大蒜多糖與葛根對急性酒精中毒小鼠的解酒護肝作用比較研究

曾婷　陳一峰　曾小雨　肖玉彬　蔣彭成

【摘要】目的??探討大蒜多糖與葛根對急性酒精中毒小鼠的解酒作用及其保護機制。方法??采用酒精灌胃法建立小鼠急性酒精中毒模型，觀察混合物不同配比對小鼠的醒酒效果，選擇最佳配比;通過測定小鼠的醉酒率、醉酒時間、血液中谷草轉氨酶與谷丙轉氨酶的活性觀察大蒜多糖與葛根的醒酒效果。結果??與對照組比較，模型組小鼠體質量明顯下降?（P<0.05），血清ALT和AST活性明顯增高?（P<0.05），與模型組比較，大蒜多糖劑量組小鼠肝質量指數、血清ALT和AST活性降低與小鼠耐受能力增強無葛根劑量組與混合給藥組明顯（P<0.05），肝組織病變葛根劑量組減輕較顯著。結論?預防性給藥使得大蒜多糖與葛根皆可在一定程度上降低醉酒率，延長醉酒時間，但葛根組較大蒜多糖組與混合給藥組皆顯著。

【關鍵詞】葛根??大蒜多糖??急性酒精中毒??解酒作用

酒精性肝損傷是酒精攝入過量（急性）或長期酗酒（慢性）導致的中毒性肝病，影響著全世界數百萬人口，是導致發(fā)病率和死亡率的主要原因。鑒于酒精性肝病目前尚無特效治療藥物，其損傷又呈不可逆性，所以研究預防和早期遏制酒精性肝損傷的有效方法顯得尤為重要。大蒜多糖可以促進肝糖原的合成和儲存，對肝損壞有一定的保護作用。葛根始載于《神農本草經》，為豆科植物野葛，具有解肌退熱、解酒護肝等功效，臨床上主要用于外感發(fā)熱頭痛、高血壓、頸項強痛、口渴等癥。因此將二者進行比較研究，探尋大蒜多糖與葛根的不同解酒與肝保護作用。

一、實驗材料

（1）實驗動物。SPF級健康昆明小鼠72只，雌雄各半，體質量28～32g，動物飼養(yǎng)條件：室內溫度22℃～25℃，濕度75%。

（2）試劑與儀器。白酒為56°北京紅星二鍋頭白酒（北京紅星股份有限公司），大蒜多糖（鴻鑫化工）。

（3）預實驗。經預實驗發(fā)現(xiàn)小鼠以0.11ml/20g體重56度紅星二鍋頭酒灌胃，小鼠翻正反射消失最快而無小鼠死亡，實驗結果表明0.11/20g為較佳致醉量。葛根、大蒜多糖、大蒜多糖與葛根混合物皆以低劑量組2.5g/kg，高劑量組7.5g/kg為最佳解酒量灌胃。

（4）動物分組與處理。健康昆明小鼠適應性喂養(yǎng)10d后，采用區(qū)間隨機分組方法按體質量隨機分為對照組、模型組、陽性藥組，每組8只，大蒜多糖組、葛根組、混合組（大蒜多糖與葛根）的不同劑量組，每組8只，對照組用0.1ml/10g·d-1生理鹽水灌胃，陽性藥組用0.04g/ml的一劑納酪酮與12.3ml的生理鹽水混合每次以0.1ml/10g·d-1灌胃，模型組各組均以5.75ml/kg體重56度紅星二鍋頭酒灌胃，觀察記錄小鼠醉酒時間（從清醒到翻正反射消失的時間），計算?24?h內的醉酒率、死亡率、醒酒率。小鼠醉酒與否，?以翻正反射是否消失為標準：小鼠灌酒后將其背向下，?輕輕放入鼠籠，?若小鼠背向下的姿勢保持30s以上，?則認為翻正反射消失，?即為醉酒。連續(xù)灌胃10d，所有動物常規(guī)飼養(yǎng)。

（5）小鼠血清ALT、AST?水平檢測。末次灌胃12h后開始禁食，24h后每只小鼠經眼眶采血，低溫離心制備血清，按試劑盒要求檢測?ALT、AST?水平。

（6）統(tǒng)計分析。應用?SPSS11.5?軟件進行數據分析，計算結果以均數±標準差（±s）表示，組間采用t檢驗。

二、結果

（1）大蒜多糖與葛根預防性給藥對急性酒精中毒小鼠醉酒時間、醉酒率的影響見表1。與模型組比較，?復方葛根散高劑量組與大蒜多糖低劑量組預防性給藥可明顯降低小鼠醉酒率（P

（2）大蒜多糖與葛根對急性酒精中毒小鼠血清ALT、AST?水平的影響??葛根最佳效果劑量組小鼠血清ALT、AST水平最低，其中ALT水平較大蒜多糖組和混合組顯著并且低劑量組較高劑量組普遍ALT水平降低。

三、討論

（一）醉酒模型的建立

白酒灌胃模型肝功能改變明顯，在肝內可以形成與人類似的病變如肝細胞脂變。但建立模型后有部分小鼠因為個體差異一直不出現(xiàn)翻正反射或灌酒后迅速死亡，因此并未將其列入統(tǒng)計范圍。

（二）肝保護機制

持續(xù)用白酒灌胃小鼠10d后，小鼠醉酒率下降、醉酒時間延長，血清AST、ALT活性升高，但藥物干預組活性相對下降，提示大蒜多糖與葛根對小鼠酒精性肝損傷具有一定的保護作用，但二者程度不一。有研究表明大蒜多糖與葛根能有效解酒防醉、保護酒精導致的肝功能損傷、緩解肝組織病理損害、減少肝細胞凋亡。但二者的療效大小并未進行比較，該研究不僅將大蒜多糖與葛根進行分別比較，并且將其與二者的混合液也進行了研究，探討二者療效大小與二者相互作用是協(xié)同還是拮抗。本課題表明大蒜多糖與葛根二者相互作用與葛根單獨作用效果不明顯，但比大蒜多糖作用效果明顯。但根據相關研究大蒜多糖對慢性酒精中毒療效好，本研究對大蒜多糖是否適用于急性酒精中毒與大蒜多糖與葛根二者是否可聯(lián)合用藥提供依據。由于自身知識有限，實驗條件的限制，大蒜多糖與葛根的解酒機制以及其肝保護作用還需進一步探討。

參考文獻：

[1]丁運文，?湯興俊，?陳心馨，?et?al.解酒護肝飲解酒及對急慢酒精性肝損傷的保護作用[J].?基因組學與應用生物學，?2019，（5）.

[2]李天星，?李新民.?中藥葛根的研究進展[J].?湖南中醫(yī)雜志2011，（08）：157-159.

[3]趙靜波，王泰齡.?大鼠急性酒精性肝損傷模型分析[J].?中日友好醫(yī)院學報（1期）：17-19.

[4]俞琦，?王平，?王文佳，?et?al.?葛根散等3首解酒方對急性酒精性肝損傷小鼠肝細胞凋亡的影響[J].?中華中醫(yī)藥雜志，?2011，（9）：2046-2048.

[5]管艷敏，?范玉蘭，?局雪，?et?al.?B族維生素治療慢性酒精中毒性周圍神經病療效觀察[J].?中國臨床研究，?2013，（8）：783-784.

基金項目：項目編號：長沙醫(yī)學院大學生研究性學習和創(chuàng)新性實驗計劃項目，長醫(yī)教[2018]77號-227，大蒜多糖與葛根對急性酒精中毒小鼠比較研究及影響。

作者簡介：曾婷（200-），女，湖南邵陽人，長沙醫(yī)學院在校生;通訊作者：蔣彭成，男，講師，研究方向：藥學與生物信息。