蜂蜜中硝基呋喃檢測(cè)方法研究進(jìn)展

魯佳琦?吳晨陽(yáng)?吳秋婷?徐宇彤?張文

摘 要：蜂農(nóng)在養(yǎng)殖蜜蜂的過(guò)程中往往直接飼喂或者在蜂巢中噴灑獸藥，而硝基呋喃類(lèi)作為常見(jiàn)的抗菌藥物廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)，長(zhǎng)期食用硝基呋喃殘留量過(guò)高的食品對(duì)人體有一定的危害。本文對(duì)蜂蜜中硝基呋喃的檢測(cè)方法進(jìn)行綜述，并對(duì)發(fā)展前景進(jìn)行分析。

關(guān)鍵詞：蜂蜜;硝基呋喃;檢測(cè);進(jìn)展

硝基呋喃類(lèi)藥物是一種重要的廣譜抗菌藥物，曾廣泛用于畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。在蜂農(nóng)養(yǎng)殖蜜蜂過(guò)程中，蜜蜂易受到微生物和螨蟲(chóng)的污染而引起病害影響產(chǎn)量[1]。為有效防控疾病，蜂農(nóng)往往直接飼喂或者在蜂巢中噴灑獸藥，導(dǎo)致獸藥殘留問(wèn)題屢屢出現(xiàn)，對(duì)消費(fèi)者身體健康造成潛在威脅。相關(guān)規(guī)定要求飼養(yǎng)過(guò)程中禁止使用硝基呋喃類(lèi)藥物且在動(dòng)物性食品中不得檢出。因此，對(duì)于蜂蜜中硝基呋喃類(lèi)藥物及其代謝物的檢測(cè)具有重要意義。

1 蜂蜜中硝基呋喃類(lèi)藥物殘留檢測(cè)方法

硝基呋喃類(lèi)抗生素對(duì)光敏感，在動(dòng)物體內(nèi)的半衰期不過(guò)數(shù)小時(shí)，較難檢出原藥殘留。因此，一般常檢測(cè)硝基呋喃的4種代謝物：呋喃它酮（AMOZ）、呋喃西林（SEM）、呋喃妥因（AHD）和呋喃唑酮（AOZ）。目前報(bào)道的用于檢測(cè)蜂蜜中硝基呋喃類(lèi)抗生素代謝物殘留的方法主要有以下方法。

1.1 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是利用化合物之間質(zhì)荷比的差別的原理進(jìn)行高靈敏度檢測(cè)[2]。該方法采用微量化樣品前處理技術(shù)，建立蜂蜜中硝基吠喃類(lèi)抗生素代謝物的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，并對(duì)衍生反應(yīng)時(shí)間、液相色譜流動(dòng)相梯度洗脫程序、質(zhì)譜條件等進(jìn)行優(yōu)化。相比傳統(tǒng)分析方法，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法具有簡(jiǎn)單快速、靈敏、準(zhǔn)確與成本低等特點(diǎn)。

1.2 高效液相色譜-電噴霧多級(jí)質(zhì)譜（LCM/Sn）

高效液相色譜-電噴霧多級(jí)質(zhì)譜是利用電噴霧離子化系統(tǒng)對(duì)需要檢測(cè)的獸藥化合物的分子離子和裂片離子進(jìn)行質(zhì)量分析。提取蜂蜜中硝基呋喃類(lèi)抗生素，并且對(duì)其液相系統(tǒng)條件、質(zhì)譜系統(tǒng)條件進(jìn)行掃描分析，得出4種衍生化后的硝基呋喃類(lèi)代謝物二級(jí)質(zhì)譜圖。再通過(guò)流動(dòng)注射分析發(fā)現(xiàn)4種硝基呋喃類(lèi)代謝物衍生物二級(jí)質(zhì)譜各存在的兩個(gè)主要離子碎片進(jìn)行效率檢測(cè)以及水平測(cè)試[3]。相比傳統(tǒng)分析方法，高效液相色譜-電噴霧多級(jí)質(zhì)譜（LCM/Sn）法更加簡(jiǎn)單快速、靈敏且定性定量準(zhǔn)確。

1.3 酶聯(lián)免疫法（ELISA）

ELISA法是根據(jù)競(jìng)爭(zhēng)免疫分析原理，對(duì)一個(gè)樣本中的多個(gè)硝基呋喃類(lèi)藥物及代謝產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，具有比傳統(tǒng)分析方法更高效、操作簡(jiǎn)單、靈敏與速度快等特點(diǎn)。經(jīng)過(guò)前處理的蜂蜜樣品用芯片檢測(cè)，將顯色后的芯片放入芯片分析儀中獲取結(jié)果圖像，啟用默認(rèn)的芯片和專(zhuān)用軟件進(jìn)行自動(dòng)化分析，檢測(cè)出蜂蜜中硝基呋喃類(lèi)的4種代謝物濃度[4]。

1.4 同位素稀釋質(zhì)譜法

同位素質(zhì)譜法采用同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜，與液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜定量分析中采用的其他內(nèi)標(biāo)技術(shù)相比，由于化合物與帶有其同位素標(biāo)記的化合物的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)相似，可以最大限度降低系統(tǒng)誤差，提高檢測(cè)的穩(wěn)定性和定性定量分析的準(zhǔn)確性。

1.5 其他方法

國(guó)內(nèi)外常見(jiàn)的檢測(cè)蜂蜜中硝基呋喃的方法還有液相色譜法、常規(guī)理化檢測(cè)法、毛細(xì)管電泳法與分子印跡技術(shù)等方法。

2 蜂蜜中硝基呋喃代謝物殘留檢測(cè)方法的發(fā)展前景

蜂蜜是我國(guó)的傳統(tǒng)食品，雖然有對(duì)蜂蜜中硝基呋喃代謝物殘留的研究，但是研究過(guò)程中操作復(fù)雜、樣品回收率低、樣品難以提取和利用、靈敏度不高且干擾因素多。因此未來(lái)蜂蜜中硝基呋喃代謝物殘留檢測(cè)技術(shù)必將向微量、快速、便捷、多維且全面的方向發(fā)展，或?qū)F(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)聯(lián)用，應(yīng)用新興技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)方法的創(chuàng)新與改進(jìn)，達(dá)到低成本、高效率的目的，并獲得更加準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

[1]DELAPLANE KS. Honey bees and beekeeping. University of GeorgiaCooperative Extension Bulletin[EB/OL]（.2010-02-22）[2017-10-15].http：//www.i4at.org/lib2/bees.htm.

[2]高洋洋，劉鑫，陳廣全.蜂蜜中硝基呋喃代謝物的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定法[J].職業(yè)與健康，2018，7（34）：1764.

[3]蔣原，丁濤，沈崇鈺，陳惠蘭.液相色譜-電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)蜂蜜中四種硝基呋喃類(lèi)代謝物[J].畜牧與獸醫(yī)，2005（03）：12-15.

[4]許月明，潘言方，李慧慧.ELISA可視化微陣列芯片法檢測(cè)蜂蜜中硝基呋喃類(lèi)藥物的殘留量[J]科技文苑，2018，113（18）：147-150.

基金項(xiàng)目：西南科技大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新基金項(xiàng)目（編號(hào)：JZ-067）。

作者簡(jiǎn)介：魯佳琦（1999—），女，漢族，吉林白城人，本科。研究方向：食品安全檢測(cè)。

通訊作者：張文（1988—），男，漢族，四川德陽(yáng)人，博士，副教授。研究方向：食品品質(zhì)與安全檢測(cè)。