生等，為宮頸癌早期篩查的重要方法之一。本研究結(jié)果提示TCT對宮頸癌前病變、宮頸癌的篩查陽性率為68.25%，且隨著病理學結(jié)果分級的升高，TCT檢測陽性率逐漸增高，具有明顯相關(guān)性（r=0.629，P<0.05）。說明TCT檢測對宮頸病變分級程度的評估提供一定的依據(jù)。文獻[17-18]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)TCT檢測宮頸癌組織的陽性率可達75%，且陽性率高于CINⅢ組，與本研究結(jié)果基本一致。HR-HPV-DNA屬于病原學檢測，主要是通過檢測HPV危險分型篩查宮頸癌前病變、宮頸癌，其中HPV高危型為宮頸癌發(fā)病的獨立危險因素。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著病理學結(jié)果分級的升高，HR-HPV-DNA檢測陽性率逐漸增高，并有明顯相關(guān)性（r=0.684，P<0.05），說明HR-HPV-DNA對宮頸病變同樣具有一定的評估價值，但其檢測陽性率低于TCT，臨床上容易漏診，文獻[19]亦得到相似結(jié)論。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HR-HPV-DNA檢測的特異度、約登指數(shù)、準確率及陽性預(yù)測值均較高，提示HR-HPV-DNA檢測可作為宮頸癌高危人群的早期篩查，其較TCT檢測具有明顯優(yōu)勢。而聯(lián)合檢測具有較高的靈敏度與陰性預(yù)測值，可有效提高宮頸癌的篩查價值，可有效避免漏診，早期診斷、早期治療，有助于有效防治。而單一TCT檢測僅陽性率高于HPV-DNA檢測，相對不具有明顯優(yōu)勢，TCT檢測易受樣本的采集、細胞的炎癥及診斷醫(yī)師的經(jīng)驗等因素的影響，導致其診斷價值有限[20]。本研究探討了TCT診斷結(jié)果與HPV感染的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著TCT檢測病變程度的加重，其HPV-DNA檢測的陽性率明顯升高，說明宮頸病變分級越高，其HPV感染率越高，為臨床篩查宮頸病變程度提供一定價值。

綜上所述，TCT、HR-HPV-DNA檢測篩查宮頸癌、癌前病變各具一定優(yōu)勢，聯(lián)合檢測可提高檢出率、提高篩查價值。但本研究樣本量較少、來源較單一，該結(jié)論的可靠性需進一步研究。

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（收稿日期：2019-09-11） （本文編輯：程旭然）