不同透皮吸收促進劑對黃綿馬酸BB乳膏體外透皮吸收的影響

梁玉婷　劉小赟　潘敬靈　吳小詩　黃曉彤　唐春萍　沈志濱

中圖分類號 R944.2+1 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2020）05-0590-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.05.17

摘 要 目的：研究不同透皮吸收促進劑對黃綿馬酸BB乳膏體外透皮吸收的影響。方法：分別制備含1%氮酮、2%氮酮、3%氮酮、4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸、1%氮酮+1%薄荷醇、1%氮酮+1%丙二醇、1%氮酮+1%油酸、1%薄荷醇+1%丙二醇等11種不同透皮吸收促進劑的黃綿馬酸BB乳膏。采用改良Franz擴散池，以離體雄性大鼠腹部皮膚為透皮屏障，通過超高效液相色譜法測定接受液中黃綿馬酸BB含量，并計算24 h內的單位面積累積透過量（Q24 h）和經皮滲透速率（Jss）;同時與無透皮吸收促進劑的黃綿馬酸BB乳膏進行比較，計算增滲比（ER）。結果：含上述11種透皮吸收促進劑的黃綿馬酸BB乳膏的Q24 h分別為（82.96±7.15）、（80.17±0.66）、（78.22±1.87）、（73.53±1.24）、（35.65±2.23）、（34.02±1.73）、（42.68±2.66）、（33.94±1.37）、（34.16±1.54）、（46.78±1.21）、（43.66±1.69） μg/cm2，Jss分別為（5.26±0.10）、（4.69±0.12）、（4.45±0.45）、（4.00±0.06）、（3.74±0.33）、（3.23±0.18）、（3.73±0.53）、（3.14±0.47）、（3.54±0.11）、（3.98±0.34）、（4.34±0.14） μg/（cm2·h），ER分別為2.055、1.831、1.738、1.564、1.462、1.263、1.456、1.227、1.385、1.557、1.698。結論：以上透皮吸收促進劑均可增強黃綿馬酸BB乳膏的透皮吸收作用，其中以1%氮酮的作用最強。

關鍵詞 黃綿馬酸BB乳膏;透皮吸收促進劑;經皮滲透;體外

Effects of Different Penetration Enhancers on in vitro Transdermal Permeation of Flavaspidic Acid BB Cream

LIANG Yuting1，LIU Xiaoyun1，PAN Jingling1，WU Xiaoshi1，HUANG Xiaotong1，TANG Chunping1，SHEN Zhibin1，2（1.School of TCM， Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006， China;2.Guangdong Provincial Cosmetics Engineering Technology Research Center， Guangzhou 510006， China）

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To study the effects of different penetration enhancers on in vitro transdermal permeation of Flavaspidic acid BB cream. METHODS： Flavaspidic acid BB cream was prepared， containing 11 kinds of different penetration enhancers as 1% azone， 2% azone， 3% azone， 4% azone， 1% menthol， 1% propylene glycol， 1% oleic acid， 1% azone+1% menthol， 1% azone+1% propanediol， 1% azone+1% oleic acid or 1% menthol+1% propanediol. Modified Franz diffusion cell was adopted using abdominal skin of isolated male rat as transdermal barrier. The content of flavaspidic acid BB was determined by UPLC. The accumulative transdermal amount （Q24 h） and percutaneous permeability （Jss） within 24 h were calculated; and compared with Flavaspidic acid BB cream without transdermal enhancer， the enhancement ratio （ER） was calculated. RESULTS： Q24 h of Flavaspidic acid BB cream with above 11 kinds of transdermal enhancers were （82.96±7.15），（80.17±0.66），（78.22±1.87），（73.53±1.24），（35.65±2.23），（34.02±1.73），（42.68±2.66），（33.94±1.37），（34.16±1.54），（46.78±1.21），（43.66±1.69） μg/cm2， respectively. Jss value were （5.26±0.10）， （4.69±0.12）， （4.45±0.45）， （4.00±0.06）， （3.74±0.33），（3.23±0.18）， （3.73±0.53）， （3.14±0.47）， （3.54±0.11），（3.98±0.34），（4.34±0.14） μg/（cm2·h）， respectively. ER were 2.055， 1.831， 1.738， 1.564， 1.462， 1.263， 1.456， 1.227， 1.385， 1.557， 1.698， respectively. CONCLUSIONS： All of the above transdermal absorption enhancers can enhance the percutaneous absorption of Flavaspidic acid BB cream， among which， 1% azone is the best.

KEYWORDS? ?Flavaspidic acid BB cream; Transdermal absorption enhancer; Transdermal permeability; in vitro

香鱗毛蕨[Dryopteris fragrans（L.）Schott]為鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物，民間廣泛用于治療多種皮膚病，如牛皮癬、頭癬及腳癬等，其主要的生物活性成分為間苯三酚類成分[1]，具有抗菌、止癢、抗氧化等多種藥理作用[2-4]。其中，黃綿馬酸BB是香鱗毛蕨中含量最高的間苯三酚類成分[5]。本課題組前期研究表明，黃綿馬酸BB具有良好的抗真菌和抗革蘭氏陽性菌作用，但關于其體外透皮性能還沒有系統研究。外用制劑具有不受肝首關效應和腸胃道破壞影響、可直達病灶的獨特優點[6]，但皮膚是其有效成分吸收起效的主要屏障，在外用制劑中加入透皮吸收促進劑有利于藥物通過皮膚屏障到達靶組織[7]。因此，選擇理想的透皮吸收促進劑是外用制劑研究的主要內容之一。

透皮吸收促進劑是一種能可逆地改變皮膚角質層屏障功能又不損傷任何活性細胞的物質，可用于增強藥物透皮能力，提高藥物透皮量[8]。為了乳膏中的有效成分能更好地進入皮膚，從而更好地發揮療效，處方中應該加入合適且適量的透皮吸收促進劑。目前，透皮吸收促進劑主要分為天然透皮吸收促進劑與合成透皮吸收促進劑。天然透皮吸收促進劑主要有薄荷類、揮發油類，合成透皮吸收促進劑常用的有醇類、亞砜類、脂肪酸類、脂肪酸酯類、酮類、有機鹽類等[9]，其中以氮酮、薄荷醇、油酸、丙二醇及其聯用較為常見[10]。本研究擬通過考察黃綿馬酸BB乳膏體外透皮吸收行為，比較11種常見的透皮吸收促進劑（1%氮酮、2%氮酮、3%氮酮、4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸、1%氮酮+1%薄荷醇、1%氮酮+1%丙二醇、1%氮酮+1%油酸、1%薄荷醇+1%丙二醇）對其體外透皮吸收的影響，為篩選黃綿馬酸BB乳膏優良的透皮吸收促進劑提供參考。

1 材料

1.1 儀器

BT125D型十萬分之一電子天平（德國Sartorius公司）;AUY120型萬分之一電子天平（日本島津公司）;SB-1200型水浴鍋（上海愛朗儀器有限公司）;KQ-500E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）;TK-20B型透皮擴散試驗儀（上海鍇凱科技貿易有限公司）; ACQUITY H-Class型超高效液相色譜（UPLC）儀（美國Waters公司）。

1.2 藥品與試劑

黃綿馬酸BB原料藥（批號：GC-CZ-180906，純度：≥98%）、黃綿馬酸BB對照品（批號：20180903，純度：≥98.5%）均來源于武漢長成化成科技發展有限公司;白凡士林（批號：2017120136，醫用級）、液體石蠟（批號：2016112031，分析純）、丙二醇（批號：2018051014，分析純）、無水乙醇（批號：2019041038，分析純）均購自天津市致遠化學試劑有限公司;十八醇（批號：20170220，分析純）、乙二胺四乙酸二鈉（批號：20141104，分析純）均購自天津市大茂化學試劑廠;對羥基苯甲酸甲酯（天津市科密歐化學試劑有限公司，批號：20180109，分析純）;維生素E（浙江醫藥股份有限公司，批號：20170419，藥用級）;單硬脂酸甘油酯（批號：M180820614，分析純）、對羥基苯甲酸丙酯（批號：C10106360，分析純）、? ?2，6-二叔丁基對甲酚（批號：C10377371，分析純）、月桂氮酮（批號：C10158832，純度：97%）、薄荷醇（批號：C10097271，純度：99%）、油酸（批號：C10375483，藥用級）均購自上海麥克林生化科技有限公司;脂肪醇聚氧乙烯醚O-9（江蘇省海安石油化工廠，批號：20171013，分析純）;甘油（濟南杰輝商貿有限公司，批號：20180617，醫用級）;甲醇（德國Merck公司，批號：10972907839，色譜純）;三氟乙酸[阿拉丁試劑（上海）有限公司，批號：J1626023，分析純];水為市售純凈水。

1.3 動物

SPF級SD大鼠，雄性，體質量180～220 g，購于廣東省實驗動物中心，生產許可證號為SCXK（粵）2018-0002。

2 方法與結果

2.1 乳膏的制備

稱取6 g凡士林、8 g液體石蠟、5 g十八醇、7 g單硬脂酸甘油酯、4 g脂肪醇聚氧乙烯醚O-9、4 g維生素E、0.3 g對羥基苯甲酸甲酯、0.2 g對羥基苯甲酸丙酯、0.5 g 2，6-二叔丁基對甲酚，加熱至80 ℃溶解，攪勻，降溫至65 ℃，加入1 g黃綿馬酸BB原料藥攪拌，超聲（功率：500 W，頻率：40 kHz）使其完全溶解，再加入1 g透皮吸收促進劑攪拌均勻，作為油相，備用;稱取12 g甘油、0.02 g乙二胺四乙酸二鈉、純化水適量（乳膏總量100 g），加熱至65 ℃溶解，作為水相。將油相緩緩倒入水相中，邊加邊攪拌至室溫，即得。用不同的透皮吸收促進劑分別制成含有1%氮酮、2%氮酮、3%氮酮、4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸、1%氮酮+1%薄荷醇、1%氮酮+1%丙二醇、1%氮酮+1%油酸、1%薄荷醇+1%丙二醇的黃綿馬酸BB乳膏。同法制備不含透皮吸收促進劑的黃綿馬酸BB乳膏和不含黃綿馬酸BB的陰性對照乳膏。

2.2 黃綿馬酸BB含量測定方法的建立

采用UPLC法測定黃棉馬酸BB的含量。

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取黃綿馬酸BB對照品約10 mg，置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解、定容，制成質量濃度為1 mg/mL的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密稱取黃綿馬酸BB乳膏約0.5 g，置于具塞錐形瓶中，加甲醇50 mL，稱質量，置于65 ℃水浴中加熱2 min，振搖使溶解，取出后，40 ℃下超聲（功率：500 W，頻率：40 kHz）處理10 min，放冷，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

常用的透皮吸收促進劑有氮酮、薄荷醇、丙二醇、油酸及其組合物等，且這些透皮吸收促進劑的常用質量分數大都在1%～5%[13]。筆者通過查閱相關文獻[14-15]，比較了1%～4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸單用對黃綿馬酸BB乳膏的促滲效果，以及同等用量下兩兩聯用對黃綿馬酸BB乳膏的促滲效果。本試驗結果表明，隨著氮酮濃度增加，其促透效果反而降低。推測原因可能是氮酮濃度增大，乳膏黏稠度增加，不利于黃綿馬酸BB的釋放及溶出，進而阻礙了其透皮吸收;且黃綿馬酸BB屬間苯三酚類衍生物，含有多個酚羥基，能和氮酮上的羰基形成氫鍵，不利于從膏劑中釋放出來[9]。在同等用量的條件下，氮酮的促滲作用明顯高于薄荷醇、丙二醇和油酸，氮酮與薄荷醇、丙二醇、油酸等聯用的促透效果也較其單用時降低。其原因可能是氮酮與薄荷醇有較強的親和力，降低了黃綿馬酸BB向角質層的分配比例，從而影響了滲透效果;丙二醇具有較大黏度，氮酮與丙二醇聯用后黏度增加，抑制了皮膚的水合作用，使藥物經皮滲透性降低[16]。

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（收稿日期：2019-10-25 修回日期：2020-01-15）

（編輯：鄒麗娟）