康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力測定

楊廣明 王興紅 黃振興 劉曼

（1 貴州省生物研究所，貴陽 550025；2 貴州省養蜂學會，貴陽 550001）

大蠟螟（Galleria mellonellaL.）隸屬鱗翅目（Lepidoptera）、螟蛾科（Pyralidae）、蠟螟亞科（Galleriinae）、蠟螟屬（Galleria Fabricius），又名巢蟲、綿蟲、隧道蟲，是中華蜜蜂（Apis cerana cerana）最主要的蟲害之一[1，2]。大蠟螟是世界性大害蟲，分布廣泛，主要以幼蟲危害蜜蜂，1～2 齡幼蟲沿著巢脾內有蜜蜂幼蟲殘余物及繭衣的巢房蛀食巢脾，駐壞蜂具[3]；3～4 齡幼蟲會造成蜜蜂的蛹和幼蟲死亡，出現“白頭蛹”，若不及時處理，輕則子脾受損、群勢下降、產蜜量減少，重則整群蜂巢脾被毀，蜂群棄巢而逃，給養蜂業造成嚴重的經濟損失[3，4]。

目前，大蠟螟的防治手段形式多樣，主要包括物理防治[5-7]、化學防治[3，8]、生物防治[9]及飼養管理防治[8]。物理防治因成本過高在我國尚難以大范圍推廣，生物防治則因技術要求高、效果緩慢且不穩定在應用中也很受局限，化學藥劑的長期大量使用使得害蟲種群抗藥性和藥劑殘留問題日益突出。因此，篩選高效、低毒、符合國家用藥標準的綠色防控技術十分重要，而關于大蠟螟綠色防控方面的研究報道較少，僅集中在尋找有效的生物源農藥方面。如Zaitoun測定了21種植物提取液對大蠟螟發育的影響并評價其對工蜂的毒性，結果表明，其中4種植物提取液對大蠟螟幼蟲有毒殺作用，致死率為95%～100%，且對工蜂無影響[10]；另外，Feldlaufer等研究了甾醇代謝抑制劑ILP-12（N，N-二甲基十二胺）對大蠟螟的控制能力，結果顯示，巢脾在2.5mg/g的藥物濃度下，幼蟲的發育完全受到抑制，大蠟螟對蜂巢沒有造成損壞[11]。康寬作為一種新型、高效、低毒、低殘留、廣譜型殺蟲劑，近幾年已被廣泛用于農業害蟲的防控，特別對鱗翅目害蟲的毒力活性高、持效期長、安全間隔期短[12，13]，且對天敵友好，對哺乳動物、魚類和鳥類的毒性極低，對農產品無殘留影響[14，15]。目前，國內有關康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力尚未見報道。

因此，為探索安全、有效防控大蠟螟的新途徑，本研究選擇康寬（20%氯蟲苯甲酰胺）作為供試藥劑，測定其對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力，以期為大蠟螟的田間防治和藥劑的合理使用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

供試蟲源為貴州省生物研究所害蟲生物防控實驗室人工飼養的大蠟螟種群。采用人工飼料在智能人工氣候箱飼養，飼養條件如下：溫度（35±0.5）℃、相對濕度（60±10）%、全黑條件。分別挑選大小一致、健康的1齡、4齡、6齡初期幼蟲備用。

1.2 供試藥劑

康寬（有效成分：氯蟲苯甲酰胺），200g/L，懸浮劑，美國杜邦公司生產。根據預實驗結果，將供試藥劑配成如下濃度：1齡幼蟲：用自來水按等比法配制成12.00、4.00、1.33、0.44、0.15mg/L共5個濃度；4齡幼蟲：用自來水按等比法配制成33.33、11.11、3.70、1.23、0.41mg/L共5個濃度；6齡幼蟲：用自來水按等比法配制成6個濃度（200.00、100.00、50.00、25.00、12.50、6.25mg/L）。

1.3 試驗方法

采用胃毒法測定康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的室內毒力。用電子天平稱取若干等量大蠟螟人工飼料，置于鼓風干燥箱中烘干水分，備用。用移液槍吸取等量不同濃度藥液滴在人工飼料上，移入培養皿中央，然后引入20頭大小一致、活力強的大蠟螟1齡幼蟲，試蟲處理后置于溫度（35±0.5）℃、相對濕度（60±10）%、全黑暗環境的人工氣候箱內培養，藥后72 h檢查各處理幼蟲的死亡情況，用細毛筆將幼蟲輕輕翻轉，腹部向上，以幼蟲不能自主活動視為死亡標準，同時挑出死蟲，統計死亡數。試驗設3次重復，以自來水作為對照。以同樣的方法處理4齡幼蟲和6齡幼蟲。

1.4 數據分析

1.4.1 計算方法

根據試驗調查原始數據，計算各處理的死亡率和校正死亡率。

M1（%）=K /N×100

式中：M1為死亡率，K為死亡蟲數，N為處理總蟲數。

M2（%）=（Mt- M0）/（1-M0）×100

式中：M2為校正死亡率，Mt為處理死亡率，M0為空白對照死亡率。

1.4.2 統計分析

采用Excel 2007軟件計算死亡率及校正死亡率，利用SPSS 21.0軟件進行相關分析和回歸分析，得出相關系數、毒力回歸方程、致死中濃度（LC50）及95%置信區間。所有描述性統計值均用平均數加減標準誤（Mean±SE）表示。相對毒力倍數=6齡幼蟲LC50/其他齡期幼蟲LC50，以6齡幼蟲的相對毒力指數為1。

2 結果與分析

2.1 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的殺蟲活性

康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的殺蟲活性測定結果見表1。結果表明，康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲均具有毒殺活性，且隨著供試藥劑濃度增大，大蠟螟幼蟲死亡率逐漸上升，呈明顯的劑量-效應關系。隨藥劑濃度降低，1齡幼蟲的校正死亡率分別為91.23%、51.67%、30.97%、15.44%、5.17%，4齡幼蟲的校正死亡率分別為93.25%、62.81%、33.95%、18.60%、5.09%，6齡幼蟲的校正死亡率分別為91.67%、73.33%、60.00%、40.00%、20.00%、5.00%。其中，康寬對大蠟螟1齡幼蟲的致死作用最強，要使大蠟螟幼蟲的死亡率達到90%以上，1齡幼蟲所需藥劑濃度僅約為12mg/L，4齡幼蟲所需藥劑濃度約為33.33mg/L，6齡幼蟲所需藥劑高達200mg/L左右，約為1齡幼蟲的17倍，4齡幼蟲的6倍。可見，1齡幼蟲對藥劑最敏感，4齡、6齡幼蟲敏感性逐漸下降。

表1 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的殺蟲活性

表2 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力測定

2.2 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力測定

康寬對大蠟螟1齡、4齡、6齡幼蟲的毒力回歸方程、相關系數及致死中濃度LC50值見表2。結果表明，胃毒處理72h后，康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力隨著蟲齡的增加而逐漸降低，大小順序為：1齡幼蟲＞4齡幼蟲＞6齡幼蟲。其LC50值分別為2.430mg/L（1.204～5.534mg/L）、5.661mg/L（4.337～7.434mg/L）和40.071mg/L（33.031～48.620mg/L）。以康寬對6齡幼蟲的毒力為1，對4齡幼蟲的相對毒力倍數為7.078，對1齡幼蟲的相對毒力倍數為16.490。

3 結論與討論

有研究表明，害蟲幼蟲隨蟲齡增大，體重增加，體內的一些水解酶、解毒酶活性也隨之增強，從而使其耐藥能力提高，因此對藥劑的敏感性下降[16，17]。本研究中，康寬（20%氯蟲苯甲酰胺）對大蠟螟的殺蟲活性隨著幼蟲齡期的增大而降低，用藥72h后，康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力大小順序依次為：1齡幼蟲＞4齡幼蟲＞6齡幼蟲。其原因可能與大蠟螟幼蟲蟲齡增加，耐藥能力增強有關。本試驗所用藥劑康寬具有速效性，同時具有低成本、低毒、低殘留、無公害等生物農藥的特點，綜合成本和藥效，康寬值得推薦用于防控大蠟螟。另外，大蠟螟初孵幼蟲有上脾的習性，1～2齡幼蟲經框耳爬上框梁，然后蛀入巢脾，上脾率達90%以上，初孵幼蟲上脾引起的工蜂咬脾清巢防衛反應，可為掉落箱底的幼蟲及其后期發育取得食料，且1～2齡幼蟲體小、爬行速度快、靈活，不易被工蜂發現，3齡以上幼蟲體大，易被工蜂發現驅趕，能上脾為害的較少[1，18]。因此，綜合本研究結果及大蠟螟的危害特點，建議生產中選擇對殺蟲劑敏感性較強的低齡幼蟲期為最佳防治時期。

本研究中，康寬對大蠟螟1齡、4齡、6齡幼蟲的致死中濃度（LC50）分別為2.430mg/L、5.661mg/L和40.071mg/L。這一結果與康寬對其他鱗翅目昆蟲的毒力存在一定的差異，如康寬對大螟Sesamia inferens1齡幼蟲的LC50值為1.133mg/L，對3齡幼蟲的LC50值為44.733mg/L[19]；康寬對草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda4齡幼蟲的LC50值僅為1.93mg/L[20]；康寬對豆莢螟EtieLLa zinckeneLLa和二化螟ChiLo suppressaLis3齡幼蟲的LC50值分別為0.490mg/L和8.740mg/L[21，22]，這可能是由于不同害蟲的個體大小、食性、抵抗能力等生物學特性差異所致。

本試驗雖未涉及田間藥效，但采用的胃毒測定方法比較接近田間殺蟲劑毒殺害蟲的作用方式，可為康寬的田間用量提供參考。另外，在應用該藥時，應當建立長期的監測機制，及時監測大蠟螟的抗藥性動態，制定合理的殺蟲劑輪換用藥策略，指導科學用藥，這將有助于大蠟螟的可持續防治。