兩種糖化血紅蛋白分析系統間的臨床對比

摘 要：目的：對比分析愛科來醫療科技（平湖）有限公司與日本東曹株式會社分別研發生產的全自動糖化血紅蛋白分析儀及配套試劑，評估其臨床上的一致性。方法：研究納入天津醫科大學代謝病醫院、天津市第二人民醫院的臨床樣本共計269例，針對同一患者身上采集的全血及溶血樣本，同時用兩種分析系統檢測糖化血紅蛋白（HbA1c）含量，進行統計分析。結果：針對268例全血樣本，卡方檢驗結果為0.375，Kappa值為0.962，做散點圖分析其線性相關性系數r2為0.997;針對265例溶血樣本，卡方檢驗結果為0.063，Kappa值為0.962，做散點圖分析其線性相關性系數r2為0.998。分析：兩種全自動糖化血紅蛋白分析儀及配套試劑在檢測同一全血或溶血樣本時，檢測結果顯著相關，證明對于同一受試者的不同類型（靜脈全血、血清、血漿）樣本檢測有較高一致性。

關鍵詞：全自動糖化血紅蛋白分析儀;HbA1c;糖化血紅蛋白;一致性評價

當今社會，糖尿病已成為困擾人類的一大頑疾。人體血液中紅細胞內的血紅蛋白與血糖結合的產物是糖化血紅蛋白，血紅蛋白的糖化發生在紅細胞壽命的120天內，所以糖化血紅蛋白（HbA1c）常反映數周至數月的平均血糖水平，它不受采血時間、禁食或使用胰島素的影響。因此，HbA1c被認為是判斷糖尿病長期控制情況的良好參數，同時還是糖尿病首選診斷指標[1]。HbA1c的檢測結果能客觀反映患者近6-8周的血糖代謝水平，是目前國際上公認的可反映糖尿病患者長期血糖控制狀況的“金標準”，在臨床上被廣泛應用[2]。

目前HbA1c常規測定方法有高效液相色譜（HPLC）法、親和層析法、免疫法、電泳法、酶法等。愛科來醫療科技（平湖）有限公司研發生產的全自動糖化血紅蛋白分析儀，是一臺國產儀器，能檢測穩定型HbA1c、HbF，平均48秒檢測一個樣本，其基本原理是通過反向陽離子交換層析柱法檢測血液中的HbA1c，稀釋后的血液樣本送到層析柱，層析柱根據高效液相色譜法（HPLC）將樣本分離為多種血紅蛋白成分，通過雙波長比色法檢測從層析柱洗脫的各成分，血液在波長420nm附近時有一個特征性吸收峰，吸收強度隨血紅蛋白濃度增高而增強，而在波長500nm附近時，峰高就不會再特異地發生改變，可消除背景影響，再利用微型計算及處理所得結果，從而獲得峰鑒別和含量。在浙江省醫療器械檢驗研究院進行的注冊檢驗中，用糖化血紅蛋白成分標準物質（高、低）作為樣本進行檢測，分析儀測定結果的相對偏差在±8%范圍內;檢測樣本濃度為4.0%—6.5%（20.2mmol/mol—47.5 mmol/mol）的樣本，分析儀重復測量結果變異系數CV均不大于3.0%;在分析儀檢測范圍3%—20%范圍內，檢測結果的線性相關系數r不小于0.9900;攜帶污染率不大于3.0%;開機穩定后8h內，檢測同一正常樣本結果的相對偏差不超過±3.0%。以上幾點證明其在實驗室檢測時擁有良好性能。

市面上的全自動糖化血紅蛋白分析儀一般都具有良好的實驗室精密度和室內重復性，但臨床結果可能各不相同。本臨床研究旨在觀察、評價愛科來醫療科技（平湖）有限公司與日本東曹株式會社分別研發生產的全自動糖化血紅蛋白分析儀及配套試劑，評估其臨床結果上的一致性，同時判斷國產與進口分析系統間的差距，以期更好的服務于臨床科室。

1.材料與方法

1.1材料

1.1.1樣本

按照試驗方案要求，在天津醫科大學代謝病醫院、天津市第二人民醫院兩家臨床單位試驗總樣本數不低于240例全血樣本及其同樣的溶血樣本。樣本均來自于2017年2月至5月，兩家機構的臨床科室檢驗剩余樣本。

入選標準：年齡在18歲以上，性別不限，隨機入組;不得使用碘醋酸抗凝劑的血液樣本，可以使用肝素、EDTA-2Na、EDTA-2K、EDTA-3K、NaF等抗凝劑;全血狀態下2-8℃冷藏保存3-4日，不使用去除血漿的樣本。

排除標準：樣本信息不全或樣本量不足以完成全部試驗的;微生物污染的樣本;不符合樣本采集和處理要求的樣本。

剔除標準：絕對偏倚分析和相對偏倚分析均超出限定（參照NCCLS-EP9-A2要求）[3]。

1.1.2試驗設備

愛科來醫療科技（平湖）有限公司生產的全自動糖化血紅蛋白分析儀（型號：HA-8180）（注冊證編號：浙械注準20172401149），配套試劑為：糖化血紅蛋白分析用洗脫液ELUENT 80A、ELUENT 80B、80H等。

日本東曹株式會社生產的Tosoh Automated Glycohemoglobin Analyzer （全自動糖化血紅蛋白分析儀）（型號：HLC-723G8）（注冊證編號：國食藥監械（進）字2014第2402004號），配套試劑為：洗脫緩沖液G8-第1液、G8-第2液、G8-第3液、溶血-洗凈液等;

1.2試驗倫理及方法

該臨床試驗分別通過天津醫科大學代謝病醫院醫學倫理委員會、天津市第二人民醫院醫學研究倫理委員會倫理審查。選取檢驗科剩余血液樣本，同時在兩臺分析系統上檢測HbA1c，以HbA1c≥6.5%作為診斷糖尿病的判斷依據，收集數據進行統計分析。本臨床試驗由兩家機構主要研究者負責，與愛科來醫療科技（平湖）有限公司共同制定臨床試驗方案。按照要求，人員培訓完成后，開始進行驗證。操作嚴格按說明書進行，符合說明書結果判定條件的情況時，待測樣本結果成立。出現和預期結果不相符時，立即停止試驗，待查明原因后，繼續進行。試驗結束，由專人進行數據統計、整理、核對。

1.3統計學方法

所有數據匯總并通過SPSS 20.0統計學軟件按照定性結果及定量結果，分別進行統計，其中定性結果分析計算卡方（McNemar檢驗）值、Kappa值，定量結果分析計算線性相關性。

將以下幾點作為評價標準：卡方分析（McNemar檢驗）大于0.05、kappa值大于0.75、線性相關分析r2>0.95，以此來評價兩個分析系統間的臨床一致性。同時，以臨床試驗過程中是否出現不良事件作為安全性評價指標。

2.結果

2.1全血樣本

臨床試驗兩家臨床單位共入組270例全血樣本，其中代謝病醫院有一樣本信息記錄不清晰導致原始結果不可信，予以排除;天津第二人民醫院一例樣本檢測時系統傳輸問題導致全血結果不可信，予以排除。故共有268例全血樣本入組。

2.1.1定性結果分析

2.1.1.1卡方檢驗（McNemar檢驗）

卡方檢驗中的McNemar檢驗，p=0.375，>0.05，表明假設H0成立，兩種分析系統在檢測HbA1c含量時，結果沒有差異。

2.1.1.2 KAPPA檢驗

KAPPA檢驗結果為0.962，>0.75，兩種分析系統在檢測HbA1c含量時，結果高度一致。

2.1.2定量結果分析

2.1.2.1 線性相關性

通過作散點圖，計算得線性回歸的方程為：Y=0.974X+0.041，相關系數r2為0.997。

2.2溶血樣本

臨床試驗兩家臨床單位共入組270例溶血樣本，另外有一例以伯樂高值質控品配制的溶血樣本，共271例樣本。其中代謝病醫院有1樣本信息記錄不清晰導致原始結果不可信，予以排除;天津市第二人民醫院5例樣本檢測時儀器故障導致溶血結果未檢出，予以剔除。故共有265例溶血樣本入組。

2.2.1定性結果分析

2.2.1.1卡方檢驗（McNemar檢驗）

卡方檢驗中的McNemar檢驗，p=0.063，>0.05，表明假設H0成立，兩種分析系統在檢測HbA1c含量時，結果沒有差異。

2.2.1.2 KAPPA檢驗

KAPPA檢驗結果為0.962，>0.75，兩種分析系統在檢測HbA1c含量時，結果高度一致。

2.2.2定量結果分析

2.2.2.1 線性相關性

通過作散點圖，計算得線性回歸的方程為：Y=0.984X+0.143，相關系數r2為0.998。

3.討論

本次臨床試驗實際完成樣本共計為270例。經過樣本分析，排除或剔除了不合格樣本后，全血樣本、溶血樣本經過兩個分析系統間的試驗結果比較，兩者的檢測結果一致性很好。其結果總結如下：

通過本臨床試驗及統計分析結果，可以看到兩種全自動糖化血紅蛋白分析儀在檢測HbA1c含量時，具有較高的一致性，且臨床試驗期間未出現不良事件和其他安全性事件。由此可以看到，以以上兩款為代表的國產和進口分析系統在檢測HbA1c含量時結果高度一致，可為臨床科室選擇該種分析系統提供參考。

參考文獻：

[1] ?中華醫學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南（2010年版）[J].中國醫學前沿雜志，2011，3（6）：54-109.

[2] ?宋銀丹，段勇.糖化血紅蛋白檢測標準化的研究進展[J].實驗與檢驗醫學，2013，31（2）：108-110.

[3] Clinic and Laboratory Standards Institute.Method comparison and bias estimation using patient sample;approverd guideline，EP9-A[S].Wanye，PA，USA：CLSI，1995.

作者簡介：

吳玲麗（1993.04），性別：女，民族：漢族，籍貫（精確到市）：浙江省嘉興市，當前職務：科員，當前職稱：助理工程師，學歷：本科，研究方向：生物醫學工程.