常規(guī)生化檢驗(yàn)的酶轉(zhuǎn)換法對血清同型半胱氨酸的檢測價值

夏延武

（山東省濱州市鄒平市黃山街道社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，山東 濱州）

0 引言

生化檢驗(yàn)的指標(biāo)是各類疾病的重要診斷指標(biāo)，可以反映出機(jī)體代謝情況及受損程度，為治療提供參考依據(jù)。有研究表明，血清同型半胱氨酸（Hcy）能夠反映心腦血管疾病的嚴(yán)重程度，Hcy 是蛋氨酸代謝產(chǎn)物之一，并表明機(jī)體Hcy 水平與心腦血管疾病發(fā)生率具有緊密的聯(lián)系,是誘發(fā)心腦血管疾病發(fā)生的獨(dú)立因素[1]。諸多文獻(xiàn)表明，機(jī)體Hcy 水平與神經(jīng)功能缺損程度呈正比；當(dāng)機(jī)體內(nèi)Hcy 水平上升，便會對神經(jīng)血管造成損害，增加心腦血管疾病發(fā)生的可能性。因此，選取科學(xué)、有效的檢驗(yàn)方法對生化指標(biāo)的測定具有重要意義。本研究對我院2017 年10 月至2019 年10 月的102 例患者以及100 名健康體檢者應(yīng)用酶轉(zhuǎn)換法進(jìn)行血清同型半胱氨酸檢驗(yàn)，試分析酶轉(zhuǎn)換法在生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用價值，詳見下文。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2017 年10 月至2019 年10 月我院進(jìn)行常規(guī)生化檢驗(yàn)的102 例患者納入研究，歸為實(shí)驗(yàn)組，并選取同時間段至我院體檢的100 例體檢健康者作為參照組，經(jīng)告知后所有研究對象均自愿參與，并簽署相關(guān)文件，經(jīng)我院相關(guān)醫(yī)學(xué)部門準(zhǔn)許。所有研究對象均應(yīng)用酶轉(zhuǎn)換法檢驗(yàn)血清同型半胱氨酸（Hcy）。參照組中男59 例，女41 例；年齡34～78歲，平均（53.1±2.6）歲。實(shí)驗(yàn)組中男63 例，女39 例；年齡41～78 歲，平均（56.2±2.4）歲；實(shí)驗(yàn)組中的患者均為心腦血管疾病，包括高血壓、冠心病、腦梗死。所有病人的基本信息比較無顯著差異（P＞0.05），存在可比性。

1.2 方法

于患者晨起空腹?fàn)顟B(tài)下，取1 管2 mL 靜脈血，使用日立7600 全自動生化分析儀（試劑：Tris 緩沖劑、FeCl3，濃度均為50 mmol/L，由威特曼生物科技有限公司提供），同型半胱氨酸酶包括同型半胱氨酸酶、5-磷酸吡哆醛，濃度分別為500 U/L、5 mmol/L[2]。經(jīng)3000 r/min 離心處理10 min，通過酶轉(zhuǎn)換法進(jìn)行血清同型半胱氨酸（Hcy）檢驗(yàn)；檢測過程中將溫度、波長、吸光度范圍、比色杯光徑分別調(diào)控為37 ℃、669 nm、0～2 A、1.0 cm，樣品量為200 μL；使用2000 μL Tris緩沖劑，進(jìn)行5 min 的持續(xù)反應(yīng)；同時使用300 μL FeCl3進(jìn)行5 min 左右的持續(xù)反應(yīng)[3]。由于血液樣本的質(zhì)量會對檢驗(yàn)結(jié)果形成直接影響，因此在采集血液樣本以及檢驗(yàn)的過程中需注意預(yù)防標(biāo)本溶血：（1）嚴(yán)格遵循無菌操作原則；（2）采集血液標(biāo)本時止血帶不宜捆綁太緊，時間不宜過長，穿刺部位皮膚要干燥清潔，抽取血液時速度應(yīng)緩慢進(jìn)行；（3）合理保存標(biāo)本，切勿劇烈晃動，不可冷凍；（4）重視采血器械的質(zhì)量，選擇信譽(yù)較好的生產(chǎn)廠家，確保包裝無漏氣，抗凝劑無沉淀或過期；（5）檢驗(yàn)血液標(biāo)本時，應(yīng)控制好離心速度，避免對紅細(xì)胞造成破損[4]。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察對比兩組研究對象血清同型半胱氨酸指標(biāo)的檢驗(yàn)結(jié)果。同型半胱氨酸醫(yī)學(xué)參考值范圍：0～15 μmol/L。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

將數(shù)據(jù)納入SPSS 19.0 統(tǒng)計學(xué)軟件中進(jìn)行分析，計量資料以（）表示，t 檢驗(yàn)，P＜0.05 可認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組患者的Hcy 水平（15.26±2.13）μmol/L 高于參照組健康人群Hcy 水平的（9.21±1.58）μmol/L，差異較大（P＜0.05），見表1。

表1 兩組研究對象Hcy 檢驗(yàn)結(jié)果對比

表1 兩組研究對象Hcy 檢驗(yàn)結(jié)果對比

組別 例數(shù) Hcy（μmol/L）實(shí)驗(yàn)組 102 15.26±2.13參照組 100 9.21±1.58 t 22.892 P 0.000

3 討論

當(dāng)前，隨著我國社會環(huán)境的變化，人們的飲食、生活習(xí)慣等方面發(fā)生了較大的改變，導(dǎo)致心腦血管發(fā)病率不斷上升且呈年輕化趨勢。心腦血管疾病多發(fā)于中老年群體，致殘、致死率高、預(yù)后效果差，對病人的身體健康和生命安全均存在不利影響。同型半胱氨酸是機(jī)體中的代謝產(chǎn)物，能夠與血液中的蛋白質(zhì)相結(jié)合，可誘發(fā)心腦血管疾病以及加速病情惡化。

臨床診斷中較為常用的方式是生化檢驗(yàn)，是指利用生物或化學(xué)指標(biāo)對人體疾病情況做出判斷。Hcy 是機(jī)體代謝產(chǎn)物，當(dāng)機(jī)體內(nèi)Hcy 水平上升，便會對神經(jīng)血管造成損害，增加心腦血管疾病發(fā)生的可能性。患者機(jī)體內(nèi)Hcy 水平越高，反映其神經(jīng)功能的缺損程度越嚴(yán)重，可以反映患者的病情嚴(yán)重程度。諸多研究學(xué)者提出，高Hcy 血癥可能就是心血管疾病的獨(dú)立危險因素[5]。Hcy 具有3 條代謝途徑：（1）再甲基化：Hcy 能夠從葉酸中獲取甲基，與蛋氨酸合成酶相互作用生成蛋氨酸。（2）轉(zhuǎn)硫基：在B-胱硫醚合成酶和VB6的作用下，Hcy 與絲氨酸合成為胱硫醚。（3）細(xì)胞內(nèi)合成的Hcy融入血液中，使血液中Hcy 濃度增加，在代謝過程中，任何代謝所需酶以及代謝產(chǎn)物出現(xiàn)異常均可致使血漿HCY 含量增高。健康人體中Hcy 水平一般在5～15 μmol/L[6]。本文通過對心腦血管疾病患者和體檢健康者應(yīng)用酶轉(zhuǎn)換法對Hcy 水平進(jìn)行檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)心腦血管疾病患者機(jī)體內(nèi)的Hcy 水平明顯高于健康人群（P＜0.05）。可知，同型半胱氨酸能夠作為心腦血管疾病的診斷指標(biāo)，通過生化檢驗(yàn)結(jié)果分析患者的病情狀況，并針對性的制定相應(yīng)的治療方案，盡量控制病情的惡性發(fā)展，提高患者的生存率。常規(guī)生化檢驗(yàn)應(yīng)用酶轉(zhuǎn)換法具有抗干擾作用強(qiáng)、靈敏度較高、檢驗(yàn)結(jié)果可靠等特點(diǎn)[7]。臨床中生化檢驗(yàn)方法除酶轉(zhuǎn)換法外，還包括高效液相色譜法、熒光偏振免疫法，其中高效液相色譜法是生化檢驗(yàn)中普遍使用的方法，但該方法所需設(shè)備較特殊，難以在基層實(shí)驗(yàn)室普及；該方法通過使用還原劑將血樣中的Hcy 轉(zhuǎn)變?yōu)檫€原狀態(tài)，隨后用熒光試劑生成同型半胱氨酸-熒光物質(zhì)復(fù)合物，色譜分析復(fù)合樣品。由于色譜法對于不同物質(zhì)具有不同的吸附力，因此將Hcy 分層脫落下來表現(xiàn)出不同的次序，采用熒光檢測器對生成同型半胱氨酸-熒光物質(zhì)復(fù)合物的熒光度進(jìn)行檢驗(yàn)。熒光偏振免疫法：Hcy 與樣品中游離Hcy 具有不同的熒光偏振強(qiáng)度，通過結(jié)合抗體、樣品、標(biāo)準(zhǔn)液將Hcy 水平和熒光偏振強(qiáng)度的曲線圖描繪出來，將Hcy 與曲線圖對應(yīng)查找出來[8]。采用生化檢驗(yàn)項目對心腦血管疾病患者進(jìn)行檢測，可以為臨床診斷疾病和評估分析病情等工作提供科學(xué)依據(jù)。

有關(guān)醫(yī)學(xué)研究表示，在血清同型半胱氨酸指標(biāo)的生化檢驗(yàn)中，相對于高效液相色譜法、熒光偏振免疫法，酶轉(zhuǎn)換法檢驗(yàn)精密度較高，具有操作簡便、線性范圍寬、檢驗(yàn)結(jié)果精準(zhǔn)等特點(diǎn)，在常規(guī)生化檢驗(yàn)中采用酶轉(zhuǎn)換法檢驗(yàn)Hcy 具有較高的參考價值，為相關(guān)疾病的臨床診治提供可靠的參考指標(biāo)。

綜上所述，酶轉(zhuǎn)換法在常規(guī)生化檢驗(yàn)中對血清同型半胱氨酸的檢驗(yàn)價值較高，心腦血管疾病患者的Hcy 水平明顯高于健康者，可作為疾病診治和療效判定的參考指標(biāo)，具有較高的臨床應(yīng)用價值。