新生兒血型鑒定困難的探討

章小麗，徐秀云，柯江維，周根水

（江西省兒童醫院，江西 南昌 330006）

1 材料與方法

1.1 標本來源 患兒，男，5d,第一胎第一產，因高黃疸、肝功能異常來我院就診,總膽紅素351μmol/L,間接膽紅素332μmol/L,直接膽紅素19μmol/L,血常規 RBC 5.3×1012/L，Hb 183g/L。既往無輸血史,檢測新生兒溶血病時發現患兒血型鑒定異常。已知母親血型為O 型RHD 陽性。

1.2 儀器與試劑 抗-A(批號 20170819)、抗-B(批號 20170819)、ABO 紅細胞(批號 20175333)、抗人球蛋白試劑(20175001)、抗H(20161107)均為上海血液生物醫藥責任有限公司產品。新生兒ABO、RhD 血型檢測卡(批號20176915)、新生兒溶血病嬰兒不完全抗體檢測卡(批號20170901)均為長春博迅生物技術有限責任公司產品。KA－2200 專用離心機(日本久保田)，HH-W420 水浴箱（金壇市醫療儀器廠），TD-3A 型血型血清學專用離心機(長春博研)，FYQ 型免疫微柱孵育器(長春博研)。

1.3 檢測方法 新生兒溶血病檢測采用熱放散法，ABO 血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗、游離試驗、放散試驗均采用卡法與試管法互相驗證[1,2]，ABO血型基因檢測委托上海血液中心和江蘇中濟萬泰生物醫藥有限公司若貝爾獎研究室進行。

2 結果

2.1 血清學患兒血型檢測結果 見表1。

2.2 直接抗人球蛋白試驗 陰性。

2.3 游離和放散試驗 見表2。

2.4 分子生物學檢測 根據測序回報的結果，ABO 1-5 外顯子無突變位點，6、7 外顯子有以下突變位點，與參考序列A101.1 進行對比，該樣本符合B101/O01 基因型，見表3。

表1 患兒試管法ABO 血清學血型檢測結果

表2 患兒游離與放散試驗結果

表3 患兒ABO 基因6、7 外顯子測序突變點結果

3 討論

該患兒進行新生兒溶血病檢測時發現ABO 血型鑒定結果異常,紅細胞與抗B 試劑反應出現混合視野, 鑒于患兒無輸血史我們懷疑他的ABO 血型是B3 亞型的可能性較高，進一步進行了ABO 基因分型與測序檢測。根據回報的結果，該樣本確定為B101/O01 基因型，但由于患者為新生兒，新生兒B型糖鏈抗原為直鏈抗原，抗原表達量約為成人25~50%，測序單位建議患兒滿周歲后追蹤血型，且不排除9 號染色體其他未測序部位變異導致血型異常的可能。

從輸血相關實驗結果聯系臨床其他檢查結果，患兒雖然存在總膽紅素351μmol/L,間接膽紅素332μmol/L 升高引起的高膽紅素血癥，且新生兒溶血病檢測中放散試驗證實存在ABO 溶血[3,4]，但我們也觀察到患兒同一時間查血常規,血紅蛋白高達183g/L 并不因溶血而貧血。已知胎兒母體輸血綜合征(FMH）是指胎兒將血倒輸回母體內的臍帶或胎盤中,從而造成胎兒一出生就患有不同程度的貧血[5-10]。FMH 是一種少見的產科并發癥，大部分病例原因不明，雖發病率不高，一旦發作很容易導致嬰兒夭折。而本文報道的患兒情況, 筆者推測是FMH 的反轉, 即母親O 型血液通過臍帶或胎盤輸入了患兒體內即B 型血液中,故雖母子之間出現了ABO 血型不合新生兒溶血癥，患兒紅細胞被破壞，患兒網織紅紅細胞計數70.09×109/L,靠近正常值范圍 25～75×109/L 上限,但 Hb 值未見下降并高達 183 g/L。同時也能解釋患兒ABO 血型基因檢測結果為B101/O01 基因型, 而血清學血型鑒定中出現的類似B3 的混合視野現象。因缺乏新舊細胞分離設備,且對癥治療后患兒病情好轉很快出院了,我們沒有進行進一步驗證。比之FMH 可引起胎兒貧血、水腫甚至死亡等嚴重臨床不良并發癥,本案例預后良好。值得注意的是這種胎母輸血會引起實驗室血型鑒定困難,希望本案例的報道可以為輸血界同行遇到類似現象，提供參考。