飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率及腸道形態(tài)的影響

肖 杰，孫攀峰，李鵬偉，朱金鳳

（河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學院，河南鄭州 451450）

單寧又名鞣質(zhì)，屬于多酚類化合物，通常存在于反芻動物飼料中。研究表明，單寧能與瘤胃內(nèi)的蛋白質(zhì)形成沉淀，防止蛋白質(zhì)降解，之后在腸道中釋放，增加反芻動物可利用的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，從而增加蛋白質(zhì)利用率（王衛(wèi)云，2017）。此外，飼喂含單寧的牧草或補充單寧可以減少CH4和N2O的排放，增加反芻動物可利用的能量（段杰林等，2013）。對于反芻動物來說，纖維素是重要的能量來源，外源性添加纖維素酶能有效提高反芻動物對飼料養(yǎng)分的利用率，提高代謝能。然而，已有研究結(jié)果表明，單寧與纖維素酶存在特異性相互作用，單寧會抑制纖維素酶活性，干擾纖維的消化（邸凌峰，2018；Olsen等，2011）。體外試驗發(fā)現(xiàn)，額外添加纖維素酶可以降低可溶性單寧和縮合單寧的含量，增加了酶包體數(shù)量，可能抵消單寧造成的纖維素酶減少（He L等，2018）。因此，本試驗旨在探究單寧和纖維素酶作為飼料添加劑在育肥湖羊上的應用效果。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 單寧和纖維素酶均購買自某生物工程有限公司，單寧純度大于98%，纖維素酶活性為18000 U /g。

1.2 試驗設計 試驗在四川省某規(guī)模化肉羊養(yǎng)殖場進行，選擇體重接近[（24.47±1.31）kg]的育肥公湖羊60頭，隨機分為4組，預試期7 d后。然后試驗1、2、3組分別在對照組日糧的基礎上添加0.1%單寧、0.1%纖維素酶、0.1%單寧+0.1%纖維素酶，進行為期90 d的試驗。早晚飼喂，自由飲水，試驗所用飼日糧配方見表1。

表1 基礎日糧配方和營養(yǎng)水平（以干物質(zhì)為基礎）

1.3 指標測定

1.3.1 生長性能 在試驗第1天和第90天時稱量湖羊空腹體重，記錄每天的采食量，計算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及料肉比（FCR）。

1.3.2 養(yǎng)分表觀消化率 在試驗最后階段，連續(xù)采集7 d新鮮、無污染的糞便，用內(nèi)源指示劑法測定湖羊?qū)Ω晌镔|(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗脂肪（EE）、粗纖維（CF）和灰分（Ash）的表觀消化率。

1.3.3 腸道形態(tài) 試驗結(jié)束時禁食24 h，每組分別隨機選取5頭羊，用戊巴比妥鈉處死。打開腹腔，快速剝離小腸，分別剪取空腸、回腸中段用緩沖液沖洗，之后剪下一段（2～3 cm）固定于4%多聚甲醛中。之后將固定的小腸樣本進行石蠟組織切片，染色（H&E）后在顯微鏡下測量絨毛高度（VH）及隱窩深度（CD），并計算兩者比值（V/C）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 試驗數(shù)據(jù)用SAS 9.2軟件進行方差分析，采用Duncan法多重比較。結(jié)果以“平均值±標準誤”表示，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊生長性能的影響 由表2可知，與對照組相比，試驗2、3組湖羊ADG分別顯著增加25.3%、22.6%，F(xiàn)CR分別顯著降低 18.6%、17.9%（P＜0.05）。試驗1、2、3組湖羊平均末重較對照組分別增加2.0%、7.8%、6.9%（P＞ 0.05），試 驗 1組 湖 羊ADG較對照組增加7.3%（P＞0.05），F(xiàn)CR降低7.4%（P＞0.05）。

表2 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊生長性能的影響

2.2 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響 由表3可知，飼喂單寧或纖維素酶后湖羊?qū)︼暭Z中DM、CP、EE、Ash的消化率較對照組無顯著變化（P＞0.05）。而試驗2、3組湖羊?qū)︼暭Z中CF的消化率較對照組分別顯著提高9.5%、8.9%（P＜0.05），試驗1組湖羊飼喂單寧后對CP的消化率較對照組提高3.4%（P＞0.05），對CF的消化率降低3.8%（P＞0.05）。

表3 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響 %

2.3 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊腸道形態(tài)的影響 由表4可知，與對照組相比，試驗1、2、3組湖羊空腸CD分別顯著降低10.3%、9.9%、9.5%（P＜ 0.05），V/C分 別 顯 著 提 高13.7%、16.5%、14.4%（P ＜ 0.05）。 試 驗 2、3組湖羊回腸V/C較對照組分別顯著提高8.3%、12.2%（P＜0.05），試驗3組回腸V/C較試驗1組顯著提高10.3%（P＜0.05）。而試驗組湖羊空腸、回腸VH及回腸CD較對照組無顯著改變（P＞0.05），試驗3組回腸形態(tài)指標較試驗1、2組有一定改善，但未達顯著水平（P＞0.05）。

表4 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊腸道形態(tài)的影響

3 討論

3.1 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊生長性能的影響 在植物中單寧是一種含量豐富的酚類物質(zhì)，不同植物中的含量和結(jié)構(gòu)差異較大。研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加適量單寧對家畜生長、健康、繁殖等起到積極作用，尤其是反芻動物（李義海等，2018；李元恒等，2013）。同時，單寧作為抗營養(yǎng)因子，濃度過高時使家畜口腔產(chǎn)生干燥感從而降低采食，還能降低纖維素酶等的活性，導致營養(yǎng)消化率降低，影響動物生長（李義海等，2018）。研究報道，飼糧中添加2.0%的單寧酸可以顯著提高綿羊ADG，降低FCR，而添加量為1.0%、3.5%時，對其生長性能無顯著影響（薛樹媛，2011）。飼糧額外添加纖維素酶可以顯著提高動物增重率和飼料報酬，降低FCR（秦搏等，2014；毛倩倩等，2013；高春生等，2006），而飼糧中同時添加單寧和纖維素酶對動物生長的影響尚不清楚。本研究發(fā)現(xiàn)，飼喂單寧對湖羊生長有促進作用，但較對照組不顯著，而單獨添加纖維素酶時，湖羊ADG顯著提高，F(xiàn)CR降低。單獨添加單寧時湖羊生長性能改變不顯著與其添加量、來源、試驗對象有關。秦搏等（2014）報道，添加纖維素酶顯著提高刺參ADG，降低FCR，與本試驗結(jié)果一致。本研究還發(fā)現(xiàn)，單寧和纖維素酶同時添加，湖羊ADG顯著提高，F(xiàn)CR降低，飼喂效果好于單寧組，與纖維素酶組差異不顯著。這可能是由于單寧抑制了消化酶的活性，當外源性添加纖維素酶時補充了內(nèi)源性消化酶的不足，增加了機體對纖維素的利用，有促進生長的作用，但單寧與纖維素酶對湖羊生長性能的影響無顯著交互作用。

3.2 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響 本試驗發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加單寧時，湖羊?qū)︼暭Z中CP消化率較對照組提高3.4%，但對CF的消化率降低3.8%（P＞0.05）。在正常瘤胃環(huán)境下，單寧與胃內(nèi)蛋白形成沉淀，在皺胃和小腸前端釋放，從而抑制瘤胃微生物對蛋白的水解、脫氨作用，增加消化道對蛋白的利用（王衛(wèi)云，2017）。除此之外，單寧作用于胃腸細胞壁，促進纖維素酶分解，同時降低與纖維素分解有關的菌群活性，從而降低纖維素酶分泌量，因此，纖維素的利用受到抑制（Olsen等，2011）。我們還發(fā)現(xiàn)，在纖維素酶組和單寧加纖維素酶組中，湖羊?qū)︼暭Z中CP的消化率顯著高于對照組和單寧組。前人研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加纖維素酶能顯著增加草魚對CF等養(yǎng)分的消化率（高春生等；2006）。但也有報道顯示，飼糧中添加復合纖維素酶時，綿羊?qū)︷B(yǎng)分的消化率無顯著變化（辛總秀，2014）。這可能是由于適當添加纖維素酶能促進養(yǎng)分消化、利用，而添加不合理時會與其他內(nèi)源性酶相互作用降低酶活性，影響?zhàn)B分利用；此外，飼喂效果還與試驗對象等因素有關。

3.3 飼糧中添加單寧和纖維素酶對育肥湖羊腸道形態(tài)的影響 腸道健康及功能是反映動物健康狀態(tài)的重要指標之一，而生產(chǎn)性能提高通常被認為與腸道健康的改善相關。小腸是蛋白質(zhì)和氨基酸等養(yǎng)分最終吸收的重要器官，VH、CD及兩者比值是衡量其功能的關鍵指標，VH及V/C越高，表明腸道為營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收提供了更大的表面積（陳凌鋒等，2017）。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加單寧顯著降低湖羊空腸CD，提高V/C。而Dawson（1999）研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.5%的白堅木單寧會引起綿羊空腸和回腸黏膜組織細胞產(chǎn)生潰瘍。表明單寧添加量為0.1%時能促進湖羊腸道發(fā)育，而添加量過高對動物腸道發(fā)育有負面影響。另外，本試驗還發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加纖維素酶后湖羊空腸CD、提高空腸和回腸V/H顯著降低，表明纖維素酶能促進空腸和回腸的發(fā)育，最終促進營養(yǎng)物質(zhì)的利用，這可能是生長性能提高的原因之一。而當單寧和纖維素酶同時添加時也對湖羊小腸形態(tài)有顯著改善作用，尤其是回腸V/H顯著高于單寧組也略高于纖維素酶組。邸凌峰（2018）發(fā)現(xiàn)，飼糧中同時添加單寧和纖維素酶的瘤胃菌群多樣性顯著高于兩者單獨添加，這表明單寧與纖維素酶協(xié)同作用影響胃腸發(fā)育。

4 結(jié)論

飼糧中添加單寧顯著促進湖羊空腸發(fā)育，降低纖維素消化率，同時添加單寧和纖維素酶時顯著促進湖羊空腸和回腸發(fā)育，并且對纖維素的消化率也顯著提高。表明單寧和纖維素酶同時添加能顯著改善湖羊生長、養(yǎng)分利用及腸道發(fā)育，且飼喂效果優(yōu)于兩者單獨添加。