食品中單核細胞增生李斯特氏菌檢測結果的分析

范霞

摘 要：目的：分析食品中單核細胞增生李斯特氏菌的檢測結果，以及時發現食品安全隱患，為食品安全監管提供參考依據。方法：嚴格按照《2012年食源性致病菌監測工作手冊》中的單核細胞增生李斯特氏菌檢驗標準，對濟寧市2019年1—12月定期采樣的8類常用食品（生鮮豬肉、生鮮牛肉、生鮮羊肉、生鮮雞肉、凍蝦、凍帶魚、涼拌菜與冰激凌）進行單核細胞增生李斯特氏菌檢測，分析其陽性檢出率。結果：567份8類常用食品中，檢出單核細胞增生李斯特氏菌27份，陽性檢出率為4.76%，其中包括生鮮豬肉6份（5.94%）、生鮮羊肉5份（6.02%）、生鮮雞肉5份（5.10%）、凍蝦4份（7.69%）、凍帶魚2份（3.28%）以及涼拌菜5份（11.63%），生鮮牛肉與冰激凌均未檢出單核細胞增生李斯特氏菌。結論：食品中存在單核細胞增生李斯特氏菌污染的風險，其中以涼拌菜的污染風險最高，應加強該方面的防控，以確保食品安全。

關鍵詞：食品;單核細胞增生李斯特氏菌;檢測

單核細胞增生李斯特氏菌是一種食品中常見的細菌，可引起食物中毒，會導致免疫力低下人群出現胃腸炎、腦膜炎、敗血癥等疾病，孕婦還可能因此流產、死胎，會嚴重威脅人們的身體健康，甚至是生命安全，應引起高度重視[1]。生鮮豬肉、生鮮牛肉、生鮮羊肉、生鮮雞肉、凍蝦、凍帶魚、涼拌菜與冰激凌是人們日常生活中常見的食品，且通常置于低溫環境下（冰箱）保存，極易滋生單核細胞增生李斯特氏菌，成為人類感染該病原菌的傳播介質[2]。為了分析食品中單核細胞增生李斯特氏菌檢測結果，現就濟寧市定期采樣的8類常用食品的檢測過程與陽性檢出率進行分析，匯報如下。

1 資料與方法

1.1 樣本來源

選取本市2019年1—12月定期采樣的8類常用食品共567份，其中包括生鮮豬肉101份，生鮮牛肉94份，生鮮羊肉83份，生鮮雞肉98份，凍蝦52份，凍帶魚61份，涼拌菜43份以及冰激凌35份。

1.2 方法

1.2.1 樣品采樣

根據《2012年食源性致病菌監測工作手冊》的相關規定，嚴格遵照無菌操作原則，對本市2019年1—12月的食品安全風險監測樣品進行采樣。每份樣品單獨包裝，4 h內送檢。

1.2.2 培養基

鑒定生化培養基購自北京陸橋生物公司，單核細胞增生李斯特氏菌顯色培養基購自科碼嘉公司（生產批號：20120116），TSA-YE平板培養基購自上海廣銳生物科技有限公司，其他培養基與細菌系列生化鑒定系統均購自青島海博生物技術有限公司，LB1、LB2增菌液購自北京陸橋生物公司。各種培養基均于有效期內使用。

1.2.3 儀器與設備

HPX-9162MBE電熱恒溫培養箱（上海百典儀器有限公司），Thermo II級生物安全柜（江蘇迅迪儀器科技有限公司）。

1.2.4 標準菌株

單核細胞增生李斯特氏菌CMCC 54002，購自上海北諾生物科技有限公司。

1.2.5 檢測方法

嚴格按照《2012年食源性致病菌監測工作手冊》中的單核細胞增生李斯特氏菌檢驗標準程序進行檢測。

增菌：根據無菌操作原則，將25 g樣品加入至225 mL LB1增菌液中，30 ℃環境下培養24 h，之后取0.1 mL加入至10 mL LB2增菌液中，30 ℃環境下培養24 h。

分離培養：將LB2增菌液接種至單核細胞增生李斯特氏菌顯色培養基瓊脂平板上，35 ℃環境下培養24 h。將可疑菌落（菌落呈藍色、帶白色輪為正常，其他為可疑菌落）接種至單核細胞增生李斯特氏菌顯色培養基上，37 ℃環境下培養24 h，單核細胞增生李斯特氏菌形如傘狀或月牙狀，藍色，有動力，產酸，不產氣，周邊有一不透明圈。

初篩：從單核細胞增生李斯特氏菌顯色培養基瓊脂平板上篩選出5個可疑菌落接種于木糖、鼠李糖發酵管中，置于36 ℃環境下培養24 h，并于TSA-YE平板上于30 ℃環境下培養24 h，生化成木糖陰性、鼠李糖發酵陽性。

染色鏡檢：行革蘭氏涂片染色鏡檢，單核細胞增生李斯特氏菌為革蘭氏陽性短桿菌，直或略彎，兩側鈍圓，多V字型，無芽胞，偶為球狀、雙球狀。

生化檢驗：將TSA-YE平板上的單核細胞增生李斯特氏菌接種于生化反應管中，于36 ℃下培養24 h。

1.3 觀察指標

分析8類常用食品的單核細胞增生李斯特氏菌檢測結果，統計陽性檢出率。

2 結果

567份8類常用食品中，檢出單核細胞增生李斯特氏菌27份，陽性檢出率為4.76%，其中包括生鮮豬肉6份（5.94%）、生鮮羊肉5份（6.02%）、生鮮雞肉5份（5.10%）、凍蝦4份（7.69%）、凍帶魚2份（3.28%）與涼拌菜5份（11.63%），生鮮牛肉與冰激凌均未檢出單核細胞增生李斯特氏菌。見表1。

3 討論

近幾年，隨著人們生活水平的提高，食品安全問題越來越受重視。與此同時，隨著食源性致病菌監測機制的不斷完善，食源性疾病逐漸成為社會關注的公共衛生問題。單核細胞增生李斯特氏菌是食源性疾病的主要致病菌之一，可造成人畜同患疾病[3]。該病菌分布廣泛，在諸多食品中均有檢出，且其適應能力強，對低溫、高滲等特殊環境仍有抵抗力，甚至會在物體表層形成生物膜，其威脅性不言而喻[4]。單核細胞增生李斯特氏菌可從土壤、水、糞便等中分離出，所以對食品污染的檢測應做到全面性、多環節，包括食品加工、運送、儲藏與銷售等。

單核細胞增生李斯特氏菌經口感染可引起食物中毒。世界衛生組織的報道數據顯示，水產品中單核細胞增生李斯特氏菌的檢出率是4%～8%，奶與奶制品是5%～10%，家禽約是15%，肉與肉制品高達30%。由此可見，肉與肉制品的單核細胞增生李斯特氏菌污染風險明顯高于其他食品，原因主要在于：肉與肉制品在屠宰、運送、加工與銷售期間較易出現該菌的污染，食用前的加工處理還會出現交叉污染。隨著檢測食品種類的不斷增加，2012年張家界初次在涼拌菜中檢出單核細胞增生李斯特氏菌，且陽性檢出率高達13%。由此說明，單核細胞增生李斯特氏菌的污染范圍在不斷擴大，應引起高度重視，加強食品安全監測力度，并擴大檢測范圍[5]。

本研究對本市8類常用食品進行采樣及單核細胞增生李斯特氏菌檢測，結果顯示，567份樣品中檢出單核細胞增生李斯特氏菌27份，陽性檢出率為4.76%，低于杜偉靜等[6]報道的6.42%;樣品類型中，陽性檢出率最高的是涼拌菜，為11.63%，與上文張家界報道數據相近，其后依次是凍蝦、生鮮羊肉、生鮮豬肉、生鮮雞肉與凍帶魚;生鮮牛肉與冰激凌均未檢出單核細胞增生李斯特氏菌。由此可見，單核細胞增生李斯特氏菌在不同食品中的檢出率存在明顯差異，生鮮肉在屠宰、售賣期間易污染，而水產品中檢出該病菌可能和水質、環境有關。

分析發現研究結果，本市食品中存在著單核細胞增生李斯特氏菌污染的風險，具有潛在的食物中毒危險，因此建議相關部門加強食品安全管理，不斷完善衛生操作規范，加大食品安全抽檢力度，實施連續追蹤管理，逐漸形成完善的食品污染控制體系，快速評測食品安全風險，以進一步提高本市的食品安全水平[7]。食品生產、經營單位，應嚴格規范操作標準，加強對食品原材料加工、儲藏、運送與售賣中各個環節的質量控制，同時積極預防二次污染;制作涼拌菜時應做到操作衛生，避免交叉污染[8]。對于居民，相關部門應做好宣傳工作，以提高其食品安全意識;同時提醒居民做好家庭中刀具、砧板、餐具的清潔工作，盡可能縮短生鮮食品的儲藏時間，涼拌菜做到即拌即吃。

綜上所述，食品中存在單核細胞增生李斯特氏菌污染的風險，其中以涼拌菜的污染風險最高，應加強該方面的防控，以確保食品安全。

參考文獻

[1]孫婷婷，孫岐峰，王偉杰，等.2016—2018年遼寧省食品中單核細胞增生李斯特菌污染情況及毒力基因的檢測[J].中國微生態學雜志，2020，32（2）：156-160.

[2]俞驊，董華麗，汪皓秋，等.杭州地區相同分子型別的單核細胞增生李斯特菌臨床和食品分離株基因組分析[J].中國人獸共患病學報，2019，35（8）：699-705，710.

[3]陳偉偉，吳曉敏，廖冬冬，等.2016年福建省單核細胞增生李斯特菌臨床病例及食品來源菌株的分子特征分析[J].中國人獸共患病學報，2019，35（2）：145-148.

[4]蘆丹，劉國蓉，李宏通，等.北京市昌平區2010—2015年市售食品中單核細胞增生李斯特菌污染狀況分析[J].實用預防醫學，2018，25（3）：264-266.

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[6]杜偉靜，黃露.2015年北京市東城區市售食品單核細胞增生李斯特氏菌污染風險監測[J].首都公共衛生，2019，13（4）：179-181.

[7]吳玲玲，李艷芬，邱正勇，等.

2015—2017年河南省預包裝熟肉制品生產加工過程單核細胞增生李斯特菌監測[J].預防醫學論壇，2017，23（12）：884-886.

[8]霍哲，王晨，徐俊，等.北京市西城區食源性與臨床感染性單核細胞增生李斯特菌PFGE和MLST分型研究[J].中國預防醫學雜志，2017，18（9）：675-679.