不同種源黑老虎根莖中總木脂素含量分析及綜合評價

郭霞，陸文，李善志，林旭俊，李曉斌

（海南省林業科學研究院，海南海口 571100）

黑老虎 (Kadsuracoccinea(Lemaire)A.C.Smith)，是五味子科南五味子屬的木質藤本植物，具有較高的食用、藥用價值[1-2]。果實較大、味酸甜，富含多種人體必需的氨基酸和微量元素，無毒并具有調節血脂的作用[3-4]，是一種具有較好市場前景的珍稀水果[5-7]；根及藤莖中含有大量的木脂素成分，具有抗腫瘤、抗艾滋病毒、抗炎以及血小板活化因子拮抗等廣泛的生物活性[8-12]。該研究從黑老虎藥用價值角度出發，對收集到的6 個種源黑老虎的根、莖中木脂素含量進行測定，比較分析不同種源間的差異，并進一步進行分析，同時結合苗木生長情況，篩選出在海南生長的、品質最佳的黑老虎種源。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料

該研究收集的種源分別是海南樂東、海南陵水、湖南懷化、廣西龍盛、海南昌江、海南萬寧，根、莖來自于2 年生的種子苗。選擇管理、生長狀況一致的植株，每株作為1 個處理，共3 個重復。

1.1.2 儀器

0.1mg 電子天平；恒溫鼓風干燥箱；電熱恒溫水浴鍋；紫外分光光度計等。

1.2 方法

1.2.1 樣品預處理

采取無病蟲害的樣本，清理干凈，置于50℃恒溫鼓風干燥箱中烘36h 后，粉碎并過篩，待測試用。

1.2.2 木脂素測定

該研究以五味子酯甲為標準對照，采用紫外分光光度法測定不同種源黑老虎根、莖中總木脂素的含量。

樣品處理：0.3g 樣品粉末，加入100ml 甲醇，水浴回流2h。過濾，濾液減壓濃縮，轉移至25ml 容量瓶，甲醇定容。

對照品溶液制備：精密稱取五味子酯甲對照品(純度95.2%)5.84mg，置于10ml 容量瓶中，甲醇溶解并定容，搖勻，即得濃度為0.556mg/ml 的對照品溶液。

標準曲線制定：精密吸取對照品溶液160μl、320μl、480μl、640μl、800μl 于試管中，另取480μl 甲醇做空白，待溶劑揮發后(水浴加熱蒸干溶劑)，依次加入1ml 10%變色酸溶液，6ml 濃硫酸，加蒸餾水補足至10ml，沸水浴30min，冰浴冷卻，與571nm 處測吸光度。

測定：精密吸取供試品溶液480μl，照標準曲線制備項下的方法，自“揮發”起，同法操作，測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中五味子酯甲的含量。

1.3 數據處理

利用Excel 2010 和spss21.0 軟件對試驗數據進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 不同種源黑老虎根部總木脂素含量測定

6 個種源地的黑老虎根部總木脂素含量測定都是基于同一個標準曲線下進行測定。不同種源黑老虎根部總木脂素含量測定結果見表1：

表1 不同種源黑老虎根部總木脂素含量測定Tab.1 Determination and evaluation of total lignans in roots of Kadsuracoccinea from different provenances

根據表1，可以看出總木脂素含量均值順序為：懷化＞龍盛＞昌江＞樂東＞陵水＞萬寧。

變異系數的數值越大，反映性狀的離散程度越大，種源間總木質素含量的離散程度也就越大。根據表1 可以看出陵水種源變異系數達到41.1%，其次是龍盛種源（37.28%），最小的是懷化種源（15.97%）。結合總木脂素含量的均值與變異系數，可以看出懷化種源總木脂素含量最豐富的，且離散程度最小。

該研究采取了S-N-K 方法進行差異性分析，如表2：

表2 不同種源黑老虎根部總木脂素含量差異性Tab.2 difference of total lignans content in roots of Kadsuracoccinea of Different Provenances

根據表2，可以更加直觀的看出6 個種源之間總木脂素含量的差異性。陵水、樂東、昌江、龍盛、懷化之間差異性不顯著，但是萬寧種源和龍盛、懷化種源之間差異顯著，通過LSD 方法驗證，萬寧種源與龍盛、懷化種源顯著性p 值分別為0.06、0.003，均小于0.05，兩者結果一致。

2.2 不同種源黑老虎根莖部總木脂素含量測定

根據表3 數據統計，黑老虎莖部總木脂素含量龍盛種源最多，其次為萬寧、昌江、懷化、樂東；根據變異系數可知，樂東種源離散程度最大，萬寧種源離散程度最小。

表3 不同種源黑老虎莖部總木脂素含量測定Tab.3 Determination and evaluation of total lignans in stem of Kadsuracoccinea from different provenances

該研究采取了S-N-K 方法進行差異性分析，如表4，6 個種源間莖部總木脂素含量差異不顯著。

表4 不同種源黑老虎莖部總木脂素含量差異性Tab.4 difference of total lignans content in stem of Kadsuracoccinea of Different Provenances

3 結論與討論

大量研究表明，五味子木脂素類成分有消炎、抗氧化、抵抗病毒等藥用作用，并且對肝臟的保護具有明顯效果[13-14]。木脂素為黑老虎的主要有效活性成分之一，該研究以五味子酯甲為標準對照[15-18]，采用紫外分光光度法測定不同種源黑老虎中總木脂素含量，通過不同種源在海南生長情況的對照，綜合評定最佳種源，為黑老虎在海南的推廣提供參考。

根據觀察，目前長勢最好的是陵水（平均株高2.26m）和懷化（平均株高2.31m）；根部總木脂素含量差異性分析表明萬寧種源和龍盛、懷化種源之間差異顯著，另外懷化種源含量最高；6 個種源的莖部總木脂素含量差異性分析不顯著，6 個種源的含量都在0.7 以上。綜合評價，2 年生的6 個黑老虎種源中，懷化種源長勢和總木脂素含量表現最佳，為后續不同種源黑老虎的加工利用、選擇優良種源提供參考。