主要種子貿易國家番茄褐色皺果病毒植物檢疫措施

王建坤劉曉超劉鑫姜莉李隆旭邱占奎王澤鴻馮黎霞付海濱

(1.沈陽海關，遼寧 沈陽 110179；2.大連海關，遼寧 大連 116001；3.廣州海關技術中心，廣東 廣州 5106236；4.沈陽海關技術中心，遼寧 沈陽 110016)

番茄褐色皺果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)主要為害番茄、辣椒等茄科作物[1]，2014年在約旦第1次鑒定出來[2]，目前全世界53個國家和地區已有報道[3]。本文對番茄褐色皺果病毒的發生和危害、主要種子貿易國家番茄褐色皺果病毒檢疫措施進行綜述，并提出防治和脫毒處理建議。

1 發生與危害

番茄褐色皺果病毒(ToBRFV)分類學上歸于帚狀病毒科(Virgaviridae)、煙草花葉病毒屬(Tobamovirus)，主要寄主為番茄和辣椒，還可侵染茄子、龍葵、煙草、藜麥等。目前已報道病毒發生的國家和地區包括墨西哥、美國、比利時、法國、荷蘭、以色列、德國、土耳其、約旦、希臘、英國、巴勒斯坦、意大利、西班牙、中國(已根除)等[3，4]。

番茄褐色皺果病毒主要為害寄主植物的葉片、莖稈、花萼和果實等部位。病毒入侵后，嫩葉、頂芽會出現花葉的癥狀；葉片會出現變窄、畸形的癥狀；莖稈和萼片會顯露壞死條斑；花萼早期會產生著色、褐變，后期極易出現干枯癥狀；果實會出現黃色斑點、斑塊，后期變成褐色，果實可變形，直至壞死，對果實的品質和產量有極大影響，該病毒能夠隨植物種子進行遠距離傳播[5]，已被列入我國的進境植物檢疫性有害生物名錄[6]。

注：圖片來源于CABI，2024。

注：圖片來源于CABI，2022。

2 主要種子貿易國家和地區檢疫措施

番茄褐色皺果病毒擴散迅速，已經引起國際間的高度重視，包括我國在內的歐盟、美國、日本、韓國、澳大利亞、新西蘭、土耳其、俄羅斯等多個國家和地區都相繼采取緊急措施，防止其傳入。

2.1 國際檢疫措施

《國際植物保護公約》要求，國家官方植物保護組織必須監測植株生長情況，準確了解當地植株生長各個階段的疫情情況，強化疫情監測調查，發現可疑情況的，及時采樣鑒定。同時，國家官方植物保護組織要及時報告有害生物的發生以及擴散情況，對出口的植物、植物產品進行檢疫，發放符合目的地國家或者地區要求的植物檢疫證書，以防止其通過國際間的運輸進行傳播。為防止有害生物傳入和擴散，各國可按照適用的法律、法規及其他相關規定，對植物、植物產品及其他檢疫物的輸入指定和采取植物檢疫措施，如檢查、檢疫處理或者禁止入境。《種子的國際運輸》(國際植物檢疫措施標準第38號)指出，種子與其他的植物繁殖材料一樣，存在傳帶有害生物的風險，當種子被引進到一個新的環境中，其傳帶有害生物，并導致有害生物定殖和擴散可能性很高。國家官方植物保護組織應當施行與有害生物風險結果相符合的植物檢疫措施，以防止檢疫性有害生物隨種子進行傳播和擴散。要按照國際植物檢疫措施標準《有害生物風險分析框架》(ISPM 2)、《檢疫性有害生物風險分析》(ISPM 11)和《限定的非檢疫性有害生物風險分析》(ISPM 21)，針對性地開展進出境種子攜帶有害生物的風險分析，以及確定后續要采取的植物檢疫措施。植物檢疫措施可以施用于作物生長及種子生產、加工過程中的各個時期。各項植物檢疫措施可以單獨或聯合施行，以降低有害生物風險傳播風險[7]。

2.2 我國檢疫措施

《中華人民共和國進出境動植物檢疫法》要求防止植物病毒等有害生物傳入、傳出國境[8]。海關總署于2021年發布了《關于防止番茄褐色皺果病毒隨番茄和辣椒屬種子傳入的公告》，要求從種植期間就要加強對番茄、辣椒種子的管理控制。入境種子需符合以下3種情況，并在植物檢疫證書上予以注明：種子輸出國家或地區沒有該有害生物發生；種子輸出國家或地區部分地區雖然發生植物疫情，但按照第4號國際植物檢疫措施標準《建立非疫區的要求》建立了該有害生物的非疫區，且出口的種子產自非疫區；輸出國家或地區發生植物疫情，并且也沒有按要求建立非疫區，國家植物保護組織在種植期間實施田間監測，確認在種植期間沒有疫情發生，并在出口前對該批種子抽樣，使用逆轉錄—聚合酶鏈反應方法或實時熒光逆轉錄—聚合酶鏈反應方法進行檢測，確認不帶番茄褐色皺果病毒[1]。

2.3 歐盟檢疫措施

歐盟委員會對該有害生物高度重視，其下屬的衛生與食品安全總司分別于2020年、2021年、2023年下達了“EU第2020/1191”“EU第2021/74”和“EU第2023/1032”共3個歐盟指令，發布并2次修訂了防止疫情傳入并擴散的檢疫措施，主要涉及進口要求和檢疫措施，將番茄褐色皺果病毒列入歐洲和地中海國家植物保護組織A2類檢疫性有害生物名錄，進行嚴格管控，要求對從歐盟成員國以外的國家或地區入境的番茄和辣椒種子，應由主管部門或主管部門正式監督下的專業機構對種子進行取樣，并檢測是否攜帶番茄褐色皺果病毒(ToBRFV)。取樣按照《貨物抽樣方法》(國際植物檢疫措施標準第31號)執行，≤1000粒種子取樣量為28粒種子、1001～3000粒種子取樣量為58粒種子、3001～30000粒種子取樣量為284粒種子、>30000粒種子取樣量為1000粒種子，針對種子樣品，歐盟認可的檢測方法只有實時熒光RT-PCR方法，酶聯免疫吸附測定法和常規RT-PCR不允許用于種子中番茄褐色皺果病毒的檢測。同時，要求在植物檢疫證書上附加聲明：種子的母本植株是在根據適當時間進行的番茄褐色皺果病毒官方檢查確認已知未發生番茄褐色皺果病毒的生產基地生產，種子或母本植株按照(EU)2023/1032要求，進行官方取樣和檢測，不攜帶番茄褐色皺果病毒，并注明母本植株生產基地、注冊號。對于源自第三國的對番茄褐色皺果病毒具有抗性的番茄種子、辣椒種子，在植物檢疫證書中要進行聲明。

2.4 美國檢疫措施

美國農業部動植物檢疫局(APHIS)于2019年發布了控制番茄和辣椒2種植物進口措施的聯邦法令，認為番茄和辣椒是ToBRFV的2種主要寄主，以上2種作物的種子是番茄褐色皺果病毒傳入的高風險途徑，鑒于種子生產的全球性和種子的跨國運輸，其分布范圍可能比報道的還要大，有必要采取措施限制番茄褐色皺紋果病毒(ToBRFV)的主要寄主植物番茄和辣椒的種子進口。根據美國農業部動植物檢疫局(APHIS)的要求，輸往美國的種子不能帶有該有害生物，要求種植輸往美國的番茄、辣椒種子的地區不能發生疫情，對于輸往美國的種子，要求在植物檢疫證書上附加聲明：該批番茄種子和/或辣椒種子的具體產地，該地區經過國家植物保護機構認定沒有番茄褐色皺紋果病毒；或該批番茄和/或辣椒種子的代表性樣品經過官方檢測，不攜帶番茄褐色皺果病毒[10]。

2.5 日本檢疫措施

日本農林水產省(MAFF)對《植物保護法實施條例》附表2-2第36項規定的現行措施進行修改，對于來自所有國家和地區的辣椒和番茄種子，包括一般貿易、寄遞和個人攜帶渠道，都要進行番茄褐色皺果病毒檢測，并將結果體現到植物檢疫證書中。檢測方法：在收獲期，隨機從番茄或辣椒植株中抽取樣本，重點為有疑似癥狀的植株，通過常規逆轉錄—聚合酶鏈反應等方法進行檢測，證明不帶有番茄褐色皺果病毒；在出口前，采用國際種子聯盟協議建議的方法，采取實時熒光逆轉錄—聚合酶鏈反應方法進行檢測，證明不帶有番茄褐色皺果病毒。取樣數量：根據國際種子檢測協會(ISTA)的要求，隨機從批次中抽取樣品，種子粒數≥46000粒時，取樣4600粒進行病毒檢測，種子數量<46000粒，抽采10%的種子進行檢測。經檢測證明不帶有番茄褐色皺果病毒，輸出國國家植物保護組織需要在植物檢疫證書上附加聲明：該批種子符合《植物保護法實施條例》(MAFF第73/1950號法令)附表2-2第36項(親本植物適用的檢測方法)或(種子實時熒光RT-PCR檢測方法)[11]。

2.6 韓國檢疫措施

韓國農林、畜產、食品部(MAFRA)對進出境種子攜帶番茄褐色皺紋果病毒(ToBRFV)進行了有害生物風險分析，增補修訂了檢疫措施。對來自中國、土耳其、法國、德國、荷蘭等35個國家和地區的辣椒屬和番茄種子，要求進行RT-PCR檢測，具體要求為種子出口前進行檢測。檢測樣品量為4600粒以上，子樣品不得少于400粒。對于總量在46000粒以下的小批量種子，抽檢的樣品應不得低于總量的10%。同時在植物檢疫證書上附加聲明：出口前通過PCR檢測證明該種子未感染番茄褐色皺果病毒。后期又在重點關注國家名單中增加阿根廷、俄羅斯等6個國家和地區[12]。

2.7 其他主要種子貿易國家檢疫措施

澳大利亞要求每批次入境的番茄和辣椒種子采用逆轉錄—聚合酶鏈反應方法檢測種子是否攜帶番茄褐色皺果病毒，相關情況需要植物檢疫證書上予以明確，以降低番茄褐色皺果病毒有可能造成的生物安全風險。新西蘭要求進境番茄和辣椒種子都要自番茄褐色皺果病毒的非疫區或非疫產地，或最少抽取3000粒樣品采用官方認可的方法進行檢測，不得檢出發現該病毒。土耳其對德國、墨西哥、約旦、以色列、意大利等國家和地區輸土耳其的番茄與辣椒種子提出了明確的檢疫措施，要求不得攜帶番茄褐色皺果病毒，相關種子必須經逆轉錄—聚合酶鏈反應方法檢測，番茄褐色皺果病毒不得檢出，植物檢疫證書中必須注明以上情況，方可入境。俄羅斯對所有入境番茄和辣椒的果實和種子進行植物病毒檢測，重點為番茄褐色皺果病毒。阿根廷鑒于番茄褐色皺果病毒(ToBRFV)極有可能隨種子國際貿易傳入，將該病毒列入監管有害生物名錄，并將該病毒的發生國家列為重點關注國家，提出具體的植物檢疫要求，要求進境番茄和辣椒種子不得帶有番茄褐色皺果病毒[13]。

3 對策建議

我國是番茄、辣椒等農作物種子制種大國，也是番茄和辣椒的主要生產國，每年番茄、辣椒種子進出口量極大，作物播種面積廣泛，農業生產和生態安全面臨嚴重威脅。鑒于機械傳播是番茄褐色皺果病毒最主要的傳播方式[14]，因此，建議防控病毒的首要任務是加強檢疫與田間管理，加強進出境檢疫，切斷傳播途徑，并配合脫毒技術研究。

3.1 加強田間管理

番茄褐色皺紋果病毒可通過汁液摩擦、移栽、修剪、噴藥等農事操作傳播，加強田間管理舉措尤為重要。確保使用的種子無毒，進行定期土壤消毒，發現受感染或疑似感染植株時，建議及時清除。在農事操作前應洗手并消毒，佩戴一次性手套，操作過程中定時對人員和工具進行消毒。污染的設備可用家用漂白劑(0.5%次氯酸鈉)、2%的過硫酸氫鉀三鹽復合物、10%磷酸三鈉或者20%脫脂奶粉進行消毒[14]。

3.2 加強進出境檢疫

對進境種子及其證書進行嚴格檢疫和審核，檢出番茄褐色皺果病毒或發現證書不符合要求的，依據中華人民共和國動植物檢疫法做退運或銷毀處理[1]。

3.3 加強疫情和信息監測

加強外繁制種等種子基地的疫情監測，發現問題，及早根除。通過國外官方植物保護組織網站、學術期刊等渠道，搜集國外番茄褐色皺紋果病發生信息和檢疫政策變化，

3.4 加強脫毒處理技術的研究

脫毒技術的研究，有助于防止番茄褐色皺果病毒隨進出口種子傳入、傳出，促進我國種子的出口和優質種質資源的引入，保護我國生態安全。相關國外研究發現，使用磷酸三鈉和鹽酸處理帶毒種子，能夠有效殺滅其攜帶的病毒，經過特定濃度和時長的處理后，經生物學和血清學檢測，有效率達100%，且有助于種子的萌發[15]。目前，國內尚無番茄褐色皺果病毒脫毒處理技術的研究，有必要進行加強。