甘瀟,李洪軍,賀稚非*
1(西南大學 食品科學學院,重慶,400715) 2(綿陽師范學院 生命科學與技術學院,四川 綿陽,621000)
傳統中國臘肉是高鈉鹽肉制品。NaCl的過度攝入有導致發生高血壓、中風和冠心病的風險[1]。因此,研究低鈉鹽含量,但卻能保留傳統風味特色的臘肉產品極具意義。
KCl因其分子質量、咸味感、抗菌活性等與NaCl差異不大,常作為NaCl的替代鹽,是目前減少腌臘肉制品中NaCl含量得到最廣泛研究的鈉鹽替代品[2]。KCl影響肉制品品質變化的根本原因是其本身的苦澀味和金屬味。然而,臘肉在生產過程中肉組織發生了復雜的生物化學變化,如蛋白質氧化降解、脂質氧化降解和微生物發酵等,正是這些復雜的生化反應使得鮮肉轉變為具有特殊風味、滋味和質地等感官特性的臘肉[3-6]。此外,臘肉作為半發酵肉制品,微生物發酵在肉制品品質方面起著重要作用[7-8]。因此,若在臘肉生產中以KCl替代NaCl,臘肉體系所產生的生化的影響可能是影響肉品質的主要原因。
近年來,國內外學者一直致力于KCl不同比例替代對肉制品品質影響的研究[9-12],以及采用改變加工參數即加工技術[14]達到減少鈉鹽的目。關于低鹽臘肉加工關鍵時間點各理化指標及品質特征已有相關報道[15-16],但系統特征及理論尚未完全清晰。本文旨在考察低鈉鹽傳統中國臘肉制品關鍵加工時間點,如腌制、烘烤及成熟過程中理化品質的特征,以期更加充分了解KCl替代NaCl對產品品質的影響,為低鹽肉制品的生產加工提供理論參考。
1.1.1 原料和輔料
冷鮮豬后腿肉、食鹽、料酒、花椒粉、十三香、白糖等,重慶市北碚區永輝超市
1.1.2 藥品試劑
KCl、NaNO2、異抗壞血酸鈉,河南巧手食品添加劑有限公司;Ⅱ-普通山楂核煙熏香味料(食品級),濟南華魯食品有限公司;三氯乙酸、乙二胺四乙酸二鈉等,成都市科龍化工試劑廠,且檢測試劑均屬于分析純。
722型可見分光光度計,上海元析儀器有限公司;臺式高速離心機,德國Eppendorf公司;XHF-D高速分散器,寧波新芝生物科技股份有限公司;BSA323S 電子分析天平,賽多利斯科學儀器有限公司;pH計,德國Sartorius AG公司;數顯式肌肉嫩度儀,北京天翔飛域儀器設備有限公司;測色儀,美國 Hunter Lab 公司;康衛氏皿,海門市春博生物試驗器材公司;DGG-9240A 電熱恒溫鼓風干燥箱,上海森信實驗儀器有限公司。
1.3.1 加工工藝及樣品準備
臘肉的加工按照參考文獻[17]進行。冷鮮豬二刀后腿肉分割為長(15±2)cm,寬(3±0.5)cm的長方形塊狀。按照KCl質量分數替代NaCl比例的不同將分割的肉塊平均分成4個處理組:對照組(0% KCl,100% NaCl);A處理組(30% KCl,70% NaCl);B處理組(50% KCl,50%NaCl);C處理組(70% KCl,30% NaCl)。4個處理組腌制劑中總鹽含量均為肉質量的4%,然后輔以料酒、十三香等香料采用液腌法在溫度10 ℃的氣候箱腌制4 d,每天翻動1次。腌制后的肉塊浸漬到濃度為質量分數5%的Ⅱ-普通山楂核煙熏香味料溶液中液熏180 min。液熏后瀝干水分懸掛于50 ℃烘箱烘烤48 h,烘烤中翻動肉塊使受熱均勻。烘烤后將肉塊移出至10 ℃室內攤涼降溫后真空包裝。將真空包裝的肉樣保存在20 ℃的人工氣候箱中進行成熟。取樣時間點分別為鮮肉(RD),腌制完成(MD),烘烤完成(BD),成熟1周(RD1),成熟2周(RD2),3個重復。每個樣品收集60 g肉,真空包裝置于-40 ℃條件下儲存用于物理化學分析。
1.3.2 pH值的檢測
按照GB 5009.237—2016《食品安全國家標準 食品pH值的測定》進行檢測。
1.3.3 水分含量的檢測
按照GB/T 9695.15—2008《肉與肉制品 水分含量測定》方法測定。
1.3.4 水分活度(water activity, Aw)的檢測
按照GB 5009.238—2016《食品安全國家標準 食品水分活度的測定》方法測定。
1.3.5 蒸煮損失的檢測
參考李俠等[18]的方法進行蒸煮損失的檢測,肉塊瀝干水分后,準確稱取質量,密封于蒸煮袋中,80 ℃下水浴至肉的中心溫度為75 ℃,立即將肉取出用流水降溫至中心溫度為25 ℃,濾紙吸干肉表面的水分,然后稱量記錄,蒸煮損失計算如公式(1)所示:

(1)
1.3.6 剪切力的檢測
參考高海燕等[19]的方法適當修改,取測定完蒸煮損失的肉塊,沿肉肌纖維方向切成2 cm×1 cm×1 cm的肉樣,用肌肉嫩度儀垂直肉樣肌纖維方向切斷,記錄剪切力值(N),每個樣品重復剪切3次,取其平均值。
1.3.7 色值的檢測
采用測色儀測定色澤,測色儀先用校正板標準化,然后將切面平整的肉樣垂直緊扣在鏡口,測定并記錄L*(亮度值)、a*(紅度值)、b*(黃度值),每個樣品選擇3個位置測定,每個位置重復3次,取平均值。
1.3.8 蛋白降解指數的檢測
總氮(total protein nitrogen, TN)的測定參考《食品安全國家標準 食品中蛋白質的測定》(GB 5009.5—2010)第一號修改單進行測定。非蛋白氮(non-protein nitrogen, NPN)參考WU等[20]的方法測定,5 g碎肉與質量分數10%三氯乙酸以體積比1∶5均質處理,冰上冷卻過夜,4 ℃條件下5 000 r/min離心10 min,用whatman NO.4過濾,濾液用凱氏定氮法進行測試。蛋白質降解指數(protein degradation index, PI)如公式(2)計算:
PI=NPN/TN×100
(2)
1.3.9 硫代巴比妥酸值(thiobarbituric acid value, TBARS)的檢測
參考WANG等[21]的方法測定TBARS。取10 g絞碎肉樣,加入20 mL三氯乙酸溶液(質量分數20%),在3 000 r/min條件下均質處理60 s。隨后在5 500 r/min條件下冷凍離心15 min。過濾離心上清液后取5 mL于比色管中,加入相同體積的2-硫代巴比妥酸溶液(20 mmol/L)。將上述混合液在沸水浴中加熱處理20 min。冷卻至室溫后在532 nm處測定吸光度。
1.3.10 菌落總數的檢測
按照GB 4789.2—2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》方法測定。
1.3.11 臘肉感官評價的檢測
由20位(10男10女)來自不同地區的具有專業感官評定理論和實踐經驗的食品科學專業研究生組成的感官評定小組進行評價,對臘肉樣品的色澤、香氣、質地、滋味、咸度、異味等6個指標采用10分制進行嗜好程度感官評定。感官評定前,參評人員不能過餓或過飽,評定前用清水漱口,評定期間成員之間不得相互交流。具體感官指標衡量標準:色澤(10表示瘦肉呈玫瑰紅、肥肉透明呈乳黃色、皮呈金黃色或棕紅色、1表示瘦肉呈黑色、肥肉呈黃褐色、皮呈黑褐色或白色);香氣(10表示有濃郁的臘肉香氣,1表示無香氣);質地(10表示軟硬適中,1表示非常硬或非常軟);滋味(10表示臘肉滋味純正、品嘗不到金屬味或苦澀味,1表示過咸或過淡、有苦澀味或金屬味);咸度(10表示咸味醇正、咸淡適中,1表示過咸或過淡);異味(10表示無異味,1表示有極強的金屬味、苦澀味或酸味等異味)。每個評價指標權重不相同,綜合評分X=0.1×色澤+0.2×香氣+0.2×質地+0.2×滋味+0.1×咸度+0.2×異味,最終評分取其平均值。
運用SPSS 19.0進行統計分析。KCl不同比例替代的不同處理和加工的不同階段作為固定因子,肉樣重復(n=3)作為隨機因子,進行單因素方差(analysis of variance,ANOVA)分析,使用Tukey的顯著性差異檢驗在5%顯著性水平(P<0.05)確定所有統計分析中差異的顯著性,使用皮爾遜相關性分析(Pearson correlation analysis)評估臘肉加工過程中各理化指標與感官評價綜合評分的關聯性,并用主成分分析KCl不同比例替代對臘肉理化及感官評價的影響。用Origin 8.1軟件作圖。
KCl不同比例替代條件下臘肉加工過程中pH值的變化如圖1所示。隨著加工的進行,肉塊的pH值從鮮肉的5.95增加到腌制階段各處理組肉塊的6.11,6.08,6.02和5.98(P<0.05),然后逐漸降低到成熟2周階段各處理肉塊的5.54,5.46,5.42和5.34(P<0.05)。這可能是鮮肉塊在腌制加工過程中,腌制劑中的磷酸鹽緩沖液呈堿性從而提高了pH的原因[22]。

圖1 KCl不同比例替代臘肉加工過程中的pH值的影響Fig.1 pH value of Chinese bacon with different KClreplacement ratios注:不同小寫字母表示同一處理的差異顯著(P<0.05);不同大寫字母表示不同處理間差異顯著(P<0.05)(下同)
在隨后的加工過程中,各處理組臘肉塊的pH值呈現逐步降低的趨勢,這可能因為在腌制之后,烘烤之前肉塊有一個液熏的過程,而液熏液是呈強酸性的,因此肉塊的pH值也會隨之降低。此外,如圖1可見,隨著KCl替代比例的增加,臘肉塊的pH值呈降低的趨勢,這可能因為K+促進了乳酸菌的生長[23],而乳酸菌能夠產生乳酸[24],導致pH值降低,因此KCl替代臘肉的pH值比對照組臘肉低。
KCl不同比例替代條件下臘肉加工過程中水分含量和水分活度的變化如表1所示。

表1 KCl不同比例替代對臘肉加工過程中的水分含量及水分活度的影響Table 1 Moisture content and water activity of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
隨著加工的進行,各處理組臘肉的水分含量和水分活度逐漸降低(P<0.05)。水分含量的降低是臘肉形成其特殊質構特征的重要環節。在臘肉加工過程中,烘烤是形成臘肉質構的重要條件,通過外源熱傳遞的作用肌肉纖維束發生收縮,使存在于肌纖維束之間的水分被擠壓出來[25],導致肌肉本身的水分含量降低;另外在加熱過程中肌肉蛋白變性發生結構改變,蛋白疏水性增加,導致持水力下降[26],從而使得臘肉塊的水分含量降低。另外,在烘烤及成熟1周的樣品點,KCl 70%替代組(C)臘肉水分含量顯著高于其他配方組臘肉(P<0.05),而其他時間點肉樣之間水分含量無顯著差異(P>0.05)。這可能是因為KCl促進了肌肉蛋白的降解[16],即促進了細胞骨架蛋白、肌間線蛋白和肌動蛋白的水解,使肌原纖維束膨脹,肌原纖維之間結構更加疏松,從而使得水分能夠更加容易地從肌原纖維束的外部流入內部,增加了蛋白的保水性[27]。水分活度的降低是由于臘肉在腌制過程中腌制劑中鹽的解離作用,使得肉中的游離水減少,從而降低了Aw值。陳美春等[28]的研究發現四川臘肉生產過程中Aw值逐漸降低,與本試驗研究結果一致。另外,70% KCl替代臘肉塊從烘烤階段開始其Aw顯著高于對照組,與水分含量結果一致,這是因為70%KCl替代組臘肉從烘烤階段開始其水分含量高于對照組,其自由水含量更高,因此Aw值更高。
如圖2所示,在臘肉的生產過程中,鮮肉和腌制肉的蒸煮損失率顯著高于烘烤至成熟階段(P<0.05)。這是因為鮮肉和腌制肉塊本身水分含量高于烘烤失水后的肉塊,因此蒸煮損失率也更高。另外,腌制階段隨著KCl替代比例的提高,肉塊的蒸煮損失也隨之增加(P<0.05),而其他加工時間點,蒸煮損失變化無顯著差異。本研究中,KCl是按照質量分數替代NaCl,而KCl的摩爾質量大于NaCl,所以KCl替代組臘肉腌制液中的離子濃度降低,導致KCl替代組臘肉在腌制過程滲透進肉塊中的離子濃度少于對照組,而離子濃度對保水性有促進作用[29],因此在腌制階段KCl替代組臘肉的保水性差,蒸煮損失大。而烘烤加工后各處理組之間的蒸煮損失差異不顯著,可能是因為烘烤的過程中各處理肉塊失水嚴重,使得組間沒有差異。

圖2 KCl不同比例替代臘肉加工過程中的蒸煮損失變化Fig.2 Cooking loss of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
如圖3所示,隨著臘肉加工的進行,各處理組臘肉的剪切力呈現先降低再升高的趨勢,且顯著低于鮮肉階段,這是因為肉塊浸泡腌制過程中,腌制液里的鹽離子滲透到肌肉組織內與蛋白發生結合所致。HAMM等[30]指出NaCl對肌肉蛋白質的影響很可能是由于Cl-比Na+更緊密的與蛋白質結合,從而使得蛋白質負電荷增加,肌原纖維蛋白之間發生靜電排斥,最終使得肌原纖維蛋白膨脹,膨脹的肌原纖維蛋白結構更松弛,且持水力更高,因此腌制階段肉塊的剪切力小于鮮肉塊。而隨著臘肉加工的進行,剪切力呈現逐步增大的趨勢,這是因為臘肉在烘烤開始的過程中結締組織發生熱收縮,使得肉塊的韌性增加[26],隨著肉塊溫度的增加,肌原纖維蛋白發生變性,持水力降低,導致肉塊水分含量降低[31],從而使臘肉剪切力變大。另外,烘烤和成熟1周階段,KCl 70%替代組(C)臘肉剪切力顯著小于對照組和KCl 30%(A)替代組(P<0.05),與前面所述的水分含量結果相一致,KCl替代使得肉塊水分含量增加,從而剪切力降低。

圖3 KCl不同比例替代臘肉加工過程中的剪切力變化Fig.3 Shear force of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
KCl不同比例替代條件下臘肉加工過程中色度變化如表2所示。

表2 KCl不同比例替代臘肉加工過程中的色度Table 2 Chromaticity value of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
各處理組臘肉的亮度值(L*)呈現出從鮮肉到烘烤階段顯著增加然后降低的趨勢(P<0.05),這是因為肉塊的氧合肌紅蛋白(MbO2)在腌制過程中O2被NO置換后產生一氧化氮肌紅蛋白(MbNO),其具有更加明亮的紅色,且比Mb和MbO2更穩定,而且MbNO加熱(烘烤)的條件下更穩定,呈現出更高的亮度。這與夏楊毅[32]的研究結果一致。臘肉的紅度值(a*)在加工過程中,對照組、30%和70%處理組呈現出先降低后升高的趨勢。這是因為MbNO的產生促進了a*值的增加。各處理組臘肉的黃度值(b*)在加工過程中呈現降低的趨勢,因為MbNO的亮紅色促進了b*值的降低。另外,試驗中發現有同一肉塊相鄰部分(1 cm左右)的色值相差很大的情況,這是因為同一肉塊相鄰部分的肌紅蛋白的含量可能相差數百倍[33],這種現象形成的原因目前很難解釋。
如圖4所示,隨著加工的進行,各配方臘肉組織的蛋白降解指數呈逐漸增加的趨勢(P<0.05),在成熟2周時間點臘肉蛋白降解指數降低(P<0.05)。這說明從腌制階段開始肌肉蛋白質發生了明顯的降解,當臘肉塊成熟到2周的時候,蛋白的降解指數降低,可能是因為降解的蛋白質產物如游離氨基酸等與脂肪氧化產物羰基類物質發生進一步的反應(羰氨反應)[34],使得非蛋白氮含量降低,從而蛋白降解指數降低。此外,在臘肉加工的烘烤階段直到成熟的第2周,KCl替代組臘肉的蛋白降解指數顯著高于對照組(P<0.05),這可能是由于KCl替代促進了蛋白質降解。GAN等[16]研究發現在臘肉加工過程中KCl的部分替代可以促進蛋白質的降解。

圖4 KCl不同比例替代臘肉加工過程中的蛋白降解指數變化Fig.4 Protein degradation index of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
如圖5所示,在臘肉加工的過程中TBARS在各配方組都逐漸增加(P<0.05),尤其是烘烤階段TBARS的增加率高于其他階段,說明臘肉在加工過程中發生了脂質的氧化反應,且高溫烘烤條件下脂質反應更劇烈,因為高溫條件更容易破壞肌肉細胞膜,并從肌紅蛋白中釋放非血紅素鐵,更容易引起脂質氧化[6]。有研究表明,在臘肉生長的最后階段TBARS值出現顯著降低的趨勢[35],這可能是由于醛類本身的降解或與其他化合物如美拉德反應中間體發生反應等[34]。本研究中未觀察到TBARS的下降趨勢,可能是因為本實驗僅考察了0~21 d內TBARS值的變化,臘肉的TBARS值在此期間還沒有降低。另外,KCl替代對臘肉加工前期的脂質氧化無顯著差異(P>0.05),在臘肉的成熟1周和2周的期間,KCl 70%替代組臘肉TBARS值顯著低于對照組(P<0.05),這與HORITA等[36]的研究一致,他們分別用4種鹽NaCl,KCl,CaCl2和MgCl2以不同比例混合對博洛尼亞腸進行加工,在5 ℃條件下貯藏60 d,從TBARS看,KCl和CaCl2的促氧化能力低于NaCl和MgCl2,這可能與Cl-在促脂質氧化反應中的作用有關[37]。因對照組臘肉塊中的Cl-濃度高于KCl替代組,因此替代組臘肉呈現出較低水平的脂質氧化。

圖5 KCl不同比例替代臘肉加工過程中的TBARS變化Fig.5 TBARS of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
如圖6所示,各配方組臘肉在加工過程中菌落總數呈增長的趨勢(P<0.05)。
圖6 KCl不同比例替代臘肉加工過程中的菌落總數Fig.6 Viable counts of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
從鮮肉到腌制肉階段,肉塊中的菌落總數顯著增加(P<0.05),這是因為在腌制過程中肉塊中本身攜帶和環境中富集的微生物都呈指數增長,且微生物的增長能力比腌制液中鹽離子對微生物的抑制能力更強。從腌制階段到烘烤階段,肉塊中的菌落總數顯著增加(P<0.05),說明微生物的增長能力比高溫(50 ℃)烘烤對微生物的抑制能力更強,且很多乳酸菌有一定的耐熱性[38]。從烘烤到成熟后期,各配方組臘肉塊的菌落總數無顯著增加,說明隨著發酵時間的延長,作為優勢菌的乳酸菌產生的細菌素抑制了其他細菌的生長,從而使得菌落總數變化不顯著。另外,KCl不同比例替代對臘肉塊的菌落總數無顯著影響。這與YOTSUYANAGI等[12]的研究結果一致,NaCl含量的減少對法蘭克福香腸的菌落總數無顯著影響。
如表3所示,從顏色、香氣、質地、滋味、咸度、異味感、整體接受程度等幾個方面對臘肉進行評價。從顏色指標評價看,30%KCl替代肉塊得分顯著高于其他組(P<0.05)。而從香氣指標評價看,KCl的50%、70%替代組得分顯著低于對照組和30%替代組(P<0.05)。30%KCl替代組臘肉質地評價得分顯著低于其它配方組(P<0.05)。KCl 50%和70%替代組臘肉滋味評價得分顯著低于對照組和30%替代組(P<0.05)。由咸度評價指標可見,30%、50%和70%替代組的評價得分均顯著低于對照組(P<0.05)。由異味評價指標可見,隨著KCl替代比例的增加,感官評價得分顯著降低(P<0.05)。從整體接受度看,KCl 50%和70%替代組臘肉評價得分顯著低于對照組和KCl 30%替代組(P<0.05)。而從權重分數看,70%KCl替代組臘肉得分顯著低于其他各組(P<0.05)。因此,從感官評價的角度,采用KCl替代NaCl降鈉鹽的方式對臘肉制品的香氣和滋味有一定程度的影響。ARMENTEROS等[39]試驗發現,KCl 50%替代對火腿的滋味有顯著影響,與本試驗的研究結果一致。這可能是因為KCl本身的苦澀味、金屬味及KCl區別于NaCl對臘肉蛋白質、脂肪的氧化降解的影響造成的風味物質的改變[40-41]。

表3 KCl不同比例替代臘肉的感官評價得分Table 3 Sensory scores of Chinese bacon with different KCl replacement ratios
KCl不同比例替代臘肉的感官評價得分與理化指標的皮爾遜相關性分析如表4所示。感官評價綜合得分與pH值和蛋白降解指數呈極顯著相關(P<0.01),與水分活度呈顯著相關(P<0.05),與其他理化反應指標相關性不顯著(P>0.05)。pH值是影響水分含量及水分活度進而影響肉制品微生物水平的重要因素,從而間接影響肉品品質。蛋白降解指數是反映蛋白質降解的指標,在其降解過程中部分大分子的蛋白質分解為低分子物質,如肽、氨基酸、醛類等,這些物質或本身屬于風味物質,或者是風味物質的重要前體物質,可以通過進一步的Strecker降解反應或美拉德反應生成風味化合物[42-43]。因此蛋白降解指數主要反映了肉品的風味特性,說明風味特性與感官評價顯著相關。

表4 KCl不同比例替代臘肉感官評價與理化指標的皮爾遜相關性分析Table 4 Pearson correlation analysis of sensory and physicochemical indices of Chinese bacon with differentKCl replacement ratios
注:*,P<0.05; **,P<0.01
通過前文的皮爾遜相關性分析,了解了與感官評價相關性最大的理化因素,在此基礎上進一步進行了理化指標及感官具體組成的主成分分析,考察這些指標對臘肉整體品質的貢獻程度及其相互關系。如圖7-A所示,第1主成分的貢獻率為52.5%,前2個主成分的貢獻率為70.1%。
如圖7可見,蛋白降解指數,水分活度,感官評價(香味,滋味,異味,咸度),pH值等的第1主成分值較高,說明它們對臘肉品質影響的總體貢獻大。其中蛋白降解指數,水分活度在第1主成分的負軸位置,與感官評價(香味,滋味,異味,咸度),pH值等對臘肉品質的影響相反。蛋白質的過度降解會影響到風味物質的組成成分,從而對肉制品的整體風味有一定的影響。WU等[10]研究證明在干腌臘肉加工過程中,利用KCl 70%比例替代NaCl會顯著增加肉品的揮發性風味物質成分,從而改變傳統干腌肉的風味,與本研究的結果一致。從圖7-B樣本在2個主成分上的載荷圖可見,KCl不同比例替代對臘肉理化品質有程度不同的影響。對照組更有利于感官評價得分,KCl 70%比例替代組樣品顯示最強的促蛋白降解作用,并且與感官評價呈負相關。

圖7 KCl不同比例替代臘肉理化和感官評價(A),KCl不同比例替代對理化及感官的影響(B)在前兩個主成分上的載荷圖Fig.7 Projection of physicochemical indices and sensory evaluation (A), and the effect of different ratios of KCl on physicochemical indices and sensory evaluation(B) onto the space defined by the principal components (PC#1/ PC#2)
在本實驗的加工工藝及配方條件下,KCl不同比例替代NaCl臘肉在生產過程中肉塊的pH值先升高后降低,水分含量、水分活度和蒸煮損失逐漸降低,剪切力先降低再升高,蛋白降解指數、TBARS和菌落總數逐漸升高。而KCl的替代使得臘肉的pH值降低,烘烤之后的水分含量和水分活度升高,烘烤階段及成熟1周的剪切力降低,腌制階段的蒸煮損失升高,烘烤之后的蛋白降解升高,成熟后期的脂肪氧化降低,對色值和菌落總數影響不顯著。通過感官評價發現KCl高比例替代NaCl會影響臘肉的香味和滋味。最后通過皮爾遜相關性和主成分分析發現,臘肉的感官評價與pH、水分活度和蛋白降解指數顯著相關。