不規則抗體檢測在預防疑難血型產婦輸血不良反應的效果觀察

張照陽，何亞楠

(河南中醫藥大學第三附屬醫院，河南 鄭州 450000)

不規則抗體指人體血漿中除抗A、B外其他血型抗體，一般為IgG型，會導致新生兒溶血癥、溶血性輸血等不良反應，目前主要采用O型試劑紅細胞進行檢測[1]。根據《臨床輸血技術規范》中規定在進行輸血前應進行不規則抗體檢測，孕婦在孕檢時通常會檢測該項[2]。對產婦而言，不規則抗體不僅導致新生兒溶血癥，還會影響新生兒臟器、智力發育，嚴重影響新生兒健康[3]。目前不規則抗體檢測方法主要有鹽水法、酶法、抗人體球蛋白法、微柱凝膠法等，各有優缺點。基于此，本文通過在產婦輸血前進行不規則抗體篩查，以期在減少疑難血型產婦輸血發生輸血不良反應上作出指導，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從2014年2月開始在河南中醫藥大學第三附屬醫院婦產科產婦輸血前進行不規則抗體篩查，選擇2014年2月～2018年5月需輸血治療500名產婦作為觀察組，2010年2月～2014年2月需輸血治療530名產婦作為對照組。對照組年齡24～30歲，平均(26.17±1.63)歲；觀察組年齡23～31歲，平均(27.25±1.48)歲。兩組患者一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

納入標準：產婦為疑難血型，有過妊娠史及輸血史；產婦及家屬知情并簽署知情同意書；醫院倫理委員會同意本研究；排除標準：胎膜早破、前置胎盤等妊娠并發癥者；心腦血管疾病；糖尿病；重要臟器嚴重功能障礙者；精神疾病患者；高血壓患者。

1.2 方法

在輸血前給予所有孕婦注射地塞米松(成都天臺山制藥有限公司，國藥準字H51020514)5 mg防止產生輸血不良反應，篩選紅細胞由濟南萬德廣聯醫療公司提供，抗體篩查細胞懸液由上海血液生物公司提供，微柱凝膠檢測卡由長春博迅生物公司提供。

1.2.1 不規則抗體篩查 觀察組采用微柱凝膠法進行不規則抗體篩查，產婦取靜脈血在37℃水域保溫10 min后離心并分離血清，將紅細胞配成懸液。在微柱凝膠抗人球蛋白卡上進行標記1、2、3號，分別加入抗體篩查細胞懸液及產婦血清，在37℃溫度下孵育15 min并離心觀察結果。若觀察到凝膠卡中上段出現紅細胞聚集表明產婦為陽性，若紅細胞沉積在凝膠卡底部表明產婦為陰性。

1.2.2 不規則抗體特異性鑒定 在微柱凝膠抗人球蛋白卡中分別加入產婦血清與抗體鑒定譜細胞、產婦血清與自身細胞，在37℃下孵育15 min并離心觀察結果，若產婦血清與鑒定譜細胞凝集而不與自身細胞凝集表明為特異性抗體，若反之則為非特異性抗體。

1.2.3 Ig類型檢測 分別將產婦血清與2-Me加入試管，室溫靜置40 min后稀釋，分別在微柱凝膠抗人球蛋白卡中加入產婦血清溶液及相應血型抗原紅細胞在37℃下反應，30 min后觀察結果，若抗體效價低于加入2-Me前但發生反應表明為IgG-IgM類，抗體效價不變表明為IgG類，不反應為IgM類。

1.3 觀察指標

統計觀察組不規則抗體檢出率及抗體分布情況；統計進行不規則抗體篩查前后發生輸血不良反應比例。

1.4 統計學方法

本文數據采取統計學軟件SPSS17.0進行處理，數據均采取雙人錄入EXCEl表格，計數資料采取%表示，組間比較采取χ2檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不規則抗體陽性率及抗體特異性分布

觀察組500名產婦中不規則抗體陽性人數6名，比例1.20%；IgG類5名，IgM-IgG類1名。見表1。

表1 兩組檢出率比較 例

2.2 兩組產婦妊娠輸血不良反應出現情況比較

對照組發生輸血后不良反應6名，比例1.20%，觀察組輸血后未出現不良反應，差異有統計學意義(χ2=4.19,P<0.05)。

3 討論

不規則抗體是與Landsteiner法則不符合抗體，指除ABO三種血型抗體外其他所有紅細胞血型抗體，一般人群中發現不規則抗體陽性比例在0.5%～1.5%左右，而妊娠是產生不規則抗體重要原因之一[4]。不規則抗體可分為IgG及IgM兩大類，在孕婦血清中主要是IgG類抗體，此類抗體可經過胎盤進入胎兒血液循環中，胎兒體內紅細胞被破壞從而發生溶血癥，病癥有水腫、貧血及黃疸等，甚至可能引發膽紅素腦病[5]。Rh血型中不規則抗體為ABO之外血型抗體中最有臨床意義，若Rh血型發生不相容會產生不規則抗體，且會造成嚴重新生兒溶血癥(HDN)及溶血性輸血不良反應(HTR)。張勇萍等[6]研究4 397例孕產婦ABO、RhD血型檢測及不規則抗體分析中發現妊娠或輸血次數增加，不規則抗體產生及HDN發生比例越大。對于有數次輸血史或妊娠史人來說，再次輸入有不規則抗體血液后，會發生回憶反應，使輸入紅細胞遭到破壞，抗體與同種異型抗原紅細胞結合從而導致免疫性溶血反應。輸入人體抗體緩慢增加，紅細胞也隨之逐漸被破壞，因此發生溶血癥病癥不明顯，同時由于進程緩慢，不會造成凝血系統明顯激活及引發血管活性物質釋放，常被醫師忽視，最終導致輸血無效，耽誤病情。

疑難血型屬于血型難以鑒定現象，不僅與樣本本身特殊性相關，還與試驗設備、人員水平等有關[7]。疑難血型進行正反定型試驗時凝集力較弱或正反定型結果不一致，年齡、ABO亞型及先天無抗體都會影響血型確認。除血型鑒定外，不規則抗體篩查也是確保安全輸血重要一環。微柱凝膠法建立在抗人球蛋白法基礎上，采用凝膠介質調節分子篩孔大小，凝集紅細胞無法通過篩孔留在凝膠管中上層，重復性良好，結果容易判斷，并且所用樣本量少，對于新生兒及樣本難以采集人群適用[8]。

本文發現500名產婦中不規則抗體陽性人數6名，比例1.20%；IgG類5名，IgM-IgG類1名。對照組發生輸血后不良反應6名，比例1.20%，觀察組輸血后未出現不良反應，差異有統計學意義(P<0.05)。由于有既往妊娠史或輸血史孕婦體內存在不規則抗體比例較高，若不進行篩查直接輸血會增加發生輸血不良反應風險。本研究對照組中發生6例輸血不良反應均為免疫性溶血反應，原因為輸注的未篩查血液中存在相應不規則抗體的抗原，與孕婦體內不規則抗體發生免疫反應，并在補體作用下溶解血液中紅細胞，引起溶血性輸血反應，立即停止輸血并監控生命體征，給予相應對癥治療后好轉。進行不規則抗體篩查者，在篩查結果呈陽性后，進一步進行免疫性抗體篩查，從而選擇相應陰性抗體且交叉配血符合血液輸血，均未出現輸血不良反應。

綜上所述，產婦中不規則抗體陽性率為1.20%，產婦進行不規則抗體篩查可減少產婦輸血后不良反應發生概率。