還原氨氧化衍生法結(jié)合高效液相色譜-熒光法檢測葡萄酒中三種芳香醛

茅 龍， 汪 耀， 何振宇*， 林亞維*

(1.武漢理工大學(xué)化學(xué)化工與生命科學(xué)學(xué)院，湖北武漢 430070；2.武漢市洪山區(qū)疾病預(yù)防控制中心，湖北武漢 430060)

在葡萄酒的釀造和陳化中，氧化作用十分重要，它可改變葡萄酒色澤和香氣并產(chǎn)生多種揮發(fā)性物質(zhì)[1 - 3]，這些物質(zhì)就含有芳香醛類化合物。芳香醛雖然在葡萄酒中含量較低，但可對葡萄酒的香氣產(chǎn)生很大影響[4，5]，因此對葡萄酒中的芳香醛進行檢測是極具意義的。醛類化合物檢測常用的方法是氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)和液相色譜法(LC)。GC-MS法具有良好的分離和檢測的能力，但醛類化合物的穩(wěn)定性差，需要對其進行衍生[6 - 12]。而且葡萄酒基質(zhì)較為復(fù)雜，還需要復(fù)雜的樣品前處理步驟，如固相萃取、固相微萃取[13 - 15]等。此外，GC-MS法儀器價格較為昂貴，這也限制了該方法的廣泛應(yīng)用。相較于GC-MS法，高效液相色譜-熒光檢測法(HPLC-FLD)受基質(zhì)影響較小，但部分醛類化合物熒光較弱，因此可通過衍生化來增強其光學(xué)響應(yīng)。熒光衍生試劑衍生結(jié)合HPLC-FLD法檢測可極大提高檢測靈敏度，常用試劑有丹磺酰肼(DNSH)[16，17]，但是該法通常需要加熱不利于揮發(fā)性醛類，而且產(chǎn)物還存在同分異構(gòu)現(xiàn)象。

本研究利用熒光衍生試劑4-氨氧基甲基-7-羥基-香豆素(AOHC)，發(fā)展了一種新型醛類熒光衍生化方法，利用硼烷-2甲基吡啶絡(luò)合物(2-PB)[18]的還原作用可以得到結(jié)構(gòu)單一的衍生產(chǎn)物(圖1)。我們通過對多個衍生條件參數(shù)的優(yōu)化得到了較高的衍生化效率，并將該方法成功用于葡萄酒分析。本方法分離效果好，準(zhǔn)確性高，不需要復(fù)雜的萃取步驟，為葡萄酒中芳香醛類合物的分析提供了一種可行的方法選擇。……