樹莓果肉多糖在1型糖尿病大鼠中的免疫調(diào)節(jié)和抗氧化活性研究

田文慧，楊永晶,2*，吳云，陳薇

1(青海大學(xué) 生態(tài)環(huán)境工程學(xué)院，青海 西寧，810016) 2(青海大學(xué)省部共建三江源生態(tài)與高原農(nóng)牧業(yè)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青海 西寧，810016)

糖尿病嚴(yán)重威脅人類健康，屬于慢性代謝性疾病，胰腺胰島素分泌不足或?qū)σ葝u素不敏感引起的慢性高血糖癥是其典型癥狀。糖尿病一般分為1型和2型2種[1]。1型糖尿病可能發(fā)生在任何年齡段，在全球范圍內(nèi)都有分布，由胰島分泌胰島素的β細(xì)胞的損傷引起[2]，并有可能出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥。多種免疫細(xì)胞和促炎細(xì)胞因子共同參與了這種復(fù)雜的自身免疫應(yīng)答過程，包括T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞、TNF-α、IFN-γ、IL等[3]。目前對(duì)1型糖尿病的有效治療仍然有待提高[4]。皮下注射胰島素只能一定程度地控制1型糖尿病的臨床癥狀，對(duì)胰島β細(xì)胞的損傷幾乎沒有修復(fù)作用[5]。而環(huán)孢霉素、咪唑硫嘌呤、強(qiáng)的松等廣譜免疫抑制劑盡管對(duì)于1型糖尿病的治療有一定效果，但隨著治療時(shí)間的增長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生由免疫抑制引起的一系列副作用[6]。近年來，多糖已成為最主要的天然功能性提取物，是一類具有多種藥理活性的生物大分子，包括降血糖[7]、免疫調(diào)節(jié)[8]、抗氧化[9]、抗菌[10]、抗腫瘤[11]等。例如，從梭柄松苞菇中獲得的多糖在STZ誘導(dǎo)的小鼠糖尿病模型中具有顯著的降血糖和降血脂活性[12]；從桑枝中獲得的多糖能使STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的血糖下降[13]。所以，植物多糖可能會(huì)為有效治療糖尿病提供新的機(jī)會(huì)。

樹莓(RubusidaeusL.)是薔薇科多年生灌木，已被多國廣泛引種栽培，其品種目前至少有幾百個(gè)。樹莓中含有許多生物活性物質(zhì)，尤其是多糖含量高。前期研究表明，在青海高原地區(qū)引種的樹莓果肉中多糖提取率高達(dá) 12%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。因此，樹莓果肉是提取多糖的理想原料。本研究通過建立STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型研究RPP的抗糖尿病活性。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料與試劑

樹莓冷凍果，青海樹莓農(nóng)林產(chǎn)業(yè)化有限公司(青海湟源)；SD大鼠，甘肅中醫(yī)學(xué)院[動(dòng)物合格證號(hào)：SYXK(甘)2011-0001]；格列本脲(glibenclamide)、鏈脲霉素(streptozotocin，STZ)，Sigma-Aldrich有限責(zé)任公司(美國)；MDA、SOD、GSH-Px試劑盒、大鼠IgA、IgE、IgG、IgM，IL-2、IFN-γ、TNF-α以及CD4和CD8分子ELISA測(cè)試盒，南京建成生物工程中心。

1.1.2 儀器與設(shè)備

電子天平(ALC-110.4)，德國Acculab公司；渦旋混合儀(TD-RS-1)，北京同德創(chuàng)業(yè)科技有限公司；紫外分光光度計(jì)(UV-2802)，UNICO；恒溫水浴鍋(DZKW-D-4)，河南鄭州南北儀器設(shè)備有限公司；純水儀(UPT)，成都超純科技有限公司；酶標(biāo)儀(RT-6000)，北京裕天醫(yī)療技術(shù)；冷凍離心機(jī)(4-5R)，湖南恒諾儀器設(shè)備有限公司；血糖測(cè)試儀及血糖試紙(三諾)，天士力大藥房；組織勻漿儀(FSH-2A)，金壇市友聯(lián)儀器研究所；常溫離心機(jī)(TDL-50C)，上海精密科學(xué)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 RPP對(duì)正常大鼠體重和血糖的影響

采用楊永晶等的方法提取樹莓果肉多糖(raspberry pulp polysaccharide， RPP)[14]。雄性SD大鼠30只，體重170～190 g。先將大鼠在室溫20～24 ℃，相對(duì)濕度40%～50%的條件下適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。之后隨機(jī)分成3組，分別為對(duì)照組(純水)、RPP低劑量組(RPP溶液300 mg/kg)和RPP高劑量組(RPP溶液600 mg/kg)，每組10只。給藥方式均為灌胃，持續(xù)給藥20 d。觀察與測(cè)量指標(biāo)方法如下：(1)每天觀察并詳細(xì)記錄各組大鼠的外觀體征、行為活動(dòng)、進(jìn)食、飲水、病發(fā)及死亡情況。(2)每隔5 d測(cè)量大鼠體重。(3)尾靜脈采血，采用血糖測(cè)試儀測(cè)定血糖值，每5 d測(cè)量1次。

1.2.2 STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型的建立

雄性SD大鼠的飼養(yǎng)方法及條件同上。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，大鼠腹腔注射60 mg/kg STZ(STZ溶于新鮮的檸檬酸鈉緩沖液(pH 4.5，濃度0.1 mol/L)中，在黑暗條件下使用，以減少降解)。正常對(duì)照組大鼠腹腔注射等量檸檬酸鈉緩沖液。注射STZ或檸檬酸鈉緩沖液72 h后經(jīng)尾靜脈采血，用血糖儀測(cè)定血糖。選擇血糖濃度超過16.8 mmol/L的大鼠作為糖尿病模型。

1.2.3 RPP對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的影響

將糖尿病大鼠隨機(jī)分為6組：正常對(duì)照組(NC，純水)，模型對(duì)照組(MC，等滲鹽水)，陽性對(duì)照組(PC，格列本脲20 mg/kg)，RPP低劑量組(LDG，RPP75 mg/kg)，RPP中劑量組(MDG，RPP150 mg/kg)和RPP高劑量組(HDG，RPP300 mg/kg)，所有大鼠每天灌胃1次，連續(xù)處理20 d，每5 d測(cè)量1次大鼠血糖并稱其體重。治療20 d后，麻醉大鼠(腹腔注射水合氯醛溶液)，經(jīng)頸動(dòng)脈插管取血，取血樣于4 ℃靜置30 min后，并于2 500 r/min離心10 min獲取血清樣本。取血后將大鼠采用脊椎脫臼法處死，收集胰腺組織樣本，其中一部分被保存在體積分?jǐn)?shù)10%的甲醛中用于組織病理學(xué)研究，其余部分和血清在-80 ℃保存至分析。

1.2.4 血清CD4、CD8、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IgM、IgA、IgE和IgG的測(cè)定

根據(jù)制造商的說明，使用ELISA試劑盒測(cè)定血清中CD4、CD8、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IgM、IgA、IgE、IgG的含量。

1.2.5 胰腺組織和血清中的丙二醛、超氧化物歧化酶和谷脘苷肽過氧化物酶的測(cè)定

采用組織勻漿儀制備胰腺勻漿，置于低溫(pH 7.4, 濃度0.01 mol/L Tris/HCl， 0.000 1 mol/L EDTA-2Na, 0.01 mol/L蔗糖，質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.8% NaCl)中，以5 000×g, 4 ℃離心10 min，收集上清。胰腺組織和血清中丙二醛(malondialdehyde， MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase， SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase， GSH-Px)的測(cè)定由試劑盒按照說明書進(jìn)行檢測(cè)。MDA、SOD和GSH-Px的檢測(cè)波長(zhǎng)分別為532 nm、450 nm和412 nm。

1.2.6 組織病理學(xué)觀察

將體積分?jǐn)?shù)10%甲醛固定后的組織石蠟包埋，切片進(jìn)行蘇木精-伊紅(H&E)染色。最后在200倍和400倍放大率下觀察并拍攝切片。

1.2.7 數(shù)據(jù)處理

使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)表示，多組間均數(shù)之間的比較采用單因素方差分析，2組均數(shù)之間的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P>0.05說明差異不顯著；P<0.05說明差異顯著；P<0.01說明差異極顯著[15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 RPP對(duì)正常大鼠基本體征的影響

各組大鼠毛色光亮，精神狀態(tài)良好，進(jìn)食、飲水、排泄等行為活動(dòng)正常，未見生病及死亡情況。說明RPP對(duì)大鼠的基本體征無明顯影響。

2.2 RPP對(duì)正常大鼠體重的影響

如表1所示，連續(xù)灌胃20 d，各組大鼠的體重均穩(wěn)步增長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)(20 d)，RPP高、低劑量組的大鼠體重與正常組相比均無顯著性差異。說明RPP在300～600 mg/kg濃度下對(duì)正常大鼠體重?zé)o明顯影響，毒性小。

2.3 RPP對(duì)正常大鼠血糖的影響

如表2所示，連續(xù)灌胃20 d，各組大鼠的血糖值在實(shí)驗(yàn)期間均非常穩(wěn)定，給藥前后的血糖值均無顯著性變化。RPP高、低劑量組大鼠的平均血糖值與空白對(duì)照組相比均無顯著性差異。說明RPP在300～600 mg/kg濃度下對(duì)正常大鼠的血糖無顯著影響。

表1 RPP對(duì)正常大鼠體重的影響 單位：g

表2 RPP對(duì)正常大鼠血糖的影響 單位：mmol/L

2.4 RPP對(duì)STZ所致糖尿病大鼠基本體征的影響

經(jīng)STZ灌胃后各組糖尿病大鼠的體重明顯下降(P<0.05 vs. 正常組)，墊料比較潮濕。正常大鼠毛色光澤，墊料干燥，20 d內(nèi)體重呈上升趨勢(shì)(見圖1正常)。模型組大鼠毛發(fā)干燥，并伴有輕度脫毛現(xiàn)象，墊料潮濕，體重持續(xù)下降(見圖1模型)，最后一天測(cè)量的大鼠體重明顯下降(P<0.05 vs. 正常組)。經(jīng)RPP治療后，糖尿病大鼠體重下降以劑量依賴的方式得到有效逆轉(zhuǎn)(見圖1)。其中，RPP低劑量組最后一天測(cè)得的大鼠體重相對(duì)模型組來說有明顯的增長(zhǎng)(P<0.05 vs. 模型組)，RPP中、高劑量組最后一天測(cè)量的大鼠體重增長(zhǎng)極顯著(P<0.01 vs. 模型組)。說明RPP能有效緩解糖尿病所致的體重下降情況，且在一定范圍內(nèi)緩解程度隨著多糖濃度的增加而加強(qiáng)。值得注意的是陽性對(duì)照藥格列本脲對(duì)糖尿病大鼠體重的急劇下降幾乎沒有緩解，反而隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠體重一直在下降。RPP中劑量組最后一天測(cè)量的大鼠體重相對(duì)于陽性對(duì)照組來說有明顯的增長(zhǎng)(P<0.05 vs. 陽性對(duì)照組)，RPP高劑量組最后一天測(cè)量的大鼠體重與陽性對(duì)照組相比增長(zhǎng)極顯著(P<0.01 vs. 陽性對(duì)照組)。RPP處理組大鼠的體重與正常大鼠相比雖然仍具有顯著性差異，但由圖1可以看出，RPP高劑量組能較為穩(wěn)定地維持患病大鼠的體重，這說明RPP維持糖尿病大鼠體重的作用優(yōu)于格列本脲。

圖1 RPP對(duì)糖尿病大鼠體重的影響
Fig.1 Effects of RPP on body weight of diabetic rats
注：##P<0.01 vs. 正常組；*P<0.05，**P<0.01 vs. 模型組；△P<0.05，△△P<0.01 vs. 陽性對(duì)照組

2.5 RPP對(duì)STZ所致糖尿病大鼠血糖的影響

如圖2所示，造模后治療開始前(-5 d)，正常大鼠的血糖濃度平穩(wěn)維持在5 mmol/L，各組糖尿病大鼠的血糖濃度均在25 mmol/L左右，且各組大鼠的平均血糖濃度不存在顯著性差異。RPP或格列本脲治療后，糖尿病大鼠血糖升高受到抑制。RPP各組和陽性對(duì)照組大鼠的平均血糖濃度與模型組相比均有極顯著性的下降(P<0.01 vs. 模型組)。其中，RPP的降血糖效果隨著多糖濃度和給藥天數(shù)的增加而增強(qiáng)。雖然給藥最后一天經(jīng)RPP處理的各組大鼠的血糖與正常組相比依然存在顯著性差異，但RPP高劑量組大鼠的血糖值比陽性對(duì)照組的還要低，RPP中劑量組大鼠的血糖值與陽性對(duì)照組的相當(dāng)，這說明高、中劑量RPP的降血糖作用與格列本脲相當(dāng)，如果延長(zhǎng)治療時(shí)間RPP的降血糖作用甚至有可能會(huì)優(yōu)于格列本脲。

圖2 RPP對(duì)糖尿病大鼠血糖的影響
Fig.2 Effects of RPP on blood glucose of diabetic rats
注：##P<0.01 vs. 正常組；**P<0.01 vs. 模型組

2.6 RPP對(duì)STZ所致的糖尿病大鼠血清中CD4、CD8分子的影響

如圖3所示，模型組大鼠血清中CD4和CD8分子的濃度較正常組極顯著升高(P<0.01 vs. 正常組)。經(jīng)過RPP治療，糖尿病大鼠血清中CD4分子的濃度明顯下降(P<0.05 vs. 模型組)，CD8分子的濃度較模型組則極顯著下降(P<0.01 vs. 模型組)。與正常組相比，RPP低劑量組大鼠血清中的CD4分子濃度和RPP高劑量組大鼠血清中的CD8分子無顯著差異。而格列本脲對(duì)大鼠血清中CD4和CD8分子濃度的急劇升高無明顯緩解作用。

圖3 RPP對(duì)糖尿病大鼠血清中CD4和CD8分子的影響
Fig.3 Effects of RPP on CD4 and CD8 in serum of diabetic rats
注：▲P>0.05,##P<0.01 vs. 正常組；*P<0.05，**P<0.01 vs. 模型組(下同)

2.7 RPP對(duì)STZ所致的糖尿病大鼠血清中細(xì)胞因子的影響

由圖4可以看出，模型組大鼠血清中IL-2、TNF-α和IFN-γ的含量較正常大鼠急劇增加(P<0.01 vs.正常組)。而RPP可降低IL-2、TNF-α和IFN-γ的含量，高、低劑量的RPP都可使糖尿病大鼠血清中的IL-2、TNF-α和IFN-γ有顯著或極顯著的下降(P<0.05，P<0.01 vs. 模型組)。與正常組相比，高、低劑量RPP組的TNF-α含量沒有顯著差異(P>0.05 vs. 正常組)。而格列本脲對(duì)糖尿病大鼠血清中TNF-α、IFN-γ和IL-2的升高無明顯抑制作用。

圖4 RPP對(duì)糖尿病大鼠血清中IL-2、TNF-α和IFN-γ 含量的影響
Fig.4 Effects of RPP on the concentrations of TNF-α, IFN-γ and IL-2 in serum of diabetic rats

2.8 RPP對(duì)STZ所致的糖尿病大鼠血清中免疫球蛋白的影響

各組大鼠血清中4種免疫球蛋白的含量如圖5所示?？梢钥闯瞿Ｐ徒M大鼠血清中4種免疫球蛋白含量急劇升高，與正常大鼠相比具有極顯著差異(P<0.01 vs. 正常組)。RPP能明顯降低糖尿病大鼠血清中4種免疫球蛋白的含量。RPP低、中、高劑量組糖尿病大鼠血清中IgA、IgE、IgG和IgM的濃度與模型組相比具有顯著或極顯著的下降(P<0.05，P<0.01 vs. 模型組)，與正常組相比無明顯差異(P>0.05 vs. 正常組)。陽性對(duì)照組大鼠血清中IgA、IgE、IgG和IgM的含量與模型組相比均無明顯改變。

2.9 RPP對(duì)STZ所致的糖尿病大鼠血清中SOD、GSH-Px和MDA的影響

GSH-Px是一種能特異地催化H2O2和GSH反應(yīng)生成H2O及氧化型谷胱甘肽的酶[16]，可以保持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性。如圖6所示，STZ可使大鼠血清中的SOD和GSH-Px活性明顯下降(P<0.05 vs. 正常組)，而MDA的含量極顯著性地上升(P<0.01 vs. 正常組)。在格列本脲或RPP的作用下，糖尿病大鼠血清中SOD和GSH-Px的活性都有了顯著提高， MDA的含量極顯著下降(P<0.05，P<0.01 vs. 模型組)。RPP的作用隨著多糖濃度的增加而加強(qiáng)。而且RPP中、高劑量組糖尿病大鼠血清中MDA含量和SOD活性與正常組相比無顯著性差異(P>0.05 vs. 正常組)。此外，RPP中、高劑量組糖尿病大鼠血清中的SOD活性都顯著高于陽性對(duì)照組(P<0.05 vs. 陽性對(duì)照組)，RPP高劑量組糖尿病大鼠血清中的GSH-Px的活性顯著高于陽性對(duì)照組(P<0.05 vs. 陽性對(duì)照組)。

A-IgA;B-IgE;C-IgG;D-IgM
圖5 RPP對(duì)糖尿病大鼠血清中IgA、IgE、IgG和IgM含量的影響
Fig.5 Effects of RPP on the concentration of IgA, IgE, IgG and IgM in serum of diabetic rats

A-GSH-Px；B-MDA；C-SOD
圖6 RPP對(duì)糖尿病大鼠血清中GSH-Px和MDA、SOD的影響
Fig.6 Effects of RPP on GSH-Px， MDA SOD, in serum of diabetic rats
注：▲P>0.05,##P<0.01 vs. 正常組；*P<0.05，**P<0.01 vs. 模型組；△P<0.05 vs. 陽性對(duì)照組

2.10 RPP對(duì)STZ所致的糖尿病大鼠胰腺中SOD、GSH-Px和MDA的影響

如圖7所示，STZ可使大鼠胰腺中SOD和GSH-Px的活性明顯下降，MDA的含量升高(P<0.01 vs.正常組)。格列本脲和RPP干預(yù)可顯著提高胰腺組織中SOD和GSH-Px的活性，降低MDA含量(P<0.05，P<0.01 vs. 模型組)，且RPP的作用隨著濃度的增加而加強(qiáng)。高劑量RPP組糖尿病大鼠胰腺中MDA含量、 SOD和GSH-Px活性與正常組相當(dāng)(P>0.05 vs. 正常組)。此外，中、高劑量的RPP可使糖尿病大鼠胰腺中SOD的活性與陽性對(duì)照組相比分別具有顯著性差異和極顯著性差異(P<0.05，P<0.01 vs. 陽性對(duì)照組)，高劑量RPP可使糖尿病大鼠胰腺中GSH-Px的活性極顯著性提高(P<0.05，P<0.01 vs. 陽性對(duì)照組)。

A-SOD；B-GSH-Px；C-MDA
圖7 RPP對(duì)糖尿病大鼠胰腺中SOD、GSH-Px和MDA的影響
Fig.7 Effects of RPP on SOD, GSH-Px and MDA in pancreas of diabetic rats
注：▲P>0.05，##P<0.01 vs. 正常組；*P<0.05，**P<0.01vs. 模型組；△P<0.05，△△P<0.01 vs.陽性對(duì)照組

2.11 RPP對(duì)STZ所致的糖尿病大鼠胰腺組織的影響

如圖8所示，正常大鼠胰腺切片結(jié)構(gòu)形態(tài)規(guī)則，大量完整的胰島β細(xì)胞排列均勻。相反，糖尿病模型組胰島結(jié)構(gòu)嚴(yán)重受損，包括細(xì)胞溶解變形、壞死和凋亡，并伴有胰島β細(xì)胞數(shù)量急劇下降。格列本脲治療后，STZ誘導(dǎo)的胰島損傷較模型對(duì)照組有一定程度的恢復(fù)。相反，在給予RPP后，隨著胰島β細(xì)胞數(shù)量的增加，胰島的病態(tài)結(jié)構(gòu)得到了有效的恢復(fù)，而且改善優(yōu)于陽性對(duì)照組。其中，RPP組大鼠胰島的恢復(fù)程度與其濃度成正比。

圖8 RPP對(duì)糖尿病大鼠胰腺組織的影響
Fig.8 Effects of RPP on pancreas in diabetic rats
注：H&E染色；箭頭所指為含有β細(xì)胞的胰島；正常和模型組的放大 倍數(shù)為200；陽性對(duì)照組和RPP低、中、高劑量組的放大倍數(shù)為400

3 討論

本研究采用STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型，觀察RPP對(duì)1型糖尿病大鼠的影響。STZ是一種具有特異性毒素的天然化學(xué)物質(zhì)，靶向哺乳動(dòng)物胰腺中產(chǎn)生胰島素的β細(xì)胞，并長(zhǎng)期用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1型糖尿病的誘導(dǎo)[17]。1型糖尿病主要臨床表現(xiàn)為多飲、多尿、多食、體重減輕，伴有高血糖和高尿糖。在本研究中，我們的發(fā)現(xiàn)表明，RPP是一種有效的抗糖尿病成分，具體體現(xiàn)在維持體重，降低顯著升高的血糖，恢復(fù)嚴(yán)重受損的胰島。

1型糖尿病是由產(chǎn)生胰島素的胰腺β細(xì)胞被機(jī)體的異常自身免疫應(yīng)答破壞引起的。這是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，在這個(gè)過程中，先天和適應(yīng)性免疫反應(yīng)都參與其中。目前尚不清楚這種疾病是如何引發(fā)的[18]。然而，新的證據(jù)表明胰島細(xì)胞的破壞與免疫細(xì)胞和炎癥因子有關(guān)[19]。這些由巨噬細(xì)胞和毒性T細(xì)胞分泌的促炎細(xì)胞因子和自由基是β細(xì)胞死亡的介質(zhì)[20]。因此，阻斷炎癥因子有利于預(yù)防胰島損傷和控制糖尿病的發(fā)展。糖尿病大鼠血清中CD4和CD8分子的濃度顯著降低表明RPP可以通過降低CD4和CD8分子濃度減少促炎細(xì)胞因子的釋放。糖尿病大鼠血清促炎細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2水平明顯高于正常大鼠，提示STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠炎癥反應(yīng)是逐漸觸發(fā)的。RPP干預(yù)明顯降低了糖尿病大鼠TNF-α、IFN-γ和IL-2的上調(diào)，提示RPP可減輕STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的炎癥反應(yīng)。值得注意的是，RPP雖然降低了糖尿病大鼠TNF-α、IFN-γ和IL-2的產(chǎn)生，但其濃度并不低于正常對(duì)照組。這可能是因?yàn)槊庖呦到y(tǒng)有自我調(diào)節(jié)機(jī)制來維持自身的平衡，因此，RPP對(duì)促炎細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用是適度的，不會(huì)破壞免疫系統(tǒng)的平衡，引起免疫抑制。RPP對(duì)糖尿病大鼠血清中的IgA、IgG、IgE和IgM也存在一定的影響。

人們普遍認(rèn)為自由基誘導(dǎo)發(fā)生在炎癥過程中。在糖尿病中，自由基是β細(xì)胞死亡的介質(zhì)之一?；钚匝趸鶊F(tuán)(reactive oxygen species， ROS)過量引起有害作用，觸發(fā)細(xì)胞損傷的特點(diǎn)是線粒體呼吸紊亂，氧化損傷，甚至老化[21]。過氧化產(chǎn)生的脂質(zhì)終產(chǎn)物MDA可逐漸積累并損傷細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙和細(xì)胞毒性[22]。然而，作為解毒的主要抗氧化酶，SOD和GSH-Px均能有效地減輕過氧化物損傷，并保持自由基產(chǎn)生與抗氧化防御能力之間的平衡[8，23]。在本研究中，STZ注射液顯著降低了糖尿病大鼠血清和胰腺組織中SOD和GSH-Px的活性，增加了MDA的生成。然而，RPP消除了這些異常的抗氧化系統(tǒng)并降低了MDA含量。

4 結(jié)論

RPP可以維持糖尿病大鼠的體重，明顯降低其血糖濃度，并且可以一定程度上修復(fù)糖尿病大鼠受損的胰島β細(xì)胞。RPP還能明顯降低糖尿病大鼠血清中免疫相關(guān)因子CD4、CD8分子、IFN-α、IL-2、TNF-γ以及IgG、IgA、IgE和IgM的含量。除此之外，RPP能顯著提高糖尿病大鼠胰腺和血清中SOD、GSH-Px的活性，并明顯降低MDA的含量。綜上所述，RPP可以通過減輕免疫反應(yīng)和氧化應(yīng)激改善胰島β細(xì)胞的損傷來維持胰腺的代謝功能，顯示出了良好的治療1型糖尿病的活性，具有廣闊的開發(fā)前景。