血清LDH和α-HBDH在B-ALL患者中的水平及臨床意義

許德英，王小利，孫真真，吳玉丹，常永超

(河南科技大學第一附屬醫院 檢驗科，河南科技大學臨床醫學院，河南 洛陽471003)

急性B淋巴母細胞白血病(B- ALL)是一種起源于B祖細胞的惡性克隆性造血干細胞腫瘤，主要發生于兒童和青少年，被認為是該人群中與惡性腫瘤相關的主要死亡原因之一。自20世紀80年代以來，B-ALL患者的臨床療效已逐步改善，兒童和成人的總體完全緩解率(CR)分別為大于95%和60%-85%，總生存率(OS)分別大于80%和小于50%[1,2]。參考1995年歐洲白血病免疫學分型協作組(EGIL)標準[3]，采用多參數流式細胞術，B-ALL的免疫分型又可分為Pro-B(CD19+/CD10-)、Common-B(CD19+/CD10+/CD20±)和pre-B(胞漿cIgM IgM+)3類。乳酸脫氫酶(LDH)是多種生化指標中最有價值的酶類指標之一，且已證實在多種實體腫瘤及血液腫瘤中其含量升高[4]并可影響患者的預后水平[5-7]，由于α-羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)主要反應的是LDH1和LDH2的活性，所以分析患者腫瘤細胞內LDH及α-HBDH活性，不僅有助于了解腫瘤生物化學的復雜性，而且對于早期臨床診治也有重要評估意義。但是目前血清中LDH和α-HBDH水平在B-ALL中的報道較為少見，故本研究對我院236例初診B-ALL患者進行回顧性分析揭示其對該疾病的輔助診斷意義，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年1月-2019年5月我院初診未治且未合并其他種類疾病的236例B-ALL患者，均是經過骨髓細胞形態學及流式細胞免疫學分型后的[8]確診患者，其中男142例，女94例，年齡1-65歲，中位年齡(15.38±1.04)歲，Pro-B 15例，Common-B 177例，Pre-B 44例 。選擇同時期正常人群112例作為對照組，其中男67例，女45例，年齡1-57歲，中位年齡(19.24±2.11)歲。通過校正兩組研究對象在性別及年齡因素方面的差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

采集初診B-ALL患者及同時期正常人群3-5 ml空腹靜脈血(無抗凝劑)，采用羅氏Cobas8000 c701全自動生化分析儀及其配套LDH、α-HBDH試劑盒(比色法)檢測血清中二者含量，所有操作均嚴格按照試劑說明書進行。本科室LDH、α-HBDH生化指標的正常值范圍設定分別為(90-245)U/L、(23-182)U/L。抽取初診B-ALL患者骨髓標本涂片行瑞氏染色鏡檢并留取2-4 ml行流式細胞學檢測，采用BD FACS Calibur流式細胞儀Cell Quest軟件進行分析，B-ALL免疫分型關鍵抗體CD10、CD19、CD20及胞漿cIgM IgM均購自美國BD公司。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 B-ALL一般病理資料分析

結果顯示Pro-B、Common-B和Pre-B分別占B-ALL的6.36%(15/236)、75.00%(177/236)和18.64%(445/236)；其中性別、年齡及α-HBDH水平與B-ALL發育分期間差異存在統計學意義(P<0.05)，而LDH檢測水平與其則無統計學意義(P>0.05)；其中Pro-B患者以成年女性為主占66.67%(10/15)，而Common-B和Pre-B患者則以男性兒童為主；LDH檢測水平在Pro-B、Common-B和Pre-B分型中75%以上的患者皆超過正常范圍，而α-HBDH水平在Common-B和Pre-B則分別有84.18%和76%的患者超過正常范圍，見表1。

2.2 B-ALL患者中血清LDH和α-HBDH水平及年齡與性別因素對其影響

112例對照組(正常人群)中血清LDH和α-HBDH平均水平分別為(200.00±4.32)U/L、(155.00±3.40)U/L；236例B-ALL患者的LDH及α-HBDH平均含量分別為(713.10±52.44)U/L、(485.80±35.74)U/L；與正常對照組相比，LDH和α-HBDH血清水平在B-ALL患者中均增高且具有統計學意義，見表2。

LDH血清含量在≤15歲患者中的平均水平為(709.70±63.64)U/L，而在>15歲患者中則為(790.90±144.30)U/L，隨著年齡增加LDH含量增加但是二者之間無統計學差異；LDH在男性患者中的平均水平為(818.00±121.50)U/L，女性則為(695.10±75.19)U/L，兩者之中男性患者血清LDH含量稍高但無統計學意義。α-HBDH的血清平均水平在≤15歲和>15歲患者中分別為(475.60±41.31)U/L和(579.00±135.80)U/L，在男性和女性患者中分別為(551.50±78.66)U/L和479.30±54.95)U/L；年齡和性別因素對B-ALL患者中α-HBDH水平變化亦無明顯的統計學意義，見表2。

表1 B-ALL患者一般病理資料分析(n=236例)

表2 B-ALL患者中血清LDH和α-HBDH水平及年齡與性別因素對其影響

3 討論

ALL患者一般病理資料分析得出Common-B期最為常見，Pre-B期次之，Pro-B期最少，該現象符合B-ALL疾病的命名原則及發病特征。其中兒童的發病率為70.34%遠高于成人，這與同樣為亞洲國家的印度基德瓦伊國家癌癥研究所報道的69.76%的發病率高度一致[9]，患兒發病高峰年齡在2-5歲之間，且男孩多于女孩，該情況通常被認為是多因素的，包括外源性(如感染)和內源性(如炎癥、氧化應激)暴露、遺傳易感性、干細胞或祖細胞中相關癌基因的激活以及受孕時親代基因改組和重組事件等。然而在Pro-B患者中該現象卻恰恰相反，但是對該方面的研究甚少，可能受本研究樣本量少或所查文獻數量有限影響；但大部分臨床研究報道顯示成人B-ALL的CR及OS均明顯低于兒童患者，也可能是由于成人B-ALL患者高發于B淋巴細胞發育的更早期惡性程度較高的緣故。

LDH廣泛存在于人體心臟、肝臟及骨骼肌等組織中，可逆地催化丙酮酸與乳酸間轉化，由LDH-A和LDH-B兩個主要亞基組成，其中LDH-A對丙酮酸具有較高的親和力，是糖酵解途徑中的關鍵酶。而α-HBDH則是LDH的同工酶，并不是一個獨立的酶，已有文獻報道[10]在急性白血病患者體內，α-HBDH水平隨LDH的水平升高而升高，兩者呈正相關性，而且在ALL患者中兩者水平明顯高于AML患者。

本研究ALL患者血清LDH和α-HBDH水平遠高于正常對照組，據估計，與正常細胞相比機體腫瘤細胞異常增殖時，糖利用量多達30倍，產生乳酸量多達40倍且在未考慮氧含量的情況下[11]，而乳酸可促進細胞內信號傳導、微環境血管生成及腫瘤優勢生長[12]，即LDH-A通過增加乳酸的產生改變腫瘤微環境，這可導致增強免疫抑制細胞，如骨髓源性抑制細胞(MDSCs)、腫瘤相關巨噬細胞(TAMs)和樹突狀細胞(DC)；抑制調控細胞凋亡的細胞，如自然殺傷細胞(NK)和細胞毒性T淋巴細胞(CTLs)，通過促進免疫抑制腫瘤微環境，LDH-A能夠促進對化療/放療/靶向治療的耐藥性[4]。分子生物學新技術研究表明[13]，由于腫瘤細胞內線粒體機制改變和凋亡能力減弱，促使腫瘤細胞破壞細胞膜釋放細胞內酶，故LDH的胞內特性成為反映細胞代謝狀態、糖酵解的好氧或厭氧方向、激活狀態及惡性轉化的非常敏感指標。有研究發現[14]在兒童急淋患者低危組初診乳酸脫氫酶(S-LDH)明顯低于高危組，可客觀反映其臨床危險度分層。LDH升高已被公認為許多癌癥預后不良的生物標志物，與腫瘤生長和增殖現象直接相關，包括腫瘤細胞的維持、轉移及存活，因為其可允許腫瘤細胞通過改變腫瘤微環境來抑制和逃避免疫系統。

本研究發現年齡及性別因素對B-ALL患者血清LDH和α-HBDH水平沒有直接影響，說明兩者在初診患者中LDH和α-HBDH水平變化的影響微乎其微可以忽略不計，也可能受限于本次研究的樣本量。而新英格蘭雜志文獻報道[15]B-ALL的預后不良因素包括年齡偏大、骨髓受累(特別是原始細胞出現于外周血)或中樞神經(CNS)受累、疾病晚期(Ⅲ期以上)、機體狀況差、S-LDH增高等，其中亦并未涉及性別因素。

綜上所述，B-ALL初診患者血清LDH和α-HBDH水平明顯偏高，所以及時檢測二者含量可及早給臨床診斷治療提供依據，密切監測二者水平變化還可有助于觀察病情和療效，對判斷預后也具有重要臨床意義。