乳酸菌和水合鋁硅酸鈣鈉對(duì)黃曲霉毒素B1脫毒及肉雞的解毒作用

王亞欣，張 君，邱深本，劉思伽，戴志亮

（廣東科貿(mào)職業(yè)學(xué)院，廣東廣州 510430）

黃曲霉毒素是由曲霉菌類(lèi)真菌產(chǎn)生的，經(jīng)常出現(xiàn)在飼料或食品中。黃曲霉毒素B1的毒性最大，可直接抑制動(dòng)物生長(zhǎng)和健康，誘發(fā)動(dòng)物肝臟疾病和代謝紊亂，導(dǎo)致動(dòng)物組織和產(chǎn)品中存在有毒殘留物（左甜甜等，2019）。此外，被黃曲霉毒素B1污染的食品對(duì)人類(lèi)有很強(qiáng)的致癌作用。從食品安全角度來(lái)看，開(kāi)發(fā)更有效的方法來(lái)抵消黃曲霉毒素B1的毒性已成為最近動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)的焦點(diǎn)。水合鋁硅酸鈣鈉等粘土吸附劑在飼料工業(yè)中被廣泛應(yīng)用。但這些吸附劑容易對(duì)環(huán)境造成二次污染，隨著對(duì)黃曲霉毒素B1的深入了解，微生物技術(shù)有望將這些有毒基團(tuán)降解為零毒或低毒物質(zhì)。因乳酸菌具有發(fā)酵食物和改善腸道菌群等功能被廣泛應(yīng)用。王曉偉等（2015）研究表明，乳酸菌可以作為天然生物拮抗劑來(lái)對(duì)抗霉菌及其高毒性代謝物。但在農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物中，乳酸菌對(duì)黃曲霉毒素B1的脫毒作用研究非常有限，特別是與傳統(tǒng)的硅土類(lèi)產(chǎn)品相比。因此，本研究旨在探討乳酸菌和水合鈉鈣鋁硅酸鹽對(duì)肉雞日糧黃曲霉污染的解毒作用，同時(shí)評(píng)估其對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率、免疫功能及黃曲霉毒素B1殘留的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選擇1日齡雌性肉雞960只，根據(jù)體重一致性原則隨機(jī)分為4組，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只，分別飼喂陽(yáng)性對(duì)照日糧（沒(méi)有黃曲霉毒素B1污染，表1）、陰性對(duì)照日糧（陽(yáng)性對(duì)照組日糧+45 μg/kg黃曲霉毒素B1）、乳酸菌日糧（陰性對(duì)照日糧+2.0×1010CFU/kg乳酸菌）和水合硅鋁酸鈣鈉日糧（陰性對(duì)照日糧+3.5 g/kg水合硅鋁酸鈣鈉），試驗(yàn)共開(kāi)展21 d。試驗(yàn)雞只按照常規(guī)飼養(yǎng)方法和免疫程序進(jìn)行管理。

表1 陽(yáng)性對(duì)照組配方組成及營(yíng)養(yǎng)成分

1.2 生長(zhǎng)性能和樣品收集 每周稱(chēng)量肉雞和飼料用量，并根據(jù)死亡率調(diào)整飼料用量。在試驗(yàn)結(jié)束前3 d，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇體重接近的6只雞，收集并混合糞便，其中10%的樣品冷凍干燥后測(cè)定養(yǎng)分消化率和黃曲霉毒素B1含量。試驗(yàn)第21天每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇8只雞翅下靜脈采血后分離血清（-20℃保存），之后將雞只屠宰，收集肝臟、腎臟、脾臟、法氏囊和胸腺，稱(chēng)重后-20℃保存。

1.3 樣品分析 血清免疫球蛋白、樣品黃曲霉毒素B1含量的測(cè)定采用ELISA試劑盒進(jìn)行，淋巴細(xì)胞數(shù)量參考Liu等（2008）的研究方法。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS軟件單因素方差分析，采用Tukey’s honest進(jìn)行顯著性差異檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能和消化率 試驗(yàn)期間各處理肉雞死亡率均正常（在5%以內(nèi)），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（數(shù)據(jù)未列出）。由表2可知，陰性處理組平均日增重和飼料報(bào)酬顯著降低（P＜0.05），而與陰性對(duì)照組相比，乳酸菌、水合硅鋁酸鈣鈉組和陽(yáng)性對(duì)照組平均日增重顯著提高8.92%、5.95%和6.69%（P＜0.05），飼料報(bào)酬分別顯著提高7.94%、6.35%和6.35%（P＜0.05）。各處理組對(duì)肉雞平均日采食量的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。與陽(yáng)性對(duì)照組相比，陰性對(duì)照組干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、消化能的消化率顯著降低，分別降低8.50%、10.63%、4.84% 和 3.85%（P ＜ 0.05），而乳酸菌組和水合硅鋁酸鈣鈉組上述指標(biāo)提高4.28%～15.3%（P＜0.05）。此外，乳酸菌組消化能的消化率較水合硅鋁酸鈣鈉組顯著提高1.56%（P＜0.05），而陽(yáng)性對(duì)照組和乳酸菌組之間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。乳酸菌組鈣和磷的消化率也顯著高于其他各組（P＜0.05），其他組之間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表2 乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能和養(yǎng)分消化的影響

2.2 免疫器官相對(duì)重量及免疫指標(biāo) 由表3可知，與陽(yáng)性對(duì)照組相比，陰性對(duì)照組脾臟和肝臟相對(duì)重量顯著提高（P＜0.05），法氏囊和胸腺相對(duì)重量顯著降低（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，乳酸菌組脾臟和肝臟重量顯著降低14.63%和6.38%（P＜0.05），而法氏囊和胸腺相對(duì)重量顯著提高10.42%和5.23%（P＜0.05）。除胸腺相對(duì)重量外，乳酸菌組與水合硅鋁酸鈣鈉組對(duì)其他免疫器官相對(duì)重量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組組、乳酸菌組和水合硅鋁酸鈣鈉組較陰性對(duì)照組顯著提高了T和B淋巴細(xì)胞數(shù)量（P＜0.05），但陽(yáng)性對(duì)照組與乳酸菌組無(wú)顯著差異（P＞0.05），但水合硅鋁酸鈣鈉組較陽(yáng)性對(duì)照組和乳酸菌組顯著提高了這兩個(gè)指標(biāo)（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，乳酸菌組肉雞血清IgA、IgM和IgG濃度顯著提高214.84%、273.12%和95.33%（P＜0.05）。同時(shí)，水合硅鋁酸鈣鈉組IgA和IgM濃度也較陰性對(duì)照組顯著提高65.83%和50.34%（P＜0.05）。

表3 乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對(duì)肉雞免疫性能的影響

2.3 黃曲霉B1毒素殘留 由表4可知，與陰性對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照組、乳酸菌組血清、肝臟、脾臟、腎臟、法氏囊和胸腺中黃曲霉毒素B1殘留量顯著降低49.93%～80.82%（P＜0.05），而水合硅鋁酸鈣鈉組黃曲霉毒素B1殘留量降低44.38%～66.12%（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，乳酸菌組糞中黃曲霉毒素B1殘留量降低48.51%（P＜0.05），而水合硅鋁酸鈣鈉組顯著提高37.37%（P＜0.05）。

表4 乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對(duì)肉雞血清、器官和糞中黃曲霉B1毒素殘留量的影響

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，黃曲霉毒素B1污染飼料會(huì)降低肉雞平均日增重和飼料報(bào)酬，但不影響平均采日食量，水合硅鋁酸鈣鈉提高了平均日采食量、飼料報(bào)酬和日增重。作為益生菌的乳酸菌被廣泛用于改善肉雞生長(zhǎng)。Zuo等（2013）研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加干酪乳桿菌、枯草桿菌、畢赤酵母和黃曲霉毒素B1降解酶組合后提高了43～73 d AA肉雞的生長(zhǎng)性能。在本研究中，乳酸菌可緩解黃曲霉毒素B1對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的毒副作用，其效果超過(guò)水合硅鋁酸鈣鈉，達(dá)到與正常日糧相似的水平。在本研究中，日糧添加乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉可提高肉雞干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪的消化率，這與Gutierrez-Fuentes等（2013）的研究結(jié)果一致。乳酸菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的作用主要取決于所選菌株的特性，包括腸道繁殖能力、活性物質(zhì)的產(chǎn)生、有機(jī)酸的產(chǎn)生、有益菌優(yōu)化和腸道形態(tài)（Ahlberg等，2015）。由乳酸菌會(huì)降低腸道pH，有助于溶解和隨后礦物質(zhì)的吸收，而水合硅鋁酸鈣鈉無(wú)這方面的作用。

在本研究中，黃曲霉毒素B1導(dǎo)致肝臟和脾臟腫大，但降低了法氏囊和胸腺的相對(duì)重量。Mavarez等（2005）報(bào)道，肉仔雞暴露于70 μg/kg黃曲霉毒素B1下，肝臟和法氏囊損傷。此外，本研究中淋巴器官的組織病理學(xué)損傷導(dǎo)致黃曲霉毒素B1日糧中T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞比例降低。作者推測(cè)，黃曲霉毒素B1對(duì)雞B、T淋巴細(xì)胞有免疫抑制作用。日糧添加乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉后減輕了黃曲霉毒素B1對(duì)器官和淋巴細(xì)胞的損傷，乳酸菌的保護(hù)作用比水合硅鋁酸鈣鈉更明顯，這與Hathout等（2011）的研究結(jié)果一致。

與陰性對(duì)照日糧組相比，水合硅鋁酸鈣鈉組和乳酸菌組雞血清中IgA、IgG、IgM濃度升高進(jìn)一步證實(shí)了乳酸菌和水合硅鋁酸鈣鈉對(duì)肉雞免疫的有益作用。乳酸菌組和水合硅鋁酸鈣鈉組分別使血清、肝臟、腎臟、脾臟、法氏囊和胸腺中黃曲霉毒素B1殘留量降低了49.93%～80.82%和44.38%～66.12%，提示乳酸菌阻斷了更多的黃曲霉毒素B1進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，這與Attia等（2013）的研究結(jié)果一致，其發(fā)現(xiàn)在減輕黃曲霉毒素B1對(duì)肝臟病變影響方面，嗜酸乳桿菌比水合硅鋁酸鈣鈉和寡糖效果好。

4 結(jié)論

日糧中添加乳酸菌或水合硅鋁酸鈣鈉可以改善肉雞生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率和免疫功能，降低黃曲霉毒素B1的毒副作用和組織殘留量。但乳酸菌的改善效果比水合硅鋁酸鈣鈉更明顯。乳酸菌日糧中組織和糞中黃曲霉毒素B1殘留的降低表明益生菌對(duì)毒素有生物降解作用。