兒童呼吸道感染中肺炎支原體抗體檢測結(jié)果分析及臨床意義

徐王彪 陳潔紅

肺炎支原體(mycoplasma pneumonia, MP)是引起人支原體肺炎的病原體，支原體肺炎的發(fā)病率以青少年為最高，是兒童呼吸道感染的常見類型。發(fā)病初期表現(xiàn)為感冒樣全身癥狀，繼而出現(xiàn)發(fā)熱及陣發(fā)性刺激性咳嗽為主的呼吸道癥狀，嚴(yán)重可伴發(fā)多系統(tǒng)器官損害，臨床也有個別死亡病例報道[1]。由于肺炎支原體感染的臨床表現(xiàn)和胸部X線檢查都不具有典型性，因而很難做出準(zhǔn)確診斷。目前，肺炎支原體感染的快速診斷主要依靠血清學(xué)抗體檢測[2-3]。本研究擬通過分析兒童呼吸道感染者中肺炎支原體感染的陽性率，以及性別、年齡分布、發(fā)病季節(jié)性等特點，為臨床診斷、治療及預(yù)防提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年7月至2019年6月來安慶市第二人民醫(yī)院兒科門診及住院部就診呼吸道感染兒童1 256例的臨床資料。按性別分為男童組692例和女童組564例；按年齡分為0歲～組166例、1歲～組505例、4歲～組349例、7歲～組143例以及10～14歲組93例；按季節(jié)分為春季組(3月～5月)393例、夏季組(6月～8月)272例、秋季組(9月～11月)197例和冬季組(12月～次年2月)394例。

1.2 標(biāo)本采集 用真空采血管對每位兒童采靜脈血2 mL，以3 000 r /min離心10 min 分離血清待檢。

1.3 觀察指標(biāo)及檢測方法 檢測試劑為日本富士康必歐株式會社提供的賽樂迪亞-麥可Ⅱ肺炎支原體抗體檢測試劑盒(被動凝集法)。嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，倍比稀釋血清，加入等量未致敏粒子和致敏粒子(未致敏粒子和致敏粒子須加入血清稀釋液溶解30 min后方可使用)。在水平振蕩器上進(jìn)行充分混勻，15～30℃避光靜置3 h后觀察結(jié)果，實驗同時設(shè)置陰性和陽性對照，檢測肺炎支原體總抗體滴度(包括IgM型抗體和IgG型抗體)。根據(jù)試劑盒說明書判讀陰陽性結(jié)果：<1∶40判斷為陰性，≥1∶40判斷為陽性，并注明滴度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用頻數(shù)和率表示，率的比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義；多組間的兩兩比較，根據(jù)檢驗的組數(shù)調(diào)整檢驗水準(zhǔn)，檢驗水準(zhǔn)α=0.05/n，n=組數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 肺炎支原體抗體檢測結(jié)果 1 256例呼吸道感染患兒，肺炎支原體抗體陽性率為26.4%(332/1 256)。男童陽性率為24.6%(170/692)，低于女童陽性率28.7%(162/564)，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.761，P=0.097)。

2.2 不同年齡組肺炎支原體抗體檢測陽性率結(jié)果 0歲～組陽性率最低為3.6%，7歲～組陽性率最高為44.8%，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=114.072，P<0.001)。兩兩比較顯示，0歲～組與1歲～組、4歲～組、7歲～組、10～14歲組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=22.567、64.680、74.208、58.635，P<0.001)；1歲～組與4歲～組、7歲～組、10～14歲組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=35.138、40.509、22.076，P<0.001)。見表1。

2.3 不同季節(jié)肺炎支原體抗體檢測陽性率分布情況 冬季和春季陽性率較高，分別為31.0%、29.0%，夏季和秋季陽性率較低，分別為20.2%、20.8%，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=14.099，P=0.003)。見表2。

表1 不同年齡段肺炎支原體抗體陽性率比較

注：與0歲～組比較，*P<0.001；與1歲～組比較，#P<0.001

表2 不同季節(jié)肺炎支原體抗體檢測陽性率分布

注：與冬季組比較，*P<0.008

2.4 肺炎支原體抗體陽性結(jié)果滴度分析 在332例陽性結(jié)果中，滴度1∶40共65例，占19.6%；滴度1∶80共75例，占22.6%；滴度≥1∶160共192例，占57.8%。

3 討論

支原體是目前發(fā)現(xiàn)最小最簡單的原核生物，自然界分布廣泛，與人類相關(guān)的有3種：肺炎支原體、人型支原體和生殖器支原體。其中肺炎支原體可黏附在宿主氣管或支氣管上皮細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷，伸出微管吸取胞內(nèi)營養(yǎng)、釋放溶細(xì)胞酶和過氧化氫等引起細(xì)胞腫脹、壞死等，從而導(dǎo)致咽炎、支氣管炎或非典型肺炎等[4]。由于支原體肺炎的臨床表現(xiàn)易與細(xì)菌或病毒感染相混淆，且支原體對抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成的抗生素或抗病毒類藥物均不敏感，因此，快速、準(zhǔn)確地對肺炎支原體感染做出診斷，是進(jìn)一步采取有效治療措施的關(guān)鍵。

分離培養(yǎng)、PCR核酸檢測和血清學(xué)試驗是診斷肺炎支原體感染的主要方法[5-6]。雖然病原體培養(yǎng)是診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但由于肺炎支原體生長緩慢、培養(yǎng)條件苛刻，不能及時做出臨床診斷；PCR核酸檢測因為假陽性率較高等也難以獲得廣泛開展；血清學(xué)試驗則以其快速、簡便等特點更容易為臨床所接受，尤其近年開展的血清肺炎支原體抗體檢測項目具有較高的敏感性、特異性及陽性檢出率，在MP診斷中已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用[7-8]。

本研究對1 256例呼吸道感染兒童MP抗體檢測資料進(jìn)行回顧性分析，結(jié)果顯示1 256例患兒中MP抗體的陽性檢出率為26.4%，高于江蘇海安地區(qū)的16.8%[9]，與佛山市順德區(qū)的26.64% 相接近[10]，表明近年來MP感染率呈逐漸增高的趨勢并存在地域差異分布的特點。從性別分布特點分析，女童感染MP的陽性率略高于男童，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。從年齡分布特點分析，0歲～組MP抗體陽性率最低(3.6%)，7歲～組MP抗體陽性率最高(44.8%)，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，0歲～組、1歲～組分別與其他各組兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。0歲～組MP抗體陽性率最低及1歲～組較低的原因，一方面可能嬰兒體內(nèi)有來自母體和母乳喂養(yǎng)中保護(hù)性抗體的存在；另一方面可能與嬰幼兒活動范圍較小，MP感染機會少有關(guān)[11]；也可能存在嬰幼兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟，初次感染MP后抗體生成不足等情況。因此對0～3歲兒童應(yīng)結(jié)合臨床癥狀病史及其他檢查進(jìn)行分析判斷[11]。7歲～組兒童MP抗體陽性率最高及4歲～組、10～14歲組兒童陽性率較高的原因可能與其活動范圍大，經(jīng)常處于人群密集如幼兒園、學(xué)校、食堂等公共場所，而MP帶菌者和患者是主要傳染源，相互之間交叉感染有關(guān)，因此臨床上應(yīng)加強對學(xué)齡前及學(xué)齡期兒童MP抗體檢測來進(jìn)行鑒別是否MP感染。從季節(jié)分布特點分析，以冬季和春季陽性率較高，夏季和秋季陽性率較低，與相關(guān)文獻(xiàn)[11-12]報道冬、春兩季陽性率較高的結(jié)果一致，這可能與兩季氣候寒冷，呼吸道抵抗力差，有利于MP感染與傳播有關(guān)，因此更應(yīng)重視兒童冬春季呼吸道感染的MP抗體檢測。另外，被動凝集法檢測MP抗體滴度需≥1∶160方有較強的診斷意義[13]，滴度與癥狀往往成正相關(guān)。在本研究的332例MP抗體陽性檢測結(jié)果中，有19.6%和22.6%患兒的抗體滴度分別為1∶40和1∶80。較低的抗體滴度，可能與MP感染后抗體出現(xiàn)及達(dá)到峰值的時間延遲有關(guān)，也可能為既往MP感染后體內(nèi)IgG型抗體殘留有關(guān)，因此需要臨床醫(yī)師結(jié)合患者癥狀做出診斷，或可進(jìn)行試驗性治療，如有需要可在1周后重復(fù)測定MP抗體，復(fù)查后仍然為較低抗體滴度則為既往MP感染后體內(nèi)IgG型抗體殘留；復(fù)查后抗體滴度升高則為MP現(xiàn)癥感染，有利于臨床醫(yī)師進(jìn)行鑒別診斷。

總之，應(yīng)用被動凝集法對呼吸道感染兒童進(jìn)行肺炎支原體抗體檢測，是一種方便、實用的方法，有利于盡早明確診斷，及時開展有效的抗感染治療，同時MP抗體滴度檢測對治療的療效評估有一定的指導(dǎo)意義。