發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞產蛋性能、雞蛋品質、血清生化指標和腸道菌群結構的影響

曾李 倪冬姣 熊愛軍 張增玉 邢深 吳日紅 邢孔萍 郭麗 盧秋詠

摘? 要：本試驗旨在研究發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞的產蛋性能、雞蛋品質、血清生化指標以及腸道菌群結構的影響。試驗選取1 200羽150日齡的海蘭褐蛋雞，并隨機分入2個組，每個組設2個重復，每個重復飼養300羽蛋雞。對照組蛋雞飼喂基礎日糧，試驗組蛋雞飼喂由基礎日糧和添加4%發酵茶籽粕后組成的日糧，試驗期30 d。結果表明，與對照組蛋雞相比，試驗組蛋雞：（1）產蛋率提高2.81%（P<0.05），破蛋率顯著降低（P<0.05）;（2）所產雞蛋的品質提高，蛋殼厚度和蛋殼強度分別提高了10.53%（P<0.05）和11.96% （P<0.05），蛋黃高度、蛋黃顏色和哈氏單位均有不同程度的提高（P>0.05）;（3）血清中尿酸含量顯著降低? ? ? ? ?（P<0.05），總蛋白、白蛋白、葡萄糖和甘油三酯的含量有所下降（P>0.05）;（4）回腸和盲腸中的乳酸菌含量顯著提高（P<0.05），大腸桿菌和沙門氏菌的含量顯著下降（P<0.05）。綜上所述，在飼料中添加4%發酵茶籽粕，能顯著提高蛋雞的產蛋性能和雞蛋品質，調節腸道微生物菌群的結構，有利于蛋雞腸道健康。

關鍵詞：發酵茶籽粕;海蘭褐蛋雞;產蛋性能;雞蛋品質;血清生化指標;腸道菌群

中圖分類號：S816 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2020）03-0067-06

我國是油料生產和消耗大國，除大豆外，每年榨取各類油脂后，能剩下1 500萬t以上的各種餅粕。由于受多種因素的制約，餅粕在飼料中應用不足30%[1]，大量餅粕只能簡單用作肥料或者廢棄，不但浪費資源，而且嚴重污染環境。在當前集約化規模養殖生產與生態環境保護相矛盾的情況下，有效合理地利用餅粕成為研究熱點。茶籽粕是茶籽提取茶油后剩下的殘渣，據統計我國每年有近百萬噸茶籽粕未被有效利用。由于加工工藝的不同，茶籽粕含有濃度高低不等的茶皂素以及單寧等抗營養因子，同時還含有較高水平的植物多糖、多酚和類黃酮等功能性營養成分[2-4]。微生物發酵可以降解茶籽粕中的抗營養因子，提高發酵料中有機酸和小肽的含量，降低茶籽粕中粗纖維的含量。發酵茶籽粕的生產工藝要求低，生產成本不高。本研究主要是選取海蘭褐蛋雞，在蛋雞基礎日糧中添加發酵茶籽粕，探討其對海蘭褐蛋雞生產性能、雞蛋品質、血清生化指標以及腸道菌群結構的影響情況，為發酵茶籽粕在蛋雞生產中的科學應用提供依據。

1? 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 發酵菌種

枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌均由農業農村部生物飼料重點實驗室提供。

1.1.2 發酵茶籽粕

混合發酵菌種為乳酸菌、酵母菌和枯草芽孢桿菌，按5∶4∶1的比例混合。茶籽粕、玉米和豆粕按8∶1∶1的比例混合，隨后均勻粉碎作為發酵底物。初始發酵條件為：pH=6～7，溫度為30 ℃～32 ℃，發酵水分28%～30%，固態密閉發酵7 d后，儲存備用。發酵茶籽粕的營養成分指標見表1。

1.1.3 試驗日糧

基礎日糧由播恩生物技術股份有限公司提供。日糧組成及營養水平參照NRC和海蘭褐育種公司蛋雞營養標準配制，見表2。

1.1.4 試驗動物

150日齡健康的海蘭褐蛋雞1 200羽。

1.2 試驗設計及飼養管理

1 200羽150日齡的健康海蘭褐蛋雞隨機分成2組，每組2個重復，每個重復300羽蛋雞。1組為對照組，飼喂基礎日糧;? 2組為試驗組，所用飼料由基礎日糧添加4%發酵茶籽粕混合而成。試驗蛋雞采用4層階梯式籠養;每天以人工光照和自然光照相結合的方式進行光明，時間為16 h;通風采用機械通風+自然通風;自由采食，自由飲水;按正常免疫程序接種疫苗，定期消毒。試驗期為30 d，每日6：30、11：30和17：30喂料，每日11：00和17：00收集蛋，并進行計數、標記和存放，同時計算每日的產蛋率和破蛋率。

1.3 檢測指標和方法

1.3.1 產蛋性能指標的測定

試驗期間以重復為單位，每天記錄蛋雞的采食量、破蛋數、產蛋數和產蛋重量，每周統計1次每日平均采食量、產蛋率、破蛋率和料蛋比。

1.3.2 雞蛋品質測定

試驗結束當天，以重復為單位，每個重復隨機抽取10枚雞蛋，測定雞蛋品質。測定指標包括蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋黃高度、蛋黃顏色與哈氏單位。

1.3.3 血清生化指標測定

在試驗結束當天，從每個重復中隨機選取10羽蛋雞，翅靜脈采血，血液分別置于抗凝管中，靜置待有血清析出然后3 000 r/min離心10 min，取上層清液，置于-20 ℃冰箱待測，采用全自動生化分析儀測定，試劑盒由廣州京誠檢測集團提供。測定總蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯和尿酸的含量。

1.3.4 腸道菌群測定

試驗結束當天，從每重復中抽取5羽雞屠宰，分別取回腸和盲腸內容物各2 g，放入已滅菌的塑料袋中，采用平板培養計數法進行細菌計數，測定乳酸菌、大腸桿菌和沙門氏菌的數量，以每克腸道內容物中細菌總數的對數表示。

1.4 數據分析方法

試驗數據用生物統計軟件SAS 9.1進行單因素方差分析，試驗的結果以“平均值±標準差”來表示。

2? 結果和分析

2.1 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞產蛋性能的影響

由表3可知，與對照組蛋雞相比，試驗組日糧添加發酵茶籽粕后，蛋雞的日采食量提高了3.64%（P<0.05），產蛋率顯著提高2.81%（P<0.05），破蛋率顯著下降 （P<0.05）;料蛋比差異不顯著（P>0.05）。

2.2 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞雞蛋品質的影響

由表4可知，與對照組蛋雞所產蛋相比，試驗組蛋雞所產蛋的蛋殼厚度和蛋殼強度分別提高了10.53%（P<0.05）和11.96%（P<0.05）;蛋黃高度、蛋黃顏色和哈氏單位均有不同程度的提高，但差異不顯著（P>0.05）。

2.3 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞血清生化指標的影響

由表5可知，與對照組蛋雞相比，試驗組蛋雞血清中總蛋白、白蛋白、葡糖糖和甘油三酯的水平偏低，但差異不顯著（P>0.05）;谷丙轉氨酶（降低3.93%，P<0.05）、谷草轉氨酶（降低8.41%，P<0.05）和尿酸（P<0.05）的含量顯著降低。

2.4 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞腸道菌群結構的影響

從表6可知，與對照組蛋雞的腸道菌群結構相比，日糧中添加發酵茶籽粕后，試驗組蛋雞回腸中乳酸菌含量顯著增加? ? ? ?（P<0.05）、大腸桿菌和沙門氏菌的數量顯著減少（P<0.05）;盲腸中乳酸菌的數量有所增加（P>0.05），大腸桿菌的數量顯著減少（P<0.05），沙門氏菌的數量有所減少（P>0.05）。

3 討論

3.1 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞產蛋性能的影響

發酵茶籽粕是經過脫殼、脫皂和微生物發酵等一系列技術手段處理后產生的一種優質飼料原料。有研究表明，茶籽粕中的提取物可作為一種天然綠色的飼料添加劑來代替抗生素，減少飼料中的抗生素使用量[5]。但是，未經發酵處理的茶籽粕含有較高水平的抗營養物質，會嚴重影響飼料的適口性和動物腸道的消化吸收能力。本研究的試驗結果顯示：在基礎日糧中添加4%的發酵茶籽粕，海蘭褐蛋雞的平均日采食量提高3.64%（P<0.05），平均產蛋率提高2.81%（P<0.05），破蛋率顯著降低（P<0.05）。其原因可能是由于茶籽粕經微生物發酵后，所含的大量纖維素被轉化為可消化的單糖和低聚糖，改善了適口性;同時產生了高含量的有機酸、小肽和酶，并含有大量的活性益生菌。這些發酵代謝產物提高了蛋雞對飼料中能量、蛋白質、鈣和磷等養分的消化、吸收和利用。此外，發酵茶籽粕還含有微量的茶皂素、單寧和茶多酚等功能活性成分。單寧能夠降低蛋雞腸道的蠕動，提高飼料消化率[6]，茶皂素能夠增加蛋雞腸道黏膜的通透性，促進營養物質的吸收，提高飼料利用效率[4]。茶多酚的殺菌和抗氧化等功能可促進動物腸道吸收和利用日糧中的鈣、磷以及微量元素，增加蛋殼中鈣的含量，提高蛋重及產蛋率，增強蛋殼硬度，降低破蛋率[7]。本試驗的結果也同樣顯示：發酵茶籽粕在提高產蛋率的同時，顯著降低了海蘭褐蛋雞產蛋的破蛋率。

3.2 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞雞蛋品質的影響

蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋黃顏色以及哈氏單位都是評價雞蛋品質的重要指標[8]。蛋殼厚度及強度主要表現在蛋殼致密堅固性上，其會受到飼料的營養物質含量、養殖環境以及蛋雞健康狀況等不同條件的影響。崔闖飛等[9]的研究表明，在蛋雞飼料中添加枯草芽孢桿菌，雞蛋的蛋殼厚度和強度得到了明顯的提高。而本試驗也獲得了相似的結果，日糧中添加用枯草芽孢桿菌發酵的茶籽粕后，蛋雞所產蛋的蛋殼厚度比對照組的提高了10.53%，蛋殼強度提高了11.96%。哈氏單位與雞蛋新鮮程度呈正相關，并且哈氏單位可以體現雞蛋的蛋白質含量，其值越高表明蛋白黏稠度越高，雞蛋也就越新鮮[10]。另外，益生菌能促進蛋雞對多種營養物質的吸收，而本試驗所用的枯草芽孢桿菌、酵母菌以及乳酸菌在發酵茶籽粕中以活菌形式存在，促進了海蘭褐蛋雞對維生素A和胡蘿卜素等的吸收，加速了有效色素的沉淀，從而提升了蛋黃的顏色質量。本試驗的結果跟前人的研究結果類似，說明發酵茶籽粕經過復合益生菌發酵后含有高水平的活菌，可實現跟益生菌類似的功能，改善海蘭褐蛋雞的雞蛋品質。

3.3 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞血清生化指標的影響

在本試驗中，日糧中添加發酵茶籽粕后，蛋雞血清中總蛋白、白蛋白和免疫相關的酶低于對照組蛋雞的，但是差異不顯著，說明降低程度是在適當可控的范圍內變化。血液中總蛋白、白蛋白和酶類含量的高低表明了機體代謝情況以及免疫情況[11]，這些指標在一定的范圍內變化，說明試驗所用的蛋雞處于相當健康的水平。研究表明，尿酸作為蛋禽類氨基酸的最終代謝產物，其在血清中的濃度反映了機體對蛋白質分解的程度以及效率，本試驗在日糧中添加發酵茶籽粕降低了雞血清中的尿酸含量。有研究表明，血清中尿酸的減少意味著蛋白質在機體其他部位的沉積增多[12]。在本試驗中，實驗組蛋雞的產蛋率、料蛋比以及雞蛋品質等結果也證實了發酵茶籽粕可以降低蛋雞血清中尿酸的含量，從而間接提高了試驗組蛋雞的產蛋率及雞蛋品質。

3.4 發酵茶籽粕對海蘭褐蛋雞腸道菌群結構的影響

蛋雞腸道內存在大量有益菌和有害菌，它們一方面參與腸道對營養物質的消化吸收以及機體對營養物質的轉運和代謝等，另一方面與腸道的相互作用達成共生關系后一起維持腸道內環境的穩態平衡。所以，蛋雞腸道菌群結構的變化會影響蛋雞的腸道健康，并影響機體的健康。馮華等[13]在日糧中添加乳酸菌后，蛋雞腸道中的大腸桿菌被抑制，同時數量顯著降低。馬春陽等[14]在蛋雞基礎日糧中添加枯草芽孢桿菌后，發現蛋雞盲腸乳酸菌和雙歧桿菌的數量顯著增加，大腸桿菌數量顯著減少。本試驗的結果也證實在海蘭褐蛋雞基礎日糧中添加發酵茶籽粕后，蛋雞腸道中乳酸菌的生長加快，沙門氏菌和大腸桿菌等有害微生物被抑制。另外，發酵茶籽粕所含的微量茶皂素、茶多酚和茶籽多糖等活性成分也可能會對病原菌產生一定的影響，從而改善腸道菌群的結構，促進海蘭褐蛋雞對營養物質更好地吸收，影響其生產性能和雞蛋品質。

4? 結論

飼料中添加4%的發酵茶籽粕能提高海蘭褐蛋雞的產蛋性能和雞蛋品質，改善蛋雞腸道菌群結構，提高蛋雞的健康水平。

參考文獻：（14篇;略）

基金項目：贛州市科技計劃項目重點研發計劃——茶粕微生物發酵飼料的研發及產業化;廣東省重點領域研發計劃資助（2019B020218001）