HPLC法快速檢測降血脂類中成藥中非法添加化學藥物成分

劉文陽

（撫順市藥品檢驗檢測中心分析室，遼寧 撫順 113006）

高血脂的檢出率在逐年上升，高血脂引發的并發癥給患者帶來了很大的安全隱患。中成藥在降血脂的藥物應用也非常廣泛，但很多不法商人為了牟取暴利，經常會在藥物中添加非法的化學藥物成分，且使用劑量嚴重不符合臨床的規定范圍，如很多非法化學藥物的過量使用會引起肺、腎臟等器官的毒性，同時也會損傷神經系統等，嚴重者會導致死亡。近些年來，降血脂類中成藥中非法添加化學藥物的成分檢測受到各方面的關注，也出現了很多新的檢測方法。本研究采用HPLC法快速、靈敏的檢測降血脂類的中成藥中6種非法添加化學藥物成分的方法，并可以進行定性定量分析，具有很好的應用前景。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent1200系列安捷倫高效液相色譜儀；CPA225D電子分析天平（賽多利斯公司）。洛伐他汀對照品；阿托伐他汀鈣、煙酸、非諾貝特、辛伐他汀、普伐他汀鈉，均購自中國食品藥品鑒定研究院，純度在95%以上。甲醇純度為色譜純；乙酸銨純度為分析純。降血脂類中成藥為抽檢樣品。

1.2 色譜條件

樣品經0.03 mol/L的甲醇溶劑提取，Inertsil ODS-3 色譜柱分離，柱溫為30℃，0.02 mol/L乙酸銨-甲醇流動相下進行梯度洗脫，流速為1.0 mL/min，檢測波長為230 nm，進樣量10 uL。

1.3 標準溶液和供試品溶液制備

各種標準品分別稱取10.0 mg，在甲醇中溶解為濃度1.0 mg/mL的標準溶液備用。

供試品研磨后精確稱量300 mg，用甲醇稀釋，超聲提取20 min，冷卻到室溫，甲醇定容至50 ml，充分混勻，0.45 um的濾膜過濾。

2 結 果

2.1 分析條件的優化

在檢測過程中，由于檢測藥物成分的空間構相及生化性質都有很大的差異，因此選擇梯度洗脫的方法可以更好的分離各成分。在多次嘗試之后，放棄了甲酸-甲醇溶液、水-甲醇溶液為流動相，而是選擇峰型好、分離度高的0.02 mol/L乙酸銨-甲醇溶液為本實驗的流動相，選擇230 nm為檢測波長，該波長的外部干擾小，靈敏度高。

2.2 方法專屬性試驗

混合對照品溶液在1.2的色譜條件下進行檢測，具體色譜圖見圖1。普伐他汀鈉、洛伐他汀、阿托伐他汀鈣、煙酸、非諾貝特、辛伐他汀的保留時間分別為9.47、10.62、11.56、15.09、18.61、27.89 min，均可達到分離要求。

圖1 混合對照品的HPLC圖

2.3 各化學藥物成分的線性范圍、相關系數和回歸方程

分別取配置好的6種化學藥物成分對照品標準溶液，以對照品標準溶液濃度為X軸，對應的峰面積為Y軸，繪制標準曲線。結果顯示化學藥物成分的線性關系良好，相關系數都超過了0.999，具有較高的靈敏度。

2.4 各化學藥物成分的回收率分析

在不含6種非法藥物成分的空白樣品中添加標準對照品溶液，測定6種非法藥物成分的回收率均在96%以上，回收率較高，RSD在0.6%～0.9%之間。見表1。

表1 各化學藥物成分的回收率和相對標準偏差（RSD）

2.5 樣品的測定

選取12種市面上常見的降血脂類中成藥，利用本研究中所用方法對其進行分析測定。結果顯示，12種藥品的色譜圖均未出現與對照品保留時間一致的色譜峰，表明12種測定藥品中均未檢測到6種非法藥物成分。

3 結 論

本研究建立了一種利用HPLC法快速、靈敏的檢測降血脂類中成藥中6種非法添加化學藥物成分的方法。該方法具有較高的靈敏度和準確性，線性關系良好，回收率高，可作為降血脂類中成藥檢測的常用方法，具有很好的應用前景。