2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者GP73水平的檢測及臨床意義

杜慶瑋 高錦 李克誠 施軍平

我國非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的患病率已逐年升高。NAFLD是代謝綜合征（MS）累及肝臟的表現(xiàn)，與肥胖、糖尿病、高血壓、高脂血癥等代謝性疾病密切相關(guān)［1］。其中2 型糖尿病（T2DM）與NAFLD 間有一定的內(nèi)在關(guān)系，且相互影響，與一般人群比較，T2DM 患者中NAFLD 的發(fā)病率較高，約為45%~75%。早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)有利于疾病的預(yù)后，目前診斷和評估NAFLD/NASH 的組織學(xué)特征的金標(biāo)準(zhǔn)仍是肝臟活檢。肝活檢為有創(chuàng)檢查，存在抽樣誤差，可能導(dǎo)致某些并發(fā)癥。高爾基體蛋白（golgiprotein73，GP73）是一種主要表達(dá)于肝臟膽管上皮細(xì)胞的高爾基體Ⅱ型跨膜蛋白［2］，可作為早期診斷肝癌的特異性標(biāo)志物［3］，有研究表明檢測慢性HBV 感染患者血清GP73 水平有助于肝纖維化程度的判定［4］。本文探討GP73 作為判斷T2DM 是否合并NAFLD 的發(fā)生及進(jìn)展的血液學(xué)指標(biāo)應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017 年11 月至2018 年5 月浙江省瑞安市人民醫(yī)院就診的T2DM 患者30 例，男22例，女8 例；年齡17~70 歲，平均年齡（50±12）歲。非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者122 例，男84例，女38 例；年齡17~71 歲，平均年齡（44±13）歲。T2DM 合并NAFLD 患者41 例，男35 例，女6 例；年齡15~75 歲，平均年齡（49±15）歲。同時選取同期年齡、性別與病例組匹配的健康體檢者33 例為正常對照組（NC 組），其中男21 例，女12 例；年齡21~95 歲，平均年齡（46±15）歲。糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會2013 年版的中國2 型糖尿病防治指南，且均為初治患者。非酒精性脂肪肝的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組2010 年修訂的非酒精性脂肪肝肝病診療指南。排除標(biāo)準(zhǔn)：病毒性肝炎、酒精性肝病、中毒性肝炎、藥物性肝炎、自身免疫性肝炎、經(jīng)治2 型糖尿病患者等。

1.2 方法 （1）肝臟硬度與血清肝功能指標(biāo)的檢測：所有患者采用FibroScan 檢測儀（法國Echosens 公司生產(chǎn)）測量肝臟瞬時彈性硬度，采集受控衰減參數(shù)理論CAP 值和E 值，進(jìn)行10 次成功檢測后采取中位數(shù)作為最終測定結(jié)果，肝臟硬度值（LSM）采取（kPa）表示。同時于當(dāng)日采集靜脈血進(jìn)行生化指標(biāo)如丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）等的檢測。（2）血清GP73 水平檢測：每位患者進(jìn)行生化指標(biāo)檢測采集的靜脈血，3500r/min 離心10min 后，吸取一份血清，-80°深低溫冰箱保存。采用ELISA 法測定血清GP73 水平，GP73 試劑盒購自北京熱景生物技術(shù)有限公司，檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，顯色后使用瑞士帝肯sunrise 酶標(biāo)儀進(jìn)行比色分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 24.0 統(tǒng)計軟件。近似正態(tài)分布計量資料以（±s）表示，多組比較采用方差分析；非正態(tài)分布以M（Q1、Q3）表示，采用Kruskal-Wallis 檢驗。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同人群血清GP73 水平的比較 NAFLD 組及T2DM 合 并NAFLD 組GP 73 檢 測 結(jié) 果 分 別 為（76.19±41.38）ng/ml 和（73.36±42.00）ng/ml， 較正常對照組（46.22±19.01）ng/ml 和單純T2DM 患者組（38.13±28.50）ng/ml 高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。NAFLD 患者組與T2DM 合并NAFLD 患者組以及單純T2DM 與健康體檢組血清GP73 水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P 均>0.05），見表1。

表1 各組患者GP73檢測結(jié)果比較（±s）

表1 各組患者GP73檢測結(jié)果比較（±s）

注：與NC組比較，* P<0.05；與T2DM組比較，△P<0.05

組別 n GP73（ng/ml）T2DM組 30 38.13±28.50 NAFLD組 122 76.19±41.38*△T2DM合并NAFLD組 41 73.36±42.0*△NC組 33 46.22±19.01

2.2 血清GP73 對非酒精性脂肪性肝病的診斷價值 采用ROC 曲線進(jìn)行分析。ROC 曲線下面 積 為0.792（95%CI：0.733~0.843）（P<0.0001），見圖1。根據(jù)Youden 指數(shù)最大值為0.5248，將cut-off 值設(shè)定為59.22ng/ml，GP73 診斷NAFLD 的敏感性和特異性分別為69.94% 和82.54%。

圖1 GP73診斷NAFLD 的ROC曲線分析

2.3 GP73 與其他檢測指標(biāo)的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析結(jié)果顯示：GP73 與ALT、AST、GGT、CAP、E 均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為r=0.221、0.152、0.232、0.214、0.285，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見圖2。

圖2 血清GP73與ALT、AST、GGT、CAP和E的相關(guān)性

3 討論

2000 年美國學(xué)者Kladney 等［2］發(fā)現(xiàn)GP73 在肝癌患者中顯著升高，可作為肝癌的一個血清標(biāo)志物［3-4］。此后，國內(nèi)外眾多學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，GP73 不僅在肝癌中高度表達(dá)，在其他一些肝病中也顯著升高。如Iftikhar 等［5］學(xué)者發(fā)現(xiàn)在急性肝炎、慢性丙型肝炎病毒感染、自身免疫性肝炎及酒精性肝病患者中GP73 也有不同程度的升高，且在急性肝炎與自身免疫性肝炎中升高尤為顯著。

NAFLD 已取代慢性乙型肝炎成為我國最常見的慢性肝病［6］，NAFLD 和2 型糖尿病作為代謝綜合征的組成成分，常相伴存在，越來越多證據(jù)顯示NAFLD與T2DM 是相互影響、相互作用的［7-10］。魏紅山等［7］研究表明肝細(xì)胞脂肪變會導(dǎo)致血清GP73 水平顯著升高。本資料結(jié)果顯示，與正常對照及單純T2DM 患者比較，NAFLD 及T2DM 合并NAFLD 患者GP73 水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，而GP73 在T2DM 組與健康體檢組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，表明GP73 的升高與非酒精性脂肪性肝病有關(guān)，與單純2 型糖尿病無關(guān)。以健康體檢和單純T2DM 為對照組，利用ROC 曲線分析GP73 對NAFLD 的診斷效能，結(jié)果顯示曲線下面積為0.792（95%CI：0.733~0.843），表明血清GP73 水平作為NAFLD 的診斷指標(biāo)有一定的臨床意義。余紅艷等［11］研究顯示，2 型糖尿病促使NAFLD 向非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纖維化、甚至肝細(xì)胞癌發(fā)展，增加肝臟相關(guān)死亡率。應(yīng)筱雯等［12］研究顯示，GP73與肝纖維化及血清HA 水平呈正相關(guān)，且纖維化越嚴(yán)重GP73 表達(dá)水平越高。本資料結(jié)果顯示，GP73 水平與評估肝纖維化程度的肝臟瞬時彈性檢測的E 值［13］呈正相關(guān)（P<0.05），提示GP73 可作為NAFLD 患者發(fā)生肝臟纖維化的預(yù)估指標(biāo)。本資料結(jié)果顯示，血清GP73 與ALT、AST、GGT 等指標(biāo)均呈正相關(guān)，可能原因為肝細(xì)胞損傷觸發(fā)GP73 水平上升，但相關(guān)系數(shù)不高。與許文芳等［14］的研究結(jié)果一致。

綜上所述，GP73 在NAFLD 及T2DM 合并NAFLD患者中均升高，且與肝細(xì)胞損傷與肝纖維化有關(guān)，GP73 作為診斷NAFLD 的指標(biāo)敏感度和特異性尚可，可作為判斷T2DM 是否合并NAFLD 及發(fā)生肝纖維化進(jìn)展的一項血清學(xué)指標(biāo)。