己酮可可堿對人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞IL-6、PDGF表達(dá)的影響

劉 妍，馮紅霞*

（1.內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院病理科，內(nèi)蒙古 包頭 014010；2.內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院皮膚性病科，內(nèi)蒙古 包頭 014010）

瘢痕疙瘩又稱疤痕疙瘩，主要是皮膚傷口愈合后，傷口生長過度的特殊瘢痕組織。是一種皮膚科的良性腫瘤。己酮可可堿(pentoxifyline.PTX)是一種抗纖維化很強(qiáng)的藥物，其能抑制腫瘤壞死因子造成的皮膚成纖維細(xì)胞腺苷酸合成酶增加，從而抑制瘢痕皮膚的生成。我們采取用己酮可可堿在體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞(flbroblast,FB)。研究分析PIX對FB的IL-6、PDGF表達(dá)影響,討論P(yáng)IX濃度不同時(shí)對其的表達(dá)影響。

1 資料與方法

1.1 對象

以我院50名瘢痕疙瘩病患為研究對象。平均年齡17-45歲，分別于頸、前胸、上臂部位割取瘢痕疙瘩為標(biāo)本。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)法

用聚丁二酸丁二醇酯（PBS）緩釋液反復(fù)沖洗，再將標(biāo)本放置于37℃且含有5%CO2培養(yǎng)箱中2-3小時(shí)，然后加入2ml的培養(yǎng)液，每隔2-3小時(shí)換一次培養(yǎng)液，總共培養(yǎng)24小時(shí)。觀察標(biāo)本細(xì)胞，細(xì)胞生長至75%時(shí)，將其儲(chǔ)存，待后續(xù)試驗(yàn)利用。

1.3 實(shí)驗(yàn)處理

己酮可可堿的濃度有0.25、0.5、1和2mg/ml。利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)分別檢測IL-6、PDGF的具體含量。瘢痕疙瘩以5×102/ml接種在24板內(nèi)，每個(gè)標(biāo)本細(xì)胞設(shè)置3個(gè)復(fù)孔。標(biāo)本放置培養(yǎng)箱內(nèi)24小時(shí)后加入己酮可可堿終濃度，然后收集清液，放在離心管中，保存在氣溫-22℃的環(huán)境里，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測的24小時(shí)各孔上的清液中IL-6、PDGF的表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

利用SPSS 22.0版本的系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理，所有參數(shù)以(±s)表示,具有差異性（P＜0.05）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

一定濃度下的己酮可可堿可以抑制白介素-6、血小板衍生因子的表達(dá)。PIX濃度0.25mg/ml，分別作用于48h、72h，其中0.5、1、2mg/ml作用于24h、48h、72h，白介素-6的表達(dá)存在差異（P＜0.01），有統(tǒng)計(jì)意義。見表1。PIX濃度0.25、0.5、1、2分別作用于24h、48h、72h，血小板衍生因子的表達(dá)存在差異（P＜0.01），見表2。

3 討 論

生成血小板衍生因子的主要細(xì)胞是FB，血小板衍生因子能促進(jìn)創(chuàng)面的愈合，有助于FB的形成。進(jìn)行PCR反應(yīng)的實(shí)時(shí)定量的技術(shù)證明了瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞中血小板衍生因子受體a蛋白和信使RNA表達(dá)水平都明顯提高,其中的PDGF受體β蛋白和信使RNA表達(dá)提高不明顯。本文研究結(jié)果證實(shí)，己酮可可堿能降低瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞IL-6和PDGF的表達(dá)，進(jìn)一步防止了瘢痕疙瘩的形成，讓臨床上治療瘢痕疙瘩有了新方案去為患者更好解決疾病。

表1 己酮可可堿對瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞IL-6的表達(dá)影響

表2 己酮可可堿對瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞PDGF表達(dá)的影響